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食品行业中常用消毒剂对食源性单核细胞增生李斯特菌的抑菌作用研究被引量：5: 2013年; 目的研究食品行业中常用消毒剂对重要食源性致病菌单核细胞增生李斯特菌的抑菌效果,明确食源性单核细胞增生李斯特菌对各种消毒剂的耐受情况,为消毒剂的科学使用提供依据。方法选取5大类食品行业常用消毒剂,采用抑菌环试验检测其对73株食源性单核细胞增生李斯特菌的抑菌效果。结果过氧乙酸、碘伏及洗必泰在常规使用浓度下对食源性单核细胞增生李斯特菌不具备有效抑菌作用,84消毒液及新洁尔灭在常规使用浓度下具备抑菌作用,过氧乙酸浓度达0.9%及以上,洗必泰浓度达0.5%及以上时,具有完全抑菌作用。结论对于食源性单核细胞增生李斯特菌,84消毒液、新洁尔灭、0.9%以上浓度的过氧乙酸及0.5%以上浓度的洗必泰具有完全抑菌效果,适用于对其进行消毒防控。; 徐冬旸石磊曾晓敏何建华闫鹤; 关键词：单核细胞增生李斯特菌抑菌作用

猪肉中单核细胞增生李斯特菌的分离与耐药性研究被引量：12: 2013年; 了解猪肉中单核细胞增生李斯特菌的污染情况、血清型和耐药性现状。按照国标GB 4789.30-2010程序分离猪肉中单核细胞增生李斯特菌;多重PCR确定血清型;纸片扩散法检测单核细胞增生李斯特菌对抗生素的敏感性。研究结果表明273份猪肉样本中有52(19.02%)个受单核细胞增生李斯特菌的污染,共检出78株该致病菌。33株(42.31%)、24株(30.71%)、16株(20.51%)、3株(3.85%)、2株(2.56%)分别被确定为血清型1/2a(或3a)、1/2b(或3b或7)、1/2c(或3c)、4a(或4c)和4b(或4d或4e)。所有菌株对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培能、环丙沙星、左氧氟沙星、万古霉素都敏感,对四环素(20.51%)的耐药率最为严重。11.54%的菌株对临床治疗李斯特菌病的青霉素、庆大霉素、红霉素等抗生素出现耐药。tet(M)基因是单核细胞增生李斯特菌耐四环素的主要机制之一,接合型转座子Tn916与该菌四环素耐药散播有直接关系。; 石磊王文燕闫鹤; 关键词：单核细胞增生李斯特菌血清型耐药性

恒温实时荧光法检测金黄色葡萄球菌被引量：5: 2013年; 恒温实时荧光技术是目前最新颖的核酸扩增方法。本文创建了恒温实时荧光法快速检测微生物技术方法并应用于金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)的快速检测。本研究针对金葡菌特异序列nuc设计6条引物,选取常见病原菌标准株为对照品进行引物特异性检测;选取金葡菌标准菌株进行灵敏度检测;并且利用食品中分离的金葡菌,同时进行LAMP反应和荧光PCR实验,验证LAMP反应的检出率,结合ESEQuant tube scanner进行实时检测。结果显示:所建立的恒温荧光扩增法具有扩增效率高、特异性强、灵敏度高(灵敏度为102CFU/mL)等优点。对50食品中分离的金葡菌进行检测,恒温荧光法检测出50株,荧光PCR的方法检测出50株,两种方法的检出率都为100%。本文引入的ESE Quant tube scanner平台结合恒温实时荧光法检测金葡菌不仅操作简单,便于携带,同时实现检测过程的数据化及自动化,适合金葡菌的现场检测和大规模监控。; 刘羽霏叶蕾孟赫诚闫鹤石磊; 关键词：金黄色葡萄球菌环介导等温扩增

