转基因生物新品种培育专项(2012ZX08009001)
- 作品数：12 被引量：46H指数：5
- 相关作者：瞿绍洪袁正杰王国梁何海燕王旭丽更多>>
- 相关机构：浙江省农业科学院浙江师范大学中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金浙江省农业科学院科技创新能力提升工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 粳稻品种Oochikara稻瘟病抗性基因挖掘被引量：7
- 2016年
- 对水稻品种Oochikara(Oryza sativa L.ssp.japonica)进行稻瘟病抗性分析,发现Oochikara对来自不同地区的30个稻瘟菌菌株具有高效的广谱抗性。利用等位基因挖掘技术,从Oochikara鉴定出4个已知稻瘟病抗性基因(R gene):Pish、Pia、Pikm和Pita。此外,利用稻瘟菌菌株08-7-3对Oochikara和感病品种E103杂交后代进行稻瘟菌喷雾接种和遗传分析,发现Oochikara还存在其他新的抗性基因。以上研究结果初步揭示了Oochikara对稻瘟病的抗性来源,有助于利用Oochikara作为抗性中间材料开展稻瘟病抗性育种工作。
- 徐小金董波陶跃之王华
- 关键词：稻瘟菌抗性基因
- 抗水稻黑条矮缩病转基因材料的鉴定分析被引量：1
- 2016年
- 针对水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)的核心粒子外壳蛋白基因(S8)、毒质与非结构蛋白基因(S9)及其嵌合基因(S8&S9)构建了6个RNAi载体,经农杆菌介导转化武陵粳1号获得转基因植株。通过潮霉素溶液浸泡法对转基因植株进行初步筛选,剔除假阳性植株;再通过PCR从DNA水平进行转基因阳性鉴定;进一步通过q RT–PCR从RNA水平进行转基因表达量分析。选取q RT–PCR表达量高的单拷贝纯系S8后代进行灰飞虱传毒试验,结果表明,含有S8 RNAi片段的转基因水稻材料对RBSDV具有一定抗性。
- 尹鲜思王少岭崔益平陈秋红王国梁王志龙
- 关键词：水稻水稻黑条矮缩病转基因株系RNA荧光定量PCR
- 水稻苗期纹枯病抗性鉴定微室接种技术的改良被引量：6
- 2015年
- 水稻对纹枯病的抗性属于典型的数量性状,多数栽培品种的抗病水平较低,并且抗性差异较小.水稻纹枯病接种和抗性评价体系是培育抗病品种的重要基础.利用植物生长箱的控温、控光和控湿条件以及生长势相对一致的水稻秧苗,对苗期纹枯病微室接种技术进行了改进.试验品种苗期的纹枯病抗性从高到低依次为 YSBR1、特青、泰粳394、日本晴和 Lem-ont,并且与大田成株期接种鉴定的结果一致.RT-PCR 分析显示,苗期和成株期接种纹枯病菌均诱导4个水稻抗病相关基因的表达.通过“叶枕高”和“苗挺高”计算的各品种苗期病级变幅分别为2．82～8．54级和1．20～3．39级.前者与大田成株期的病级变幅一致,因而“叶枕高”病级计算方法更适用于微室接种鉴定体系.
