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国家自然科学基金(39880008)

作品数:8 被引量:87H指数:2
相关作者:宋天保张晓田杜宝玲王亚利许琨更多>>
相关机构:西安交通大学西安交通大学医学院第二附属医院河南医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 7篇细胞
  • 5篇凋亡
  • 5篇细胞凋亡
  • 5篇反义
  • 5篇CASPAS...
  • 3篇基因
  • 3篇核酸
  • 3篇核苷酸
  • 3篇反义核酸
  • 3篇
  • 3篇HL-60细...
  • 2篇蛋白
  • 2篇转染
  • 2篇基因转染
  • 2篇寡核苷酸
  • 2篇反义寡核苷酸
  • 2篇PC-12细...
  • 2篇HL-60细...
  • 1篇淀粉样
  • 1篇淀粉样蛋白

机构

  • 6篇西安交通大学
  • 2篇西安交通大学...
  • 1篇广州医学院
  • 1篇河南医学院

作者

  • 5篇宋天保
  • 3篇张晓田
  • 3篇杜宝玲
  • 2篇王亚利
  • 1篇路明
  • 1篇许琨
  • 1篇白明华
  • 1篇李冬民
  • 1篇吴晓琳
  • 1篇王中卫
  • 1篇刘勤
  • 1篇李小明

传媒

  • 1篇医学综述
  • 1篇解剖学报
  • 1篇中国临床解剖...
  • 1篇西安医科大学...
  • 1篇国外医学(临...
  • 1篇中国组织化学...
  • 1篇Journa...
  • 1篇分子细胞生物...

