国际科技合作与交流专项项目(2006DFB32210)
- 作品数：12 被引量：85H指数：5
- 相关作者：何昆仑范利刘春蕾李蕊君李鑫更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院军事医学科学院南开大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 骨骼肌成肌细胞移植对慢性心衰犬血液动力学的影响被引量：2
- 2010年
- 目的观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬血液动力学的影响。方法19只慢性心衰犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):注射等量生理盐水。术前及术后5周行血液动力学检查,病理组织标本行Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色。结果(1)术后5周,实验组dP/dtmax、MAP、LVSP明显升高(P<0.05),LVEDP明显下降(P<0.05),而对照组上述指标无显著性差异(P>0.05);(2)实验组心肌注射部位可见存活细胞,经Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色证实来自于移植的骨骼肌成肌细胞。结论自体骨骼肌成肌细胞对慢性心力衰竭犬的血液动力学有明显改善作用。
- 李冬云范利何昆仑刘宏斌范明刘淑红
- 关键词：骨骼肌成肌细胞动物模型充血性心力衰竭细胞移植血液动力学
- 基于内质网应激途径的细胞保护策略的研究进展被引量：35
- 2011年
- 内质网(endoplasmic reticulum,ER)是细胞内最大的细胞器,是蛋白质修饰、折叠和钙贮存的场所。ER内未折叠或错折叠蛋白积聚和钙平衡失调可导致ER应激。ER应激及其诱导的凋亡与许多疾病的发生发展密切相关。研究显示,模拟未折叠蛋白反应使蛋白质合成暂停或干预促凋亡的生物大分子能够对抗凋亡,实现ER应激诱发损伤的保护以及相关疾病的干预。
- 刘春蕾何昆仑王莉莉
- 关键词：内质网应激未折叠蛋白反应细胞凋亡细胞保护CHOP
- Salubrinal保护心肌细胞内质网应激凋亡的实验研究被引量：4
- 2010年
- 目的探讨Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡的保护作用及机制。方法采用消化贴壁法获得乳鼠原代心肌细胞,分别给与不同浓度的Salubrinal(10μmol、20μmol、40μmol)预处理,30min后加入TM(5μg/ml),继续培养24h后通过流式细胞和TUNEL检测方法对乳鼠心肌细胞凋亡进行检测;Western印迹法检测凋亡过程中Caspase-12蛋白酶的表达变化。结果经Salubrinal预处理的细胞同单独使用衣霉素相比,细胞凋亡率和细胞凋亡指数均显著下降;Caspase-12表达明显减少。结论Salubrinal对衣霉素诱导的乳鼠原代心肌细胞凋亡具有保护作用,其机制可能是通过抑制内质网应激凋亡通路。
- 胡国梁何昆仑范利李鑫李蕊君
- 关键词：内质网
- PERK通路参与了缺氧心肌细胞的内质网应激及凋亡被引量：11
- 2012年
- 目的:观察缺氧对原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞的损伤,探讨内质网应激在缺氧心肌损伤发生发展过程中起的作用及PERK通路是否参与其信号转导过程。方法:将原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为正常对照组和缺氧1 h、4 h、8 h、12 h、24 h组,通过测定细胞ATP含量反映细胞活力;高内涵分析细胞成像系统检测多参数凋亡;采用免疫细胞化学和蛋白印迹方法检测以内质网为靶点的分子伴侣(GRP78和钙网蛋白)的表达,PERK通路(PERK和eIF2α)的磷酸化水平,以及其下游分子(ATF4和CHOP)在缺氧不同时点蛋白的表达变化特征。采用PERK通路激活型药物salubrinal处理原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞,观察药物是否对缺氧损伤的心肌细胞有保护作用。结果:缺氧引起心肌细胞凋亡,缺氧早期(约1 h)钙网蛋白和GPR78的表达上调;缺氧中期(4 h)p-PERK、p-eIF2α和ATF4的表达上调;缺氧后期(12 h)CHOP的表达上调。Salubrinal对缺氧心肌有保护作用。结论:在培养的心肌细胞中,缺氧可激发内质网应激。在缺氧早期激活PERK通路保护机体对抗缺氧损伤,后期激活细胞凋亡通路。
- 刘春蕾李鑫李蕊君何云云何昆仑王莉莉
- 关键词：心肌细胞内质网应激缺氧未折叠蛋白反应
- 经皮冠脉内微栓塞对比格犬心功能的影响被引量：1
- 2009年
