陕西省科技攻关计划(2006KZ07-G2)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 相关作者：张彦明孙永科杨玉艾王养会张为民更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：陕西省科技攻关计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 表达猪瘟病毒石门株E2抗原的重组腺病毒构建及免疫性研究被引量：5
- 2007年
- 应用PCR从pMD18-T-E2质粒中扩增编码猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的基因片段,定向克隆到重组腺病毒Adeasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带CSFVE2基因的重组腺病毒基因组质粒pAdEasy-E2,转染293细胞,成功包装出重组腺病毒pAd-E2,PCR证实E2基因已整合至腺病毒基因组中,Western blot结果检测到重组病毒转染293细胞中E2蛋白的表达。ELISA检测结果表明,pAd-E2能刺激小鼠产生高效价的抗体,也能刺激猪体产生抗体。将pAd-E2通过肌肉和皮下接种途径免疫商品化猪2次,21d后用1000倍TCID50CSFV强毒攻击。pAd-E2免疫组有1/4头死亡,而非重组腺病毒pAd-CMV免疫组和空白对照组全部死亡。该研究为研制猪瘟基因工程疫苗提供了有用的数据。
- 孙永科杨玉艾王养会张彦明
- 关键词：腺病毒猪瘟病毒E2基因同源重组
- 太白蓼提取物体外抑制新城疫病毒及5种细菌的活性部位筛选被引量：4
- 2009年
- 【目的】筛选太白蓼提取物抑制新城疫病毒(NDV)及5种细菌的活性部位。【方法】采用细胞病变法和MTT法测定太白蓼提取物对NDV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上增殖的影响,并用琼脂扩散和试管稀释法进行了抑菌试验。【结果】太白蓼乙酸乙酯部位(PTKE)及其分离物EB,对NDV在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的抑制率分别为32.49%和66.31%(P<0.01);分离物EB药毒混合感作组对NDV的抑制率显著高于先给药后接毒组和先接毒后给药组(P<0.01),质量浓度在78.13μg/L以下时,先给药后接毒组对NDV的抑制率显著高于先接毒后给药组(P<0.01),当质量浓度为156.3μg/L以上时,2组间差异不显著(P>0.05),药物质量浓度与病毒抑制率间存在明显的量效关系(P<0.05)。PTKE对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌和无乳链球菌的最低杀菌浓度(MBC)分别为100,25,50,25和50 mg/mL;而PTKE的分离物EA、EB和EC对大肠埃希菌和巴氏杆菌无抑菌作用,EA对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌的MBC分别为2.5和5.0 mg/mL,EB对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和无乳链球菌的MBC分别为1.25,5.0和2.5 mg/mL,EC对金黄色葡萄球菌的MBC为2.5 mg/mL。【结论】太白蓼提取物具有体外抑制NDV和细菌的作用。
- 张为民张彦明郭抗抗
- 关键词：新城疫病毒体外抑菌活性部位
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：2
- 2008年
- 参照国内外已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF7的基因序列及其相关的RT-PCR检测方法设计一对引物,扩增目的片段为535bp。通过对RT-PCR检测方法的特异性、敏感性、重复性试验,建立了一种PRRSV的RT-PCR检测方法。该方法具有快速、敏感、特异等优点,可用于PRRSV的检测、流行病学调查等。应用此方法对临床样品进行了检测,阳性检出率达66.7%。
- 董战礼王晶钰王学艳
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒
