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病毒性出血性败血症病毒(VHSV)实时荧光环介导等温扩增检测方法的建立被引量：4: 2013年; 根据VHSV的较为保守的glyG基因,设计了三套LAMP引物,筛选出扩增效率最优的第二套引物VHSV-2,引入其环引物以加快其反应。采用ESE-Quant tube scanner(德国QIAGEN公司)恒温实时荧光反应及检测平台,反应温度为63℃,恒温下30min内可得出结果。同时评价VHSV引物的灵敏度和特异性,灵敏度结果显示其检测限可达到4.5pg每反应,与几种重要的病原RNA均无交叉反应。本文建立的检测VHSV的RT-LAMP检测方法简单、易操作,同时具有较高的灵敏度和特异性。本研究建立的实时荧光RT-LAMP检测方法可作为VHSV的快速诊断工具,适合VHSV的现场快速检测和大规模监控。; 陈进会陈文黄伟李红梅石磊邱杨刘建丽叶蕾唐大运; 关键词：环介导等温扩增

3种鱼类弹状病毒荧光定量环介导等温扩增检测方法的建立被引量：1: 2015年; 鲤春病毒血症病毒(SVCV)、病毒性出血性败血症病毒(VHSV)和传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)是严重危害水产养殖业的3种鱼类弹状病毒。为建立这3种鱼类弹状病毒的快速检测方法,本研究设计合成针对这3种病毒系列引物,并在扩增反应体系中加入荧光染料SYBR Green I,通过恒温荧光检测仪Deaou-308C扩增检测,分别建立了这3种病毒的荧光定量环介导等温RNA扩增(RT-LAMP)方法。经反应条件的优化,检测结果显示,这3种方法分别对SVCV、VHSV和IHNV 3种弹状病毒具有特异性的扩增反应,对传染性胰坏死病毒、狗鱼弹状病毒和牙鲆弹状病毒核酸的扩增结果均为阴性,具有良好的特异性。灵敏度试验最低检测限分别为4.0×104拷贝/μL、5.4×104拷贝/μL、4.3×104拷贝/μL。该方法在63℃下保温40 min可以完成检测,操作简单、灵敏度高、特异性强,通过恒温实时荧光检测仪可实时检测及自动判读检测结果,适合现场检测和口岸快速检测。; 陈珍容陈进会陈洵唐大运石磊颜其贵; 关键词：环介导等温扩增

传染性造血器官坏死病毒(IHNV)实时荧光环介导等温扩增快速检测方法的建立被引量：1: 2013年; 建立了一套基于环介导等温扩增技术(LAMP)的实时荧光检测方法,用于IHNV的检测。根据IHNV的保守基因glyG,设计合成3套LAMP引物,LAMP反应在63℃下进行,引入环引物后,第3套LAMP引物显示出良好的扩增效率。以ESE-Quant tube scanner为恒温反应及检测平台,对IHNV进行实时荧光检测,反应在40 min内可得出结果。本研究建立的IHNV实时荧光LAMP法检测限达到3.6 pg。特异性试验表明仅IHNV发生特异性扩增,而SVCV、VHSV、HRV、PFRV以及IPNV均不发生反应。所建立的恒温实时荧光检测法操作简单、反应迅速,同时具有较高的灵敏度和特异性。引入的ESE-Quant tube scanner平台设备要求低,同时使扩增过程数字化和自动化,适合IHNV的现场检测和大规模疫病的监控。; 陈进会唐大运黄伟邱杨刘建丽叶蕾石磊李红梅; 关键词：环介导等温扩增 ESE SCANNER

鱼类传染性造血器官坏死病检测方法研究进展被引量：2: 2013年; 传染性造血器官坏死病是一种对鱼苗和幼鱼致死率极高的传染性疾病,为口岸鱼类的一类检疫对象。研究表明该病已在全世界范围内蔓延,各国学者对该病的预防和控制一直都十分重视。对传染性造血器官坏死病病毒的深入了解和相关的预防措施,已经在某种程度上预防和制止了该病流行,但仍然未完全杜绝该病的发生。对该病的预防和控制离不开有效的检测手段,本文从临床诊断、病毒分离、血清学、分子生物学方面进行阐述,以期为该病的快速诊断方法研究提供参考。; 杨映陈进会于辉李华颜其贵

鲤春病毒血症病毒恒温实时荧光快速检测方法的建立被引量：2: 2013年; 根据鲤春病毒血症病毒(SVCV)的保守序列glyG基因,设计了3套LAMP引物,以ESE-Quant tube scanner为检测平台,通过简单易行的LAMP扩增检测SVCV,LAMP扩增温度为63℃。结果显示,在引入环引物后,恒温操作下30min内可得出结果,第1套LAMP引物显示出优良的扩增效率和扩增特异性;并且建立的LAMP法有极佳的灵敏度,其检测限可达到每反应2.4pg。与传统LAMP和荧光定量仪两种方式作为LAMP检测平台相比,ESE-Quant tube scanner平台具有简单、便携,试验过程数据化和自动化的特点,适合SVCV的现场检测和大规模监控。; 陈进会余霞余华黄伟邱杨刘建丽李红梅石磊叶蕾; 关键词：鲤春病毒血症病毒环介导等温扩增 TUBE SCANNER

三种鱼类弹状病毒实时荧光RT-LAMP检测试剂盒的建立与初步应用: 构建检测三种鱼类弹状病毒实时荧光环介导等温RNA扩增(LAMP)试剂盒,用于现代口岸快速检测。对LAMP试剂进行组合优化,采用荧光染料显色方法判定LAMP结果,避免污染,减少假阳性结果产生;将以上优化技术及试剂整合成时荧...; 陈进会陈珍容陈洵唐大运颜其贵; 关键词：环介导等温扩增检测试剂盒; 文献传递

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东莞市科技计划项目(2011108102047)