国家科技重大专项(2013ZX09507005)
- 作品数：21 被引量：165H指数：9
- 相关作者：孟宪生包永睿王帅罗国安梁琼麟更多>>
- 相关机构：辽宁中医药大学清华大学华东理工大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金辽宁省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学电子电信生物学更多>>
- 扶正化瘀方抗大鼠肝纤维化疗效的代谢组学研究被引量：10
- 2016年
- 目的利用代谢组学方法,评价扶正化瘀方(丹参、桃仁、松花粉等)对大鼠肝纤维化的治疗效果,并探索其可能的机制。方法将SD大鼠随机分成正常对照组(n=6)、二甲基亚硝胺(DMN)诱导肝纤维化模型组(n=6)及扶正化瘀方给药组(n=6),采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UHPLC-TOF-MS)技术对大鼠血清进行分析,所得数据采用偏最小二乘判别分析法(PLS-DA)进行模式识别处理。结果正常组和模型组大鼠的血清代谢轮廓存在显著差异,而给药组在空间投影上呈现出"偏离模型组且接近正常组"的趋势。根据变量重要性投影值(VIP),筛选出19种相关代谢标志物。结论验证了扶正化瘀方对大鼠肝纤维化的治疗效果,其潜在机制可能与修复体内异常的脂质和氨基酸代谢有关。
- 仰贤莉李光伟康璐章弘扬徐列明胡坪
- 关键词：肝纤维化扶正化瘀方代谢组学
- 基于微流控芯片技术橙皮苷抗肺肿瘤作用机制研究被引量：8
- 2017年
- 目的探究橙皮苷诱导人肺癌细胞A549凋亡的作用机制。方法基于微流控芯片技术采用Hoechst 33342/PI染色法检测橙皮苷对肺癌细胞A549凋亡坏死的影响;流式细胞术检测橙皮苷对肺癌细胞周期及凋亡的影响;实时荧光定量PCR技术检测相关基因VEGF、PI3K及PTEN的表达;Western blot技术检测橙皮苷诱导肺癌细胞中PI3K-Akt信号通路相关蛋白PI3K、Akt、PTEN及凋亡蛋白Bcl-2、周期蛋白Cyclin B1的表达。结果橙皮苷作用于细胞G_0/G_1期及S期,阻滞细胞分裂,并呈现浓度依赖性诱导肺癌细胞凋亡,其细胞凋亡坏死率由正常对照组的(6.7±0.6)%增至(27.9±1.1)%;经橙皮苷诱导后的肺癌细胞中VEGF和PI3K基因表达相对降低,抑癌基因PTEN表达相对增加。Western blot结果显示,经橙皮苷诱导的肺癌细胞中凋亡蛋白Bcl-2及周期蛋白Cyclin B1相对表达降低,PI3K-Akt信号通路蛋白Akt表达量与对照组比较明显减少,PI3K蛋白表达量相对增加,PTEN表达量无明显变化。结论橙皮苷可能是通过干扰PI3K-Akt信号通路,阻碍肿瘤细胞的分裂并促进凋亡蛋白的产生,从而诱导肺癌细胞A549凋亡。
- 樊佳新王帅孟宪生包永睿李天娇
- 关键词：橙皮苷肺癌细胞A549实时荧光定量PCRPI3K-AKT信号通路CYCLINB1
- 多波长覆盖融合指纹图谱评价不同产地川芎药材差异性被引量：11
- 2016年
- 目的:建立10批不同产地川芎药材多波长覆盖融合指纹图谱,并对共有峰进行初步指认,通过指纹图谱比较不同产地川芎药材的差异性,为其质量控制和药材鉴别提供依据。方法:采用超高液相色谱法建立不同产地川芎药材的指纹图谱;采用全时段多波长融合技术对dif数据进行多波长融合;采用Spss 19.0数据统计软件,对不同产地川芎药材的共有峰进行聚类分析,区别其差异;采用Q-TOF-MS法对指纹图谱中的共有峰进行指认。结果:建立了川芎药材的多波长融合指纹图谱,确定了20个共有峰并对其中的8个峰进行了指认,通过聚类分析和相似度评价可知云南川芎与其他产地的川芎相比存在着一定的差异性。结论:该指纹图谱重复性良好,能够区分不同产地川芎药材,可作为川芎药材质量评价的一种手段。
