哈尔滨市青年科学研究基金(2004AFQXJ006)
- 作品数：5 被引量：44H指数：4
- 相关作者：王立春刘泽汉何旭公伟勋荆鹏伟更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院四川大学华西医院哈尔滨医科大学更多>>
- 发文基金：哈尔滨市青年科学研究基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 动物脂肪干细胞联合双重转化生长因子释放支架修复关节软骨损伤的实验研究被引量：9
- 2012年
- 目的本实验拟应用壳聚糖/Ⅱ型胶原支架联合脂肪干细胞和两种转化生长因子治疗关节软骨损伤,观察及评价脂肪干细胞和转化生长因子对于软骨损伤修复过程的影响情况和意义。方法拟选用雄性新西兰大白兔12只,建立双侧后腿膝关节软骨缺损动物模型后随机分成3组,对软骨缺损处进行干预:A组,单纯放置壳聚糖/Ⅱ型胶原支架;B组,壳聚糖/Ⅱ型胶原支架搭载脂肪干细胞;C组,TGF-β2和BMP-7复合壳聚糖/Ⅱ型胶原支架搭载脂肪干细胞。手术4、8、12周后取材对比,行HE染色、苯胺蓝染色,并对各组关节软骨进行形态学及组织学观察和评分。结果手术8、12周后,形态学和组织学评分C组明显高于A、B组,HE染色、苯胺蓝染色可见关节软骨损伤修复水平C组明显优于A、B组。结论动物脂肪干细胞联合双重转化生长因子释放支架修复关节软骨具有积极的治疗意义。
- 刘泽汉王立春张宏颖公伟勋荆鹏伟陈琳何旭
- 关键词：关节软骨脂肪干细胞
- 基质金属蛋白酶与椎间盘的退变被引量：10
- 2012年
- 背景:椎间盘细胞外基质的破坏是椎间盘退变的主要标志,已经证实这与主要基质金属蛋白酶的表达和活性上调有关。然而到目前为止对于基质金属蛋白酶家族的调节几乎没有系统的资料。目的:全面了解基质金属蛋白酶在椎间盘退变中的表达及作用。方法:由第一作者用计算机检索中国生物医学全文数据库(SinoMed:2000/2011)和Medline数据库(2000/2011),检索词分别为"基质金属蛋白酶,基质金属蛋白酶组织抑制因子,椎间盘,退行性变,脊柱"和"matrix metalloproteinases,tissue inhibitor of matrix metalloproteinases,disc,degeneration,intervertebral"。共检索到207篇文章,按纳入和排除标准对文献进行筛选,共纳入31篇文章。回顾收录的基质金属蛋白酶相关综述和论文报告,并分析生物学作用及调节的研究进展。结果与结论:基质金属蛋白酶在椎间盘退变中起着重要作用,已有证据表明基质金属蛋白酶能加速椎间盘细胞外基质的退变进程,并已取得了大量免疫组化证据的支持。
- 荆鹏伟刘泽汉何旭公伟勋王立春
- 关键词：基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶组织抑制因子椎间盘退变脊柱
- 骨形成蛋白2基因修饰的骨髓基质细胞与纤维蛋白复合物修复兔关节软骨缺损被引量：10
- 2005年
- 目的研究骨形成蛋白2(bone mophogenetic protein 2, BMP-2)重组腺病毒(adenovirus)转染骨髓基质细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)后,与纤维蛋白凝胶构成的复合物(Ad-BMP-2+MSCs-纤维蛋白凝胶)对兔关节软骨缺损修复的影响. 方法①Ad-BMP-2转染原代培养的MSCs,通过RT-PCR、细胞免疫组织化学染色、甲苯胺蓝染色等观察转染后3～9 d的MSCs其BMP-2、Ⅱ型胶原及蛋白多糖转录、表达水平的变化.②转染后的MSCs种植于纤维蛋白凝胶,在体外培养1～9 d,通过上述指标及透射电镜观察三维培养条件下其软骨基质的产生.③42只日本大耳白兔先制成直径4.5 mm全层软骨缺损模型,随机分为3组(n=14):A组为Ad-BMP-2+MSCs-纤维蛋白凝胶修复组,B组为MSCs-纤维蛋白凝胶修复组,C组为空白对照组.术后4、8和12周取材行大体观察、HE染色、甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学及12周关节软骨弹性常数检测. 结果①Ad-BMP-2转基因MSCs的BMP-2、Ⅱ型胶原 mRNA RT-PCR检测分别在3、5 d呈阳性,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).②转基因MSCs三维培养物免疫组织化学和甲苯胺蓝染色呈阳性,电镜显示细胞生长良好,有基质合成.③A组各时间点大体、组织形态学和组织化学染色均显著优于B组和C组,12周时力学和组织学已接近正常关节软骨. 结论 Ad-BMP-2能通过促进MSCs分泌BMP-2,诱导Ⅱ型胶原和蛋白多糖的表达,在纤维蛋白三维支架中形成软骨基质,移植入兔关节软骨缺损区可修复直径4.5 mm缺损,其修复组织成分接近正常软骨.