年份

  • 2篇2006
  • 3篇2003
  • 3篇2002
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
Caspase-3 mRNA反义核苷酸对γ-射线诱导的HL-60细胞凋亡的影响(英文)
2006年
目的观察caspase-3 mRNA反义寡核苷酸(ASODN)对HL-60细胞凋亡的抑制作用,筛选有效ASODN。方法用脂质体介导法将针对caspase-3 mRNA不同序列的4条ASODN导入HL-60细胞中,γ-射线照射。应用电泳法检测DNA梯状条带;Hoechst 33258-碘化丙啶染色,荧光显微镜分析凋亡细胞百分率;流式细胞术进行细胞凋亡定量。结果以caspase-3 mRNA5’非编码区(-62至-46位)与编码起始区(-1至16位)ASODN转染,当转染终浓度≥3μmol/L时,DNA电泳梯状条带消失,流式细胞术亦未见明显的亚二倍体峰;荧光染色分析,凋亡细胞百分率比未转染对照组和错配寡核苷酸对照组显著降低(P<0.01),且随转染终浓度的增加,凋亡抑制率显著增加。另外,5’非编码区ASODN的抑制作用显著强于编码起始区ASODN(P<0.05)。结论caspase-3 mRNA ASODN可抑制γ-射线诱导的HL-60细胞凋亡,作用有序列特异性及剂量依赖性。该结果为细胞过度凋亡相关疾病的基因治疗提供了实验基础。
杜宝玲宋天保
关键词:CASPASE-3基因转染细胞凋亡
调节凋亡疗法的研究进展被引量:1
2002年
Bcl-2反义核酸封闭了Bc1-2mRNA,阻止其翻译成Bcl-2蛋白,从而激活凋亡,用于治疗由于凋亡不足引起的疾病;Caspase抑制剂针对模拟肽酮的活化位点,阻滞细胞凋亡,用于治疗由于过度凋亡而产生的疾病。这两种调节凋亡的疗法,在动物模型中已获得一定功效,目前已用于临床试验。
杜宝玲
关键词:细胞凋亡BCL-2反义核酸CASPASE抑制剂基因治疗
Aβ诱导PC-12细胞凋亡建立阿尔茨海默病细胞模型被引量:25
2002年
目的 用β 淀粉样蛋白 (Aβ2 5- 35)诱导PC 1 2细胞凋亡以建立阿尔茨海默病细胞模型。方法 体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC 1 2细胞 ,以不同浓度Aβ2 5 - 35诱导并于不同时间收获细胞 ,应用MTT法观察细胞活力 ,Fura 2 /AM荧光分析法检测细胞内游离Ca2 +浓度 ,Hoechst332 5 8及碘化丙啶复染分析细胞凋亡。结果 Aβ2 5- 35作用于PC 1 2细胞后 ,细胞活力逐渐下降 ,并呈时间和剂量依赖性 ;同时细胞内Ca2 +浓度显著上升 ;不同浓度Aβ2 5 - 35作用后 ,PC 1 2细胞于不同时间出现凋亡的典型形态学特征 ,该时间比Ca2 +浓度上升约晚 6~ 1 2h。结论 Aβ2 5- 35诱导后PC 1 2细胞活力下降、细胞内Ca2 +浓度上升及细胞凋亡 。
王亚利宋天保路明许琨
关键词:Β-淀粉样蛋白PC-12细胞阿尔茨海默病细胞培养
Caspase-3反义核酸阻抑Aβ_(25~35)诱导的细胞凋亡的研究被引量:1
2003年
目的 :设计、合成Caspase 3mRNA反义寡核苷酸 ,并筛选出能阻抑Aβ2 5~ 3 5诱导的PC 12细胞凋亡的有效片段。方法 :针对Caspase 3mRNA不同区域设计出一系列 17~ 18 mer反义寡核苷酸 ,用脂质体导入PC 12细胞内 ,并用Aβ2 5~ 3 5诱导细胞凋亡。用AnnexinⅤ FITC/PI复染、流式细胞术检测观察凋亡早期细胞变化情况。结果 :针对Caspase 3mRNA编码起始区的反义寡核苷酸片段 (ASODN2 ,-6~ 12 ,5’ GTTGTTGTCCATGGTCAC 3’)导入PC 12细胞后 ,在Aβ2 5~ 3 5诱导下 ,AnnexinⅤ /PI复染、流式细胞仪检测见早期凋亡细胞较对照组及其它反义寡核苷酸组明显减少 (P <0 .0 5 ) ;且导入后Aβ2 5~ 3 5诱导凋亡细胞数与无诱导组相比未见明显增多 (P >0 .0 5 )。结论 :1.Caspase 3在Aβ2 5~ 3 5诱导的PC 12细胞凋亡中起重要作用 ;2 .Caspase 3mRNA的反义寡核苷酸片段 5’ GTTGTTGTCCATGGTCAC 3’能有效阻止Aβ2 5~ 3 5诱导的PC
王亚利宋天保王中卫白明华刘勤
关键词:反义寡核苷酸CASPASE-3ANNEXIN
Caspase-3反义寡核苷酸对γ-射线诱导的HL-60细胞中caspase-3表达与细胞凋亡的抑制作用
2006年
γ-射线可诱导人髓性白血病细胞株HL-60细胞凋亡,但其机制尚未完全明了。为了观察caspase-3在这种细胞凋亡模型中的作用,本研究设计合成针对caspase-3mRNA5′-非编码区和编码起始区的反义寡核苷酸(ASODNs),即ASODN-1和ASODN-2,以脂质体介导法将不同浓度ASODN-1和ASODN-2转染进入HL-60细胞,γ-射线照射。应用TUNEL法观察凋亡细胞形态学变化及检测凋亡细胞百分率,免疫细胞化学、Westernblotting和RT-PCR技术分别检测caspase-3及其mRNA在引入ASODNs前后的表达水平,并以错配寡核苷酸(MODN)转染及未转染细胞作为对照组。TUNEL法检测发现,当ASODN-1和ASODN-2转染终浓度≥3μmol/L时,γ-射线诱导的HL-60细胞凋亡率降低,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01)。免疫细胞化学结果显示,与两对照组相比,转染ASODNs后各组caspase-3阳性细胞率显著下降,阳性细胞染色减弱,其平均灰度值显著增高(P<0.01)。Westernblotting检测显示,转染ASODNs组细胞caspase-3蛋白酶原表达降低,其中ASODN-1组显著低于ASODN-2组。RT-PCR结果显示两对照组细胞caspase-3mRNA均有明显表达,转染ASODNs后caspase-3mRNA表达丰度降低。另外,ASODN-1抑制细胞凋亡和caspase-3表达的作用显著强于ASODN-2(分别为P<0.05和P<0.01)。实验结果表明,caspase-3mRNAASODNs能够抑制γ-射线照射诱导的HL-60细胞凋亡,下调caspase-3蛋白和caspase-3mRNA的表达水平,其抑制作用在一定范围内呈剂量依赖性。