- 孙立磊王帅包永睿孟宪生
- 关键词：川芎
- ICP-MS测定茯苓与猪苓中无机元素的含量被引量：10
- 2016年
- 目的:测定5个不同产地的茯苓与猪苓中无机元素的含量,探讨无机元素含量的地域差异性及药材中无机元素间的相关性,并探讨利尿作用与元素含量的相关性。方法:采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对茯苓与猪苓中的无机元素进行全定量分析。应用MPP(12.6)软件对数据进行主成分分析(PCA)及聚类分析,SPSS 17.0软件对元素含量的相关性进行分析。结果:含量测定结果表明茯苓与猪苓中各无机元素的含量随原子序数增大呈现相似的规律性分布;主产地的茯苓与猪苓中无机元素含量高于其他产地。主成分分析和聚类分析表明,2种药材间无机元素的含量差异大,云南、广西与贵州茯苓间无机元素的含量相近,湖南与安徽茯苓间无机元素含量相近;山西、陕西与安徽猪苓中无机元素的含量相近,辽宁与吉林猪苓中无机元素的含量相近。相关性结果表明茯苓和猪苓中有55对元素具有相关性(P<0.05),有121对元素具有显著相关性(P<0.01);常量元素Mg与Na,K显著相关,绝大部分的微量元素之间具有显著相关性;常量元素与微量元素之间也具有显著的相关性。结论:该方法适合茯苓、猪苓药材中多种元素含量的同时测定;药材的种属亲缘关系及药材的资源品质与地域性密切相关;药材对无机元素的吸收具有选择性,其吸收比例可能与药材的药理活性及强弱有关。
- 老骄阳田腾跃王帅包永睿孟宪生
- 关键词：茯苓猪苓无机元素微波消解-电感耦合等离子体质谱法
- 器官芯片及其应用被引量：10
- 2016年
- 微流控芯片是细胞体外培养的重要平台,基于该平台所发展的器官芯片技术更因其能够模拟人体器官的复杂结构及功能而受到重视。本文从不同器官的角度介绍了近年来器官芯片技术在构建人体生理学模型、药物研发及毒理学研究中的应用,并对器官芯片技术的发展前景进行了展望。
- 孙威陈雨晴罗国安张敏章弘扬王月荣胡坪
- 关键词：微流控芯片细胞人体器官
- UPLC测定不同产地菟丝子药材中6种黄酮类成分的含量被引量：15
- 2016年
- 目的:采用UPLC建立同时测定菟丝子药材中金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素6种黄酮类成分含量的方法。方法:以内蒙古产菟丝子为代表建立菟丝子药材中6种黄酮类成分的定量方法,用此方法测定12批不同产地菟丝子药材中6种黄酮类成分的含量。色谱条件为Agilent Eclipse Plus C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.21 m L·min^(-1),柱温30℃,检测波长360 nm。结果:金丝桃苷、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素分别在0.046 8~0.748 8μg(r=0.999 9),0.024 2~0.387 2μg(r=0.999 9),0.088 2~1.411 2μg(r=0.999 9),0.002 3~0.037 0μg(r=0.999 7),0.028 8~0.460 8μg(r=0.999 6)和0.002 3~0.037 0μg(r=0.999 4)线性关系良好,检出限分别为0.292 5,0.302 5,0.367 5,0.289 0,0.360 0,0.286 0 mg·L^(-1),定量限分别为0.877 5,1.210 0,1.470 0,1.012 0,1.260 0,1.215 5 mg·L^(-1)。平均回收率分别为99.95%,99.78%,99.53%,99.38%,100.03%,99.35%,RSD分别为1.0%,1.2%,1.0%,1.4%,1.1%,0.5%。12批来自不同产地的菟丝子6种黄酮类成分含量差异较大。结论:该方法专属性强、重复性好、快速、稳定、可控,为科学评价及有效控制菟丝子药材的质量提供依据。
