辽宁省自然科学基金(20082083)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：娄毅何向民李建华宋清斌更多>>
- 相关机构：中国医科大学附属第一医院中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 核糖核酸干扰沉默生长抑制因子1基因表达对胃腺癌AGS细胞凋亡的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨RNA干扰沉默生长抑制因子1（ING1）基因表达对胃腺癌AGS细胞凋亡的影响。方法人胃腺癌细胞株AGS经常规培养后分为空白对照组、阴性对照组[转染阴性对照小干扰RNA（siRNA）序列]、siRNA组（转染特异性ING1 siRNA序列）。应用免疫荧光、定量PCR和免疫印迹方法检测转染后不同时间的ING1基因表达沉默效果。应用流式细胞技术检测ING1基因表达沉默对AGS细胞凋亡的影响。结果ING1主要在AGS细胞胞质中表达。在荧光定量PCR技术检测中将空白对照组的ING1基因表达量设为1，则转染后24和40h阴性对照组的ING1基因相对表达量分别为0．88±0．16和0．92±0．13，siRNA组ING1基因相对表达量分别为0．38±0．09和0．17±0．06。空白对照组和阴性对照组比较，P值分别=0．78和0．82。空白对照组和siRNA组比较，P值均=0．01。阴性对照组和siRNA组比较，P值分别=0．02和0．01。免疫印迹技术检测结果显示，转染后40hAGS细胞中ING1蛋白表达水平明显下调。空白对照组AGS细胞凋亡率为11．06％±0．97％，阴性对照组、siRNA组转染40h后AGS细胞凋亡率为11．82％±0．69％和6．70％±0．41％。空白对照组与siRNA组比较P=0．024。空白对照组与阴性对照组比较P=0．76。阴性对照组与siRNA组比较P=0．019。结论ING1在人胃癌细胞凋亡过程中发挥重要作用，可能成为胃癌基因治疗的新靶点。
- 何向民娄毅宋清斌李建华
- 关键词：RNA干扰胃肿瘤腺癌
- ING1基因沉默后通过抑制Caspase 2调节胃腺癌AGS细胞凋亡被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨RNA干扰沉默ING1基因表达对胃腺癌细胞AGS细胞凋亡的影响机制。方法:将体外合成的ING1基因特异性的siRNA利用脂质体2 000转染到胃腺癌细胞AGS,应用流式细胞技术和TUNEL技术检测ING1基因表达沉默对AGS细胞凋亡的影响应用荧光定量PCR技术和Western blot技术检测转染后40 hAGS细胞中ING1、Caspase 2和Caspase 3的表达。结果:转染后40 h,体外合成的siRNA对AGS细胞的ING1表达抑制作用明显。转染前凋亡率为(11.06±0.97)%,转染40 h后凋亡率为(6.70±0.41)%,转染前后凋亡率的改变差异有统计学意义(P<0.05)。转染后40 h AGS细胞中ING1、Caspase 2和Caspase 3的mRNA相对表达分别为0.170 7±0.06,0.125±0.03和0.999±0.10。转染后40 hAGS细胞中ING1、Caspase 2和Caspase 3的蛋白质水平改变的趋势与mRNA水平一致。结论:RNA干扰沉默ING1基因表达后,AGS细胞中Caspase 2表达明显下调,ING1基因沉默后通过抑制Caspase 2调节胃腺癌细胞AGS细胞凋亡。
- 何向民娄毅宋清斌李建华
- 胃癌组织ING1抑癌基因表达及其生物学意义探讨被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨生长抑制因子1(ING1)基因表达及其与胃癌临床病理特征的关系。方法:荧光定量PCR技术和免疫印迹技术检测70例胃腺癌组织及癌旁对照胃黏膜组织中ING1基因的表达水平,并分析其与胃癌患者临床特征的关系。结果:70例癌组织中有57例(81.43%)ING1基因mRNA表达明显下调,其中4例组织为ING1表达缺失,与癌旁正常胃黏膜比较差异有统计学意义,P<0.01。ING1基因表达与胃癌患者的性别无明显相关性,与胃癌的分化程度、肿瘤累及深度以及淋巴结转移有关。结论:ING1在人胃癌细胞中表达下调,其表达水平与分化程度、肿瘤累及深度以及淋巴结转移有关。
- 何向民娄毅宋清斌李建华
- 关键词：胃肿瘤基因肿瘤抑制
