中国博士后科学基金(20060390773) 作品数:7 被引量:24 H指数:4 相关作者: 康国章 郭天财 刘超 王永华 朱云集 更多>> 相关机构: 河南农业大学 河南科技大学 湖南农业大学 更多>> 发文基金: 中国博士后科学基金 河南省教育厅自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
小麦籽粒内AGPase质体型小亚基的克隆和序列分析 被引量:4 2008年 文章从小麦籽粒中克隆了淀粉合成关键酶AGPase的质体型小亚基(SSU Ⅱ)的cDNA序列。其中间部分与3'端序列与大麦SSU Ⅱ(Z48563)的同源性高达97%,但在5'端特异的转移肽切割位点却比Z48563缺失一段113bp序列。本文克隆的SSU Ⅱ其特异5'端序列与已报道的大麦(Z48563)、小麦(536819)、玉米(AF334960)进行多序列比对和同源性比较显示,它们的亲缘关系较远,表明这可能是一个新的SSU Ⅱ基因。另外,在检测的22个现今推广面积较大的小麦品种中,SSU Ⅱ 5'端缺失序列的现象都普遍存在。 康国章 沈丙权 王永华 刘超 郭天财 朱云集关键词:小麦 淀粉 AGPASE 小麦AGPase胞质型大亚基基因的克隆与表达分析 被引量:4 2008年 从大粒型小麦品种豫教2号中克隆出调控小麦ADPG焦磷酸化酶(AGPase)胞质型大亚基基因(LSUI)cDNA全长。在花后15d的小麦植株中,通过半定量PCR法,发现LSUI基因在叶、籽粒、叶鞘和颖壳中表达量较高,但在根和茎中表达量较低,表明在绿色光合功能器官和淀粉合成器官中,LSUI基因量表达较高。比较了LSUI基因在千粒重不同的豫教2号和兰考矮早八两小麦品种籽粒发育过程中的表达差异后,发现在籽粒形成期,LSUI基因在两品种籽粒内表达相似,但在籽粒灌浆期和成熟期间,LSUI基因在千粒重较高的豫教2号内表达量明显高于千粒重较低的兰考矮早八,这个表达差异与两品种间淀粉积累差异趋势相似,表明LSUI基因的表达量可能与淀粉的积累量密切相关。 康国章 王永华 刘超 沈丙权 郭天财 朱云集关键词:小麦 基因克隆 RT-PCR 基因表达 小麦淀粉GBSSII基因的克隆、反义和RNAi载体的构建 被引量:7 2008年 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号籽粒中克隆出颗粒型淀粉合成酶II基因(Granule bound starch syn-thase,GBSSII)部分cDNA片段(1 069 bp)(GenBank登录号:EF221764),同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的GBSSII基因有高度的同源性。以pWM101质粒为基础,构建了由35 S启动子调控的GBSSII基因的反义表达载体pWM101GBSSIIA;另外,还以pFGC5941质粒为基础,构建了GBSSII基因的RNAi载体pFGC5941GBSSIIsa,这些载体的构建为研究GBSSII基因的功能打下了很好的基础。 康国章 肖向红 王永华 郭天财 朱云集 官春云关键词:普通小麦 小麦叶片内几个抗冷相关基因cDNA片段的克隆 被引量:2 2009年 运用RT-PCR法,从小麦叶片中克隆出SOD、CAT、APX、GR、CBF、GI等几个抗冷相关基因的cDNA片段,序列比对结果显示,这些基因与GenBank上已登录的大麦、小麦、玉米、水稻等相关基因的同源性较高,表明克隆出了上述几个小麦抗冷相关基因,其中的APX和GR为普通小麦中首次报道。 康国章 岳彩凤 沈丙权 刘超 王永华 郭天财关键词:小麦 克隆 小麦AGPase胞质型小亚基SSUI的克隆及过表达反义表达与RNAi干扰载体的构建 被引量:2 2008年 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号的发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶AGPase胞质型小亚基(AGPase plastic small subunit,SSU I)的cDNA全长,并构建了此基因的过表达、反义表达和RNAi干扰载体.SSUI的cDNA全长为1465 bp(GenBank No.EF405961),编码域长度为1 422 bp,位于EF405961的2~1 423 bp.同源性比较结果表明:与GenBank上已报道的SSU I基因(X66080,AF244 997,Z48562)同源性达98%~99%.以pWM101质粒为基础,构建了由35 S启动子调控的SSU I基因的过表达载体pWM101SSU I S;将该基因反向置于pBI121质粒的CaMV35S启动子之后,构建了SSU I的反义表达载体pBI121SSU I A.同时还克隆出SSU I基因的一段260 bp高保守序列,以pFGC5941质粒为基础,构建了RNAi干扰载体pFGC5941SSU I. 康国章 张孟琴 官春云 郭天财 朱云集关键词:普通小麦 小麦AGPase4个亚基的克隆及其组织特异性表达 被引量:7 2009年 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号发育籽粒中克隆出小麦淀粉合成关键酶—AGPase的胞质型小亚基(cytosolic small subunit,SSUⅠ)、质体型小亚基(plastidial small subunit,SSUⅡ)、胞质型大亚基(cy-tosolic large subunit,LSUⅠ)和质体型大亚基(plastidial large subunit,LSUⅡ)的cDNA序列。所克隆的基因cDNA序列长度分别为1 4651、6311、941和535 bp。序列比对结果显示SSUⅠ、LSUⅠ和LSUⅡ与已往报道的大麦、小麦、玉米、水稻等相关基因的同源性较高,而SSUⅡ的cDNA序列为首次克隆,与大麦SSUⅡ相比,5'端缺失编码转移肽的一段序列,表明其可能对质体AGPase活性产生一定影响。通过半定量PCR法发现SSUⅠ与LSUⅠ在籽粒中表达量较高,而SSUⅡ和LSUⅡ在叶片中丰富表达。 康国章 刘超 沈丙权 肖向丽 郭天财关键词:小麦 克隆 组织特异性表达 小麦淀粉合酶基因I的克隆及反义和RNAi载体的构建 被引量:4 2008年 采用RT-PCR方法从小麦品种豫教2号发育的籽粒中克隆出淀粉合酶I基因(starch synthase I,SSI)部分cDNA片段(795 bp)(GenBank No.EF221762),同源性比较结果显示,它与GenBank上已报道的SSI基因有高度同源性。以p WM101质粒为基础,构建了由35S启动子调控的SS I基因的反义表达载体p WM101SSI;另外,还以pFGC5941质粒为基础,构建了SSI基因的RNAi载体pFGC5941SSIsa,这些载体的构建为研究此基因的功能奠定了基础。 康国章 刘超 王永华 郭天财 朱云集关键词:普通小麦