- 王达王帅包永睿孟宪生
- 关键词：菟丝子黄酮类成分
- 基于微流控芯片的细胞迁移模型及其在黄芩苷药效学研究上的应用被引量：6
- 2014年
- 基于微流控芯片技术建立一种体外细胞迁移模型,并将其用于黄芩苷药效的研究。设计与制作一种集成有微阀的微流控芯片;LIVE/DEAD染色试剂盒检测芯片中细胞活力;通过荧光素钠对芯片进行药物浓度梯度表征;DiI、DiO对细胞示踪染色观察微阀对细胞的隔离作用;每12小时显微镜拍照观察细胞的迁移状态并计算细胞迁移速率;ELISA法测定芯片细胞上清液中MMP-2、MMP-9和E-cadherin蛋白含量变化。实验结果表明,芯片中细胞活力接近100%;芯片可产生稳定的浓度梯度,且微阀对细胞有良好的隔离作用;黄芩苷对肝癌细胞HepG2的迁移具有显著抑制作用,并可显著降低MMP-2和MMP-9蛋白的分泌量。该研究为微流控芯片技术在中医药领域中的应用提供了一种新思路和新方法。
- 马立东王乙同孟宪生包永睿王帅
- 关键词：细胞迁移黄芩苷人肝癌细胞HEPG2MMP-2
- 基于纳米金催化的血清尿酸纸芯片的构建及应用被引量：5
- 2016年
- 建立了一种以纸芯片为平台,利用纳米金（Au NPs）的过氧化物模拟酶特性对血清中尿酸（UA）含量进行快速检测的方法.在改装的中性笔中灌注疏水性材料溶液,直接在滤纸上绘制所需要的图案,经干燥后形成纸芯片.将纳米金、四甲基联苯胺（TMB）和H_2O_2的混合液依次滴加于纸芯片检测区域,无色的TMB被氧化成蓝色,然后将待测样品滴加于蓝色区域,氧化态TMB被还原为无色,根据手机相机记录的检测区域灰度值计算试样中尿酸的浓度.实验优化了纳米金在纸芯片上的用量、反应时间和反应温度等参数,在最优实验条件下,检测尿酸的线性范围为10.6～125 mg/L,检出限为4.64 mg/L,加样回收率为94.8%～108.5%.该方法选择性良好,可用于测定血清样品中尿酸的含量.
- 赵甜甜陈雨晴张敏王月荣章弘扬胡坪
- 关键词：纳米金尿酸
- 四种急性肾损伤生物标志物的研究进展被引量：4
- 2016年
- 急性肾损伤（acute kidney injury,AKI）是指突发（〈7 d）和持续（〉24 h）的肾功能突然下降的一组临床综合征,定义为48 h内血清肌酐（Scr）至少上升0.3 mg/dl,或7 d内上升50%,和（或）尿排量〈0.5 ml·kg-1·h-1达6 h。见表1。
- 王志鹏陈冬平夏天一王清华高守红陈万生张凤
- 关键词：急性肾损伤生物标志物临床综合征肾脏移植慢性肾脏疾病毒性损伤
- 药物筛选微流控芯片的构建及其在花蕊石抗肝癌研究中的应用被引量：11
- 2015年
- 目的构建一种集成有微阀结构的双层PDMS-玻璃复合芯片,考察其适用性并研究花蕊石生品、制品水煎液对肝肿瘤细胞Hep G2凋亡坏死的影响。方法制作双层微流控芯片并考察微阀的性能,同时进行了Hep G2细胞的培养,死活试剂盒检测细胞活力。将预制备的不同浓度花蕊石生品、制品水煎液通入微流控芯片,分别作用于Hep G2细胞24、48和72 h,凋亡坏死试剂盒检测Hep G2细胞凋亡坏死率。结果芯片微阀性能良好,可灵活控制液阀的开关且未表现出明显的延迟现象。细胞在芯片中生长状态良好,培养72 h期间细胞存活率≥97%。药物作用细胞后,发生凋亡坏死的细胞数量随给药浓度的升高、给药时间的延长而增加,呈现出一定的时间与浓度依赖性,且制品水煎液的效果好于生品。结论实验证明了花蕊石生品、制品水煎液对肝肿瘤细胞Hep G2具有促凋亡作用,也进一步验证了本实验室设计的芯片在细胞研究和药物筛选方面的可行性,为微流控芯片在中药抗肿瘤新药开发领域中的推广与应用提供理论依据。
- 庞磊包永睿孟宪生王帅
- 关键词：微流控芯片细胞活力花蕊石抗肝癌作用药物筛选