- 徐国娟袁正杰左示敏潘学彪王志龙瞿绍洪
- 关键词：水稻纹枯病抗病相关基因
- 乙烯信号传导途径因子OsEIL 6调控水稻抗稻瘟病反应被引量：5
- 2020年
- 稻瘟病(rice blast)是水稻生产上最严重的病害之一。抗病相关基因的挖掘对稻瘟病的防治具有重要意义。研究表明植物EIN 3/EIL家族基因在抗病过程中发挥着重要作用。本研究采用RNAi技术探究OsEIL6参与的水稻抗稻瘟病反应。稻瘟菌侵染时基因表达谱检测结果表明,OsEIL6在水稻和稻瘟菌非亲和组合中受到诱导表达。稻瘟菌接种结果显示,水稻OsEIL6沉默株系和野生型植株‘TG394’相比抗性下降;实时荧光定量RT-PCR结果分析表明,OsEIL6的表达量下降导致乙烯合成途径中OsACO1和乙烯信号传导途径的OsERF063和OsERF073的转录水平下降。亚细胞定位研究发现该基因定位于水稻细胞质。OsEIL6沉默株系中ROS合成途径标记基因OsrbohA和OsrbohB的表达量均明显下调,表明该基因可能通过影响ROS的合成调控水稻抗稻瘟病反应。本研究结果将有助于进一步揭示OsEIL6参与的乙烯信号传导途径介导的水稻抗稻瘟病反应机制。
- 赵玉丹朱晓颖徐国娟王旭丽
- 关键词：水稻稻瘟病抗病性乙烯
- 水稻抗稻瘟菌HIGS表达载体的构建及遗传转化被引量：6
- 2015年
- 水稻是我国主要粮食作物之一,而稻瘟病是影响水稻安全生产的最主要病害之一。为克服抗病基因的抗病性很快消失的弊端,本研究尝试了宿主诱导的基因沉默(HIGS)技术在创制抗稻瘟病水稻新材料上的可行性。HIGS是新发展起来的以RNAi为基础的抗病技术,即在寄主植物中表达可沉默病原物特定基因的HIGS载体,达到控制病原菌扩展的目的。本研究选取了两个稻瘟菌致病关键基因Nox1和NAC为研究靶标,分别克隆其UTR区和CDS区中的特异区段,利用Gateway技术构建这4个片段HIGS表达载体,再利用农杆菌介导法将各载体分别转化水稻,通过鉴定得到转基因阳性植株,为后续开展该技术在水稻抗稻瘟病方面的深入研究奠定了基础。
- 王梦颖刘敬瞿绍洪王旭丽王国梁
- 关键词：水稻稻瘟病
- 香豆素合成途径关键酶基因Ghpal、Ghc4h和Gh4cl在棉花抗链格孢菌中的作用被引量：5
- 2017年
- 链格孢菌Alternaria alternata引起的棉花轮纹斑病,是导致棉花早衰发生的主要成因之一,严重危害棉花生产。香豆素合成途径作为合成植保素的一条代谢支路,其产物能够抑制病原菌,增强植物的抗病性。为了揭示该途径在棉花抗链格孢菌中的作用,本文利用棉花皱缩病毒介导的基因沉默技术,通过对棉花香豆素合成途径中编码关键酶基因的沉默抑制,来解析其在棉花抗链格孢菌中的作用,所选择的基因有编码苯丙氨酸解氨酶(PAL)的基因Ghpal、肉桂-4-羟化酶(C4H)基因Ghc4h和4香豆酸-辅酶-A(4CL)的基因Gh4cl。结果显示,Ghpal、Ghc4h和Gh4cl基因受链格孢菌诱导转录,表明这些基因可能参与了棉花对链格孢菌的抗性反应。Ghpal、Ghc4h和Gh4cl基因分别被沉默后,结果显示各基因沉默植株对链格孢菌的抗性下降,表现为接种链格孢菌后,基因沉默植株的病情指数分别为43.36、38.27和44.78,显著高于野生型和VIGS空载体对照植株。这表明,Ghpal、Ghc4h和Gh4cl参与了棉花对链格孢菌的抗性反应。此外,离体条件下给Ghpal、Ghc4h和Gh4cl基因沉默植株叶片饲喂外源香豆素,结果发现基因沉默植株对链格孢菌的抗性得到恢复。这一结果进一步表明香豆素合成途径在棉花抗链格孢菌中起着重要作用。
- 张珊珊翟伟卜郭慧敏张文蔚简桂良齐放军
- 关键词：棉花链格孢菌抗性作用
- 水稻离体叶片纹枯病接种样品菌量检测方法研究被引量：4
- 2018年