- 目的通过观察经皮冠脉内微栓塞对比格犬心功能的影响,探索建立慢性心力衰竭(轻-中度)犬模型的技术。方法实验动物为32条比格犬,对犬冠状动脉中远端反复微栓塞,每周1次神经内分泌因子测定、血液动力学和超声心动图检查,直到左心室整体射血分数(EF)、左室内压力上升最大速率分别减少20%～25%,左室舒张末压>14mmHg(1mmHg=0.133kPa),且上述指标稳定2周以上。结果19条比格犬达到上述标准;Masson三色染色结果提示动物左室梗死区域可见灶性心肌细胞坏死和间质纤维化。结论经皮冠状动脉反复微栓塞可成功建立轻-中度慢性心力衰竭犬模型。
- 李冬云范利何昆仑刘宏斌张波王亮张今尧
- 关键词：神经内分泌血液动力学左室功能
- 内质网应激与心血管疾病研究概述被引量：1
- 2011年
- 内质网应激是继死亡受体信号途径和线粒体途径之后新近发现的一条细胞凋亡通路,适度的应激可通过未折叠蛋白反应(UPR)产生细胞保护作用,但当应激过强或长时间不缓解时则会触发CHOP、ASK1/JNK及Caspases等通路诱导细胞凋亡。近年来研究发现内质网应激参与多种心血管疾病的发生发展,通过对相关通路的干预可以产生心肌细胞的保护作用,这有望成为防治心脏疾病的新靶点。
- 何云云何昆仑刘春蕾
- 关键词：内质网应激凋亡心血管疾病细胞保护
- 骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬左心室功能的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察自体骨骼肌成肌细胞移植对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及左心室功能的影响。方法:19只慢性心力衰竭犬模型建立后随机分为实验组(n=9):采用开胸直接心肌内注射自体骨骼肌成肌细胞;对照组(n=10):开胸心肌内注射等量生理盐水。移植前及移植后5周行超声心动图检查,病理组织标本行Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色。结果:①移植后较移植前,实验组收缩末期心室腔面积(ESA)、舒张末期心室腔面积(EDA)均明显下降(P<0.05),射血分数显著升高(P<0.05),差异有统计学意义;而对照组ESA和EDA在移植前、移植后差异无统计学意义(P>0.05);②实验组心肌注射部位可见存活细胞,经Desmin和Brd-U免疫荧光双重染色证实来自于移植的骨骼肌成肌细胞。结论:自体骨骼肌成肌细胞对慢性心力衰竭犬的左心室重塑及功能有明显改善作用。
- 李冬云范利何昆仑刘宏斌张波王亮张今尧刘涛
- 关键词：骨骼肌成肌细胞充血性心力衰竭细胞移植左心室功能
- 衣霉素诱导乳鼠原代心肌细胞凋亡的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨衣霉素在诱导大鼠心肌细胞凋亡中的作用和可能的凋亡通路。方法采用消化贴壁法分离乳鼠原代心肌细胞,应用衣霉素对乳鼠原代心肌细胞进行凋亡诱导,通过MTT、DNA梯带、Hoechst染色等方法对心肌细胞凋亡进行定性和定量检测,选出合适的诱导浓度和诱导时间。用Western印迹法检测凋亡过程中Grp78、caspase-12蛋白酶的表达变化。结果衣霉素5μg/mL诱导24h后可引起30%心肌细胞凋亡,并出现典型的凋亡形态改变;在TM(5μg/mL)诱导3h和24h时分别有Grp78和caspase-12蛋白表达。TM诱导48h表现出DNA弥散样变化。结论衣霉素可通过内质网应激通路诱导心肌细胞凋亡,5μg/mL诱导24h可作为衣霉素建立乳鼠原代心肌细胞内质网应激凋亡模型的合适条件。
- 胡国梁何昆仑范利李鑫李蕊君
- 关键词：衣霉素
- 内质网应激诱导的细胞凋亡与心肌缺血再灌注损伤被引量：2
- 2010年
- 缺血再灌注损伤是心血管疾病中常见的病理生理过程,在心血管疾病的发生、发展中起着重要的作用。缺血再灌注损伤确切的机制还不完全清楚,实验证实细胞凋亡在心肌缺血再灌注损伤的病理生理过程中发挥着重要的作用.
- 胡国梁何昆仑范利
- 关键词：内质网应激细胞凋亡缺血再灌注损伤
- Grp78和caspase-12在缺氧心肌细胞中的表达被引量：6
- 2011年
- 目的利用体外培养的心肌细胞缺氧模型,观察不同缺氧时间点Grp78和caspase-12在心肌细胞中的表达变化。方法将原代培养的大鼠心肌细胞,随机分为正常对照组,缺氧0.25h、0.5h、1h、1.5h、2h、4h、8h、12h、16h、24h组,通过TUNEL法检测缺氧心肌细胞凋亡,应用Westernblot法检测不同缺氧时间点Grp78和caspase-12在心肌细胞中的表达。结果与对照组相比,缺氧组细胞凋亡指数随缺氧时间延长逐渐升高;Grp78蛋白于缺氧0.25h开始表达,缺氧1h达到峰值;procaspase-12于缺氧0.5h表达开始增高,2h达到峰值;caspase-12于缺氧1h表达上升,4h达到峰值。结论缺氧激活了内质网应激反应,可引起心肌细胞凋亡。
- 李蕊君何昆仑李鑫胡国梁刘春蕾王莉莉
- 关键词：缺氧内质网GRP78