- 王立春刘明辉张宏颖石义钢韩剑锋韩竹刘建宇林欣
- 关键词：关节软骨缺损骨形成蛋白2转基因骨髓基质细胞
- 纤维蛋白凝胶基质材料用于组织工程修复兔关节软骨缺损与Ⅰ型胶原凝胶和混合凝胶性能特征的比较被引量：14
- 2005年
- 目的:观察纤维蛋白凝胶、Ⅰ型胶原凝胶、混合凝胶3种不同生物型细胞外基质用于组织工程修复兔关节软骨缺损形态学及性能特征比较。方法:实验于2002-01/2003-12在哈尔滨医科大学附属二院实验中心进行。6月龄日本大耳白兔48只。①人工软骨制备:传代培养兔骨髓基质干细胞,与纤维蛋白原凝胶、Ⅰ型胶原凝胶、纤维蛋白-Ⅰ型胶原混合凝胶混合制成3种人工软骨。②模型制备与动物分组:兔麻醉后取膝关节外侧切口,显露髌股关节面,作直径4.5mm,深3mm转孔获得关节软骨缺损模型。48只兔分为4组,每组12只。纤维蛋白凝胶组,缺损区充填骨髓基质细胞纤维蛋白凝胶;Ⅰ型胶原凝胶组,充填骨髓基质细胞Ⅰ型胶原凝胶;混合凝胶组,充填骨髓基质细胞纤维蛋白-Ⅰ型胶原混合凝胶;空白对照组,不充填材料。术后各组动物膝关节不予外固定,自由活动。③标本观察:分别于4,8,12周每组取3只(6侧膝关节)麻醉后处死,行膝关节大体观察,选择损伤区股骨干切片作苯胺蓝、苏木精-伊红染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色采用光学显微镜观察,并按改良的Seller评分(0分为正常关节,分数越高表示关节退行性变越严重)进行量化评分。结果:①各组兔膝关节4周及12周时大体形态学观察:4周时:纤维蛋白凝胶组、混合凝胶组为淡粉色半透明的软骨样结构,Ⅰ型胶原凝胶组、空白对照组多数缺损区仍呈暗红色,表面不规则。12周时:纤维蛋白凝胶组、混合凝胶组修复组织与周围软骨平滑过渡高度一致、光泽度较正常软骨略差;Ⅰ型胶原凝胶组、空白对照组修复区多数不平整,中央凹陷且存在龟裂。②各组兔股骨组织切片观察结果:纤维蛋白原凝胶、混合凝胶组各时间点组织化学染色均显著优于Ⅰ型胶原凝胶组和空白对照组;纤维蛋白原凝胶、混合凝胶组无显著差异。③组织切片的Seller评分结果:�
- 王立春张旗涛张宏颖
- 关键词：组织工程修复关节软骨缺损
- 关节内注射BMP-7影响骨关节炎进展的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的拟应用骨形态发生蛋白-7(BMP-7)进行关节内注射干预骨关节炎的动物模型,观察和判断BMP-7关节内注射对于家兔骨关节炎进展的影响,为临床对于骨关节炎的防治提供新的方法和思路。方法拟选用雄性新西兰大白兔15只,体重2.8～3.2kg,平均3kg,双侧后腿膝关节采用ALCT方法联合内侧半月板前1/3切除建立骨关节炎模型后,取右膝关节作为实验组进行每周关节内定量注射BMP-7,左膝关节作为空白对照组不予处置,分别于4、8、12周各取5只实验兔双侧后腿膝关节进行观察对比,对骨关节炎关节软骨组织形态学观察和评分,通过对于病变明显部位进行病理切片、甲苯胺蓝染色观察关节软骨的退变情况,所得结果采用国际骨关节炎研究协会(OARSI)骨关节炎软骨组织病理分级制度进行评分及对比,通过免疫组化检测Ⅱ型胶原的表达情况。结果进行BMP-7关节内注射4、8、12周后实验组组织形态学评分以及病理切片苯胺蓝染色国际骨关节炎研究协会(OARSI)骨关节炎软骨组织病理分级制度评分均优于对照组,Ⅱ型胶原持续表达情况实验组明显高于对照组。结论关节内注射BMp-7可以减缓骨关节炎的病情进展。
- 刘泽汉王立春张宏颖荆鹏伟公伟勋陈琳何旭
- 关键词：骨形态发生蛋白-7关节内注射骨关节炎