广州市售生猪肉中金黄色葡萄球菌检测及其耐药性研究被引量：15: 2014年; 了解广州市某区猪肉中金黄色葡萄球菌的污染情况、分子分型及其耐药性特征。根据GB 4789.10-2010对样品进行金黄色葡萄球的分离及鉴定,用多位点序列分型法进行分子分型,纸片扩散法进行抗生素敏感试验,采用PCR法验证MRSA并筛选检测I类整合子及相关耐药基因盒。110份生猪肉样品中有34份样品检出金黄色葡萄球菌(30.9%),得到34株该菌,所有菌株共可分成7种序列分型(sequence types,STs),分别为ST6(1/34)、ST7(16/34)、ST9(9/34)、ST59(1/34)、ST239(4/34)、ST2259(2/34)及一株等位基因谱为5-4-1-4-4-6-53的新型ST,34株金黄色葡萄球菌对12种抗生素耐药率分别为对青霉素100%耐药,对四环素、甲氧苄胺嘧啶、红霉素、克林霉素的耐药率分别为88.2%、76.5%、64.7%、61.8%,MRSA检出率为38.3%(13/34),I类整合子的检测率为14.7%(5/34),其中2株菌携带相应基因盒。本次实验显示生猪肉中金黄色葡萄球菌污染比较严重且具有严重的抗生素耐药现象,ST7为主要的序列型号,I类整合子存在于食源性金黄色葡萄球菌中,相关基因盒对菌株耐药发挥作用。; 石磊周臣清闫鹤; 关键词：金黄色葡萄球菌抗生素耐药 I类整合子

水产品中6类抗生素抗性基因和Ⅰ类整合子的定量检测被引量：5: 2017年; 论文选取广州市天河区两家菜市场、一家海鲜市场和三家超市的48份水产品为研究对象,提取了三种不同水产品:虾、鱼和贝类的总DNA,采用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)法,对市售水产品中6类抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs):tet A、tet B、tet M、sulⅡ、flo R、aph A-1、aad A、erm B、cml A和Ⅰ类整合子5’端整合酶基因int I1、3’端磺胺耐药基因sulⅠ、季铵盐化合物及溴化乙锭的耐药基因qac EΔ1进行定量。研究显示:6类ARGs及Ⅰ类整合子基因在水产品中均有检出,基因拷贝数大小从10~2~10~8跨越七个数量级,最小值为1.86×10~2 copies/g,最大值为8.98×10~8 copies/g。三种水产品虾、鱼、贝类中,虾类的ARGs含量最高,贝类最低;三类采样地点中,菜市场来源的水产品中ARGs含量最高,海鲜市场来源的次之,超市来源的最低。本研究为进一步探索ARGs和可移动耐药元件整合子介导的细菌耐药性传播而引起的食源性疾病机理奠定了基础。; 王慧平闫鹤赵俊仁石磊; 关键词：抗生素抗性基因丰度

食源性单增李斯特菌的ERIC-PCR和Sau-PCR分型研究被引量：4: 2015年; 对从广州市天河区超市和菜市场及厦门某食品加工厂分离得到的单增李斯特菌进行ERIC-PCR和Sau-PCR检测,进行溯源研究及遗传多样性分析。ERIC-PCR将22株单增李斯特菌共分为8个基因型,其中以h型为主,共有8株菌。Sau-PCR方法将这批菌分为7个基因型,主要型别为E型和G型,二者共占50%。两种分型方法的结果呈现出一定的差异与关联,使用两种不同分型方法进行综合分析,有助于更好地认识单核细胞增生李斯特菌(LM)菌株间的遗传关系和流行病学特点。; 赵一鸣石磊孟赫诚张志刚闫鹤; 关键词：单增李斯特菌 ERIC-PCR

