“重大新药创制”科技重大专项(2011ZX09401-030)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：冉宇靓孙力超孙立新杨治华遇珑更多>>
- 相关机构：北京协和医学院广西医科大学附属肿瘤医院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ^99mTc标记的抗CEA小分子嵌合抗体的体内分布与肿瘤显像
- 2013年
- [目的]采用99mTc标记抗人CEA小分子嵌合抗体Rch24 F(ab’)2,研究其在荷人结肠癌裸鼠体内的生物学分布及放射免疫显像的特征与应用价值。[方法]采用SnCl2直接还原法标记抗体,快速薄层层析法(ITLC)测定抗体的标记效率、放化纯度和体外稳定性,ELISA检测标记抗体的免疫比活性。荷人结肠癌裸鼠尾静脉注射99mTc-Rch24 F(ab’)2后,研究标记抗体在裸鼠体内的生物学分布,并进行肿瘤显像。[结果]99mTc-Rch24 F(ab’)2的标记率为90%,放化纯度>95%。99mTc-Rch24 F(ab’)2的放射比活为840MBq/mg,免疫比活性为65.7%。标记抗体24h时放射性脱落小于5%。荷瘤裸鼠注射99mTc-Rch24 F(ab’)23h后即可观察到肿瘤影像,5~24h均可获得清晰的肿瘤影像,标记抗体在体内呈肿瘤靶向性分布,12h时肿瘤的摄取和多数脏器T/NT比值均达到最高水平。[结论]99mTc-Rch24 F(ab’)2在体内靶向分布于结肠癌肿瘤组织,具有较高的T/NT比值并可在肿瘤局部滞留,注射99mTc-Rch24 F(ab’)25h后肿瘤成像满意。99mTc-Rch24 F(ab’)2在临床肿瘤的放射免疫分子显像诊断中具有良好的应用前景。
- 孙立新赵泽国遇珑刘军韩璐璐杨治华孙力超冉宇靓
- 关键词：放射免疫显像
- 单克隆抗体12H6的靶抗原在肺癌细胞中的表达及功能研究
- 2013年
- [目的]分析抗肺癌单抗12H6的靶抗原在肺癌细胞系和肺癌组织中的表达,研究单抗12H6体内外生物学功能。[方法]细胞免疫荧光、流式细胞荧光法检测单抗12H6靶抗原在3种肺癌细胞系中的表达及其定位,免疫组化法检测其在人肺癌组织中表达及特异性;Transwell法和CCK-8法分别检测12H6体外对肺癌细胞系侵袭和增殖功能的影响。共接种模型裸鼠体内治疗实验研究12H6对移植瘤生长的抑制作用。[结果]单抗12H6的靶抗原在人肺腺癌细胞(A549、GLC-82)、人肺鳞癌细胞(GLC-P)的胞内及胞膜均有表达,在3种细胞系胞膜的表达比例分别为31.2%、15.4%和16.7%。单抗12H6在人肺癌组织中的表达比例为80.6%,较配对癌旁组织显著上调。单抗12H6在体外能明显抑制肺癌细胞侵袭和增殖;体内能明显抑制移植瘤生长,抑制率为40%。[结论]单抗12H6具有优良的体内外抑瘤功能,可能为肺癌靶向治疗提供潜在的靶向治疗药物。
- 徐洁孙立新遇珑冉宇靓孙力超杨治华
- 关键词：肺癌功能性单克隆抗体靶向治疗
- 抗CEA F(ab')_2抗体在CHO细胞中的表达、纯化及鉴定被引量：1
- 2013年
- 目的:构建抗人癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)小分子嵌合抗体Rch24 F(ab')2真核高效表达载体并在中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary Cell,CHO)中实现高产量表达,对Rch24 F(ab')2的生物学活性进行鉴定。方法:采用DNA重组技术构建Rch24 F(ab')2真核高效表达载体,转染CHO-dhfr-细胞,通过提高MTX浓度进行基因扩增表达,夹心ELISA法测定抗体产量,筛选高表达细胞株,采用亲和纯化的方法从细胞培养上清中纯化Rch24 F(ab')2;采用SDS-PAGE鉴定分子量,采用Western blot、直接ELISA和细胞免疫荧光鉴定所表达的Rch24 F(ab')2的人源性和抗原结合活性。结果:成功构建了抗人CEA小分子嵌合抗体Rch24 F(ab')2的真核高效表达载体,MTX加压扩增表达后筛选获得高产克隆5C4,其抗体产量为32.3μg/ml;结果显示所分泌的主要为正确组装的Rch24 F(ab')2分子,分子量约110kD;West-ern blot、直接ELISA、细胞免疫荧光结果证明所表达的Rch24 F(ab')2含人抗体的恒定区,并特异地与肿瘤细胞表达的CEA结合。结论:成功地在真核细胞CHO中高效表达了具有良好的生物学活性的抗人CEA小分子嵌合抗体Rch24 F(ab')2。
- 孙立新赵泽国遇珑杨治华孙力超冉宇靓
- 关键词：CEACHO