张晓田宋天保李冬民吴晓琳
关键词:CASPASE-3反义寡核苷酸HL-60细胞细胞凋亡
Caspase-3与细胞凋亡的研究被引量:60
2002年
张晓田
关键词:CASPASE-3细胞凋亡半胱天冬酶-3BCL-2
Caspase-3 mRNA反义核酸对γ-射线诱导的HL-60细胞凋亡的影响
2003年
目的 观察caspase 3mRNA反义寡核苷酸 (ASODN)对HL 6 0细胞凋亡的抑制作用 ,筛选有效ASODN。 方法 用脂质体介导法将针对caspase 3mRNA不同序列的 4条ASODN导入HL 6 0细胞中 ,γ 射线照射。应用电泳法检测DNA梯状条带 ;Hoechst332 5 8 碘化丙啶染色 ,荧光显微镜分析凋亡细胞百分率 ;流式细胞术进行细胞凋亡定量。 结果 以caspase 3mRNA 5′非编码区 (- 6 2至 - 4 6位 )与编码起始区 (- 1至 16位 )ASODN转染 ,当转染终浓度≥ 3μmol L时 ,DNA电泳梯状条带消失 ,流式细胞术亦未见明显的亚二倍体峰 ;荧光染色分析 ,凋亡细胞百分率比未转染对照组和错配寡核苷酸对照组显著降低 (P <0 0 1) ,且随转染终浓度的增加 ,凋亡抑制率显著增加。另外 ,5′非编码区ASODN的抑制作用显著强于编码起始区ASODN(P <0 0 5 )。 结论 caspase 3mRNAASODN可抑制γ 射线诱导的HL 6 0细胞凋亡 。
杜宝玲宋天保张晓田李小明
关键词:CASPASE-3HL-60细胞凋亡基因转染
Set up Alzheimer's Disease Cell Apoptosis Model with PC-12 Cell Induced by Aβ25-35
2003年
Objective: To prepare an apoptosis cell model of Alzheimer Disease ( AD ) by PC-12 cells treated with β-amyloid protein (Aβ). Methods: PC-12 cells were incubated with differ-ent concentrations of Aβ25-35 for different duration in vitro. The cell viability was detected by MTT as-say. Morphological features of apoptosis were analyzed with Hoechst 33258/Prorlidium iodide dual staining, The level of intracellular free calcium ([Ca^2+]i) was calculated by Fura-2 / AM fluorescence ratio imaging. Results: ① The viability of PC-12 cells was significantly decreased in prolrrrtion to concentration of Aβ25-35 and duration of exposure to Aβ25-35. ②The apoplotic cells appeared in a time and concentration-dependent manner, and the maximal apoptosis happened at 48 h after execute to 20μmol/ L of Aβ25-35 and 36 h to 30μmol/ L. Cell death reached the peak at 12-24 h later than the apoptotic peak. ③([Ca^2+]i) of PC-12 cells was increased in prolrrrtion to duration of exposure to the same concentration of Aβ25-35. The time of the highest increase rate of [Ca^2+]i was about 12 h earlier than that of apoptosis. Conclusion : An AD cell model using the PC-12 cells induced with Aβ25-35 displays aseries of chanqes related to apoptosis, which may be related to elevation of [Ca^2+]i.
王亚利王中卫宋潍杨林
关键词:阿尔茨海默氏病PC-12细胞AΒ25-35Β-淀粉蛋白
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