国家自然科学基金(30700368)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：杨俊伟王笑云邢昌赢王宁宁居小兵更多>>
- 相关机构：南京医科大学第二附属医院江苏省人民医院南京医科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 尿毒症患者桡动脉钙化与平滑肌肌动蛋白α及骨桥蛋白表达关系的研究被引量：1
- 2008年
- 目的:观察30例尿毒症患者桡动脉钙化的组织学特点并分析可能的机制。方法:用硝酸银染色和茜素红染色了解血管钙化的情况,免疫组化研究平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)和骨桥蛋白(OP)的表达特点,并在体外高钙磷的培养条件下,观察大鼠血管平滑肌细胞上述指标的变化。结果:11例尿毒症患者出现桡动脉钙化,主要局限于血管中层,与血钙磷乘积水平升高密切相关。平滑肌层α-SMA表达明显减弱,轻/中度钙化组为71.11%±4.93%,重度钙化组为54.66%±5.15%,与无钙化组(89.54%±2.92%)相比有显著性差异(P<0.01);钙化的血管平滑肌细胞中骨桥蛋白的含量亦明显增加(轻/中度钙化组为22.19%±7.12%,重度钙化组为37.87%±6.17%),显著高于无钙化组(6.85%±6.19%,P<0.01)。当用高钙磷的营养液培养10天后,血管平滑肌细胞间出现钙盐沉积,OP蛋白的含量明显增加,伴α-SMA表达减少。结论:尿毒症患者的血管钙化以中层为主,高钙磷乘积的环境可诱导血管平滑肌细胞α-SMA的表达明显减少、OP含量增多,表现出类似成骨样细胞的生物学特点。
- 王宁宁杨俊伟俞香宝胡建明邢昌赢彭韬钱军王笑云
- 关键词：尿毒症血管钙化桡动脉血管平滑肌细胞骨桥蛋白
- 体外高磷环境下血管平滑肌细胞转分化过程的研究被引量：6
- 2009年
- 目的观察体外高磷培养条件下，血管平滑肌细胞（VSMC）向类似成骨样细胞转分化的动态变化特点。方法Western印迹和免疫荧光法观察不同磷浓度（1．0、2．5、3．5mmol／L）培养条件下，人VSMC的标志蛋白理平滑肌肌动蛋白（α-SMA）以及成骨细胞特异性的核转录因子CbfαI、相关骨基质蛋白（骨桥蛋白、Ⅰ型胶原和骨钙素）的动态变化过程。实时荧光定量PCR法分析上述指标的基因表达水平。在此基础上，以硝酸银染色和茜素红染色了解细胞的钙盐沉积状况，最后通过电镜观察不同培养条件下细胞超微结构的改变。结果在无血清的培养条件下，高磷（2．5、3．5mmol／L）刺激细胞12h时，胞内Cbfα1的表达就明显增加（P〈0．05）；3d后高磷组（2．5、3．5mmol／L）细胞中I型胶原和骨桥蛋白的含量显著上调（均P〈0．05）；第6天骨钙素的产生开始增加；15d时高磷组（2．5、3．5mm01／L）α-SMA的含量才显著下降（P〈0．05）。实时荧光定量PCR结果显示，高磷环境培养1d时，细胞中骨桥蛋白、I型胶原的mRNA水平显著升高（均P〈O．05）；5d时骨钙素的mRNA表达显著增加（P〈0．05）；10d时α—SMA的mRNA含量显著减少（P〈0．05）。在高磷营养液中培养15d时，细胞出现多处斑片状的钙盐沉积。电镜可见胞质内产生大量胶原纤维和钙化的基质囊泡。结论高磷可诱导VSMC向类似成骨样细胞转分化，这是一个复杂的、有多个环节、有序的动态变化过程。
- 王宁宁王笑云杨俊伟邢昌赢居小兵孙彬周书琴闻萍熊明霞
- 关键词：肌细胞平滑肌钙质沉着症磷
- 成人主动脉血管平滑肌细胞的体外培养被引量：3
- 2008年
- 目的:建立成人主动脉血管平滑肌细胞的体外培养方法:方法:无菌条件下分离出成人胸主动脉的平滑肌层,剪成1 mm×1 mm×1 mm的碎片,用组织块贴壁法,以含胎牛血清的DMEM培养基进行培养,牛长融合的细胞用0.25%的胰酶消化、传代。观察培养细胞的形态学特点,并用免疫荧光的方法检测血管平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)的表达。结果:在贴壁培养10～12天后,组织块的边缘开始有少量细胞爬出,呈长梭形,胞浆透亮、丰富:继续培养1～2周后组织块边缘融合,呈典型的"峰谷"样表现。消化传至3～8代,细胞的生长特性未见明显改变,免疫荧光显示细胞α-SMA的表达丰富。结论:组织块贴壁法培养人主动脉血管平滑肌细胞是一种稳定、可行的实验方法。
- 居小兵王宁宁杨俊伟王笑云孙彬邢昌赢
- 关键词：血管平滑肌细胞