- 利用q PCR方法对水稻离体叶片纹枯病接种材料进行纹枯病菌含量的检测,从而对水稻发病程度进行定量分析。各水稻品种接种样品的纹枯病菌DNA含量,从低到高的顺序为:YSBR1、徐稻3号、台北309、泰粳394和Lemont。通过对接种实验条件的精确控制,离体叶片的病斑扫描,以及相对病斑面积的统计分析,验证了关于病害严重程度的q PCR检测结果。大田接种试验中,YSBR1、Lemont和泰粳394的平均病级呈显著差异;这进一步证明,通过纹枯病菌DNA的q PCR方法,能够快速有效地定量检测不同水稻品种的纹枯病抗性差异。该研究可为量化纹枯病发病程度、评价水稻品种的抗性水平及进行纹枯病的早期预报,提供有效的检测手段。
- 曲海艳袁正杰潘龙玉何海燕许赵蒙瞿绍洪
- 关键词：水稻纹枯病
- VIGS技术高通量筛选棉花抗黄萎病相关基因被引量：3
- 2016年
- 黄萎病是严重影响棉花生产的一种土传性维管束真菌病害,长期以来,因缺乏行之有效的手段,有关棉花对黄萎病菌抗性分子机制的研究难度很大,进展缓慢.病毒诱导基因沉默(VIGS)这一反向遗传学技术的建立和应用,为研究和阐明棉花基因的功能提供了新的契机.本研究挑选可能与棉花抗黄萎病相关的基因,通过VIGS方法进一步明确和验证这些基因在棉花抗黄萎病菌中的作用.共成功构建了62个基因的VIGS载体,通过重复筛选实验,最终筛选出一些与棉花抗黄萎病相关的基因,其中乙烯信号途径正调控因子EIN2,植物病原应答诱导蛋白基因DIR,木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTH)被沉默后,沉默棉花植株对黄萎病菌的抗性明显减弱,表明这些基因可能通过不同的信号途径参与棉花对黄萎病菌的抗性.
- 郑娜郭安慧翟伟卜郭慧敏张珊珊张文蔚简桂良韩榕齐放军
- 关键词：棉花黄萎病VIGS高通量筛选抗性相关基因
- 水稻离体叶片抗纹枯病接种方法的研究被引量：10
- 2016年
- 水稻纹枯病是影响水稻生产的重要病害之一。水稻纹枯病抗性属于数量遗传性状,目前尚未发现高抗或免疫的水稻种质材料。为了提高水稻抗纹枯病种质的筛选和研究效率,对水稻离体叶片抗纹枯病接种的实验条件进行了更精确的控制,并采用了量化的病情调查方法。取纹枯菌接种离体水稻叶片组织进行qRT-PCR分析,水稻病程相关基因呈诱导表达,验证了纹枯病菌对水稻的侵染。采用离体叶片接种、大田成株期接种、苗期"微室"接种法,对抗纹枯病水稻品种和敏感品种进行测试。抗性品种和敏感品种纹枯病病级的统计检验呈显著差异,3种方法的结果表现一致。改进的离体叶片接种方法具有易于操作和重复性好的优点,适用于大规模筛选抗纹枯病水稻种质材料。
- 马晨燕袁正杰杨海河曲海艳何海燕张玉瞿绍洪
- 关键词：水稻纹枯病RHIZOCTONIASOLANI病程相关基因
- 水稻-病原菌互作途径研究进展
- 2014年
- 水稻稻瘟病和白叶枯病分别由真菌病原菌Magnaporthe oryzae(M.oryzae)和细菌病原菌Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo)引起,是造成世界范围内水稻减产的主要病因,水稻-稻瘟病菌及水稻-白叶枯病原菌互作已成为研究植物-病原菌互作的模式系统。本研究归纳了目前已克隆的抗稻瘟病及白叶枯病基因与其分子结构和功能,概括了近年来鉴定的一些病原菌相关分子(Pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)及稻瘟病菌和白叶枯菌分泌的效应蛋白,并总结了针对稻瘟病菌和白叶枯菌介导的病原物分子诱导的抗病反应(PAMP-triggered immunity,PTI)和效应蛋白诱导的抗病性(Effectortriggered immunity,ETI)及其信号传导途径的研究成果,指出效应蛋白-抗病蛋白间互作将为探索植物-病原菌间互作提供新的分子基础,并为水稻抗病育种实践提供借鉴与指导。
- 何艳冰范锡麟王国梁王志龙
- 关键词：水稻稻瘟病菌