一株食源性多重耐药单核细胞增生李斯特菌的耐药性研究被引量：2: 2015年; 本研究对食品样本中分离的一株多重耐药单核细胞增生李斯特菌进行耐药机制的探讨,以期对食源性单核细胞增生李斯特菌多重耐药现象的控制提供理论依据。本文通过聚合酶链式反应筛选耐药决定因子,质粒消除及自然转化实验对耐药决定因子进行定位及传播能力的探讨,最后通过传代实验验证该菌株多重耐药性传播的稳定性。结果表明,对检测到的多重耐药菌株LM78(耐受氯霉素、红霉素、链霉素、四环素、复方新诺明)进行相关耐药基因检测,检测到cat、erm B、tet S 3个耐药基因。质粒消除后MIC值下降到敏感范围,且该质粒可通过自然转化在不同菌属间传递,说明这些耐药基因存在于质粒上。该质粒在无抗生素选择压力下连续传代,仍具有较高稳定性。食源性致病菌多重耐药性有可能通过不同细菌种属间转移,进而由食物链向人类传播,对人类健康造成潜在的威胁。; 李丽丽石磊何建华闫鹤闫鹤; 关键词：单核细胞增生李斯特菌多重耐药性质粒

食源性单核细胞增生李斯特菌的重金属镉抗性及其与抗生素耐药性的关系研究被引量：3: 2013年; 研究了不同血清型食源性单核细胞增生李斯特菌对重金属镉的抗性及其与抗生素耐药性之间的关系。采用琼脂稀释法检测单核细胞增生李斯特菌对重金属镉的抗性,与菌株的抗生素耐药性进行比较分析。结果表明,73株实验菌株中,36株具有镉抗性,总体镉抗性率达49.3%(36/73)。分离到的5株多重耐药单核细胞增生李斯特菌均为镉抗性菌株,表明食品生产、加工及其储存环境中这种同时携带多重耐药性与重金属抗性的微生物从食品链及有关环境进入到人类,就会对人类健康构成构成潜在威胁。; 何建华徐冬旸刘星宇石磊闫鹤; 关键词：单核细胞增生李斯特菌血清型抗生素耐药性

食源性普罗威登斯菌的分离鉴定和耐药性研究被引量：8: 2014年; 本文研究了食源性普罗威登斯菌在肉类食品中的的分布,以及其耐药表型与I型整合子的携带状况。本文采集了市售猪肉、鸡肉和牛肉等肉类食品,对普罗威登斯菌进行分离与鉴定;采用纸片扩散法对已分离鉴定的普罗威登斯菌进行药敏实验;利用聚合酶链式反应技术筛选携带I型整合子的菌株。结果表明,85份样品中,有38份样品检出普罗威登斯菌,检出率达44.70%。38株普罗威登斯菌中,有44.74%的分离株是多重耐药菌株,最多耐6种抗生素。有两株普罗威登斯菌携带I型整合酶,一株拉氏普罗威登斯菌携带耐药基因盒。这是在国内肉类食品分离的普罗威登斯菌中首次发现I型整合子阳性菌株,表明食品中这种携带有多重耐药的菌株有可能通过食物链向人类传播,是对人类健康造成威胁的潜在危险因素。; 石磊梁思思岛绫香山崎伸二闫鹤; 关键词：耐药性整合子

ERIC-PCR和Sau-PCR对单增李斯特菌分型稳定性研究被引量：3: 2015年; 为了研究肠杆菌间重复序列-聚合酶链式反应(ERIC-PCR)和Sau-PCR两种现代分子分型方法对单增李斯特菌(LM)分型的稳定性,取分离自广州市菜市场、超市及厦门某食品加工厂不同食品来源的5株单增李斯特菌进行实验,分别将这5株单增李斯特菌株进行室温放置培养和传代培养,提取室温放置培养24 h、48 h、和72 h及传代培养至第5代、10代、15代和20代的基因组DNA,然后同时进行ERIC-PCR和Sau-PCR分型,观察随着放置时间延长及传代次数增加其指纹图谱的变化。结果显示,5株单增李斯特菌在室温放置培养及传代培养后除部分条带发生缺失外均未出现条带增加现象,整体条带变化不大,两种分型方法的同源性分别在92%和94%以上,表明ERIC-PCR和Sau-PCR两种分型方法在室温放置培养72 h和传代培养20代内对单增李斯特菌分型相对比较稳定,具有流行病学意义。; 石磊赵一鸣张志刚闫鹤; 关键词：单增李斯特菌稳定性

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国家自然科学基金(31201363)

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