国家自然科学基金(30370736)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：李丰李晓东刘彤王桂玲李家滨更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
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- p21活化蛋白激酶2在卵母细胞成熟中的作用被引量：1
- 2007年
- 研究p21活化蛋白激酶2(p21-activated kinase2,PAK2)在爪蟾卵母细胞成熟中的作用。利用特异性抑制PAK2活性的PAK2-N端(PAK2-Nterminal,PAK2-NT)片段显微注射爪蟾卵母细胞。荧光显微镜下比较PAK2-NTmRNA注射组和未注射对照组卵母细胞胚泡破裂发生。共聚焦显微镜下,时间延迟摄影法观察两组卵母细胞胞质分裂过程中肌动蛋白和纺锤体的变化。与未注射PAK2-N端mRNA的对照组卵母细胞相比,注射组卵母细胞胚泡破裂发生无异常,但未见胞质分裂发生和极体形成。结果提示PAK2可能参与爪蟾卵母细胞胞质分裂过程。
- 程大也梁彬李丰
- 关键词：卵母细胞胞质分裂
- 一种高效而经济获得长片段基因突变体的方法被引量：8
- 2006年
- 重组PCR方法的发展为体外突变技术提供了更快捷、准确的方法.通过改进引物设计和PCR保真性等方法,应用重叠延伸PCR的原理成功地实现了对BA基因的定点突变,并构建了其含有m1,m2,m3和m4的突变体.实验证明通过这种改进方法可以有效地进行长片段基因的突变,并且这种方法与其他方法相比具有简便、快捷、经济、高效的特点.
- 刘彤李晓东王桂玲李家滨李丰
- 关键词：定点突变
- p21活化激酶4在胃癌中的表达及意义被引量：1
- 2008年
- 目的探讨p21活化激酶4（PAK4）在人胃癌组织和胃癌细胞系中的表达及与临床病理因素的关系。方法免疫组化法检测95例人胃癌组织中PAK4蛋白的表达；Westernblot法检测40例新鲜胃癌组织和相应的癌旁正常胃黏膜组织以及7种人胃癌细胞系中PAK4蛋白的表达。结果95例人胃癌组织中，PAK4蛋白的阳性表达率为67．4％（64／95），其中62例（96．9％）阳性染色位于细胞浆中，仅有2例（3．1％）位于细胞膜上。PAK4蛋白的阳性表达率与胃癌TNM分期（Χ^2=10．426，P〈0．01）和淋巴结转移（Χ^2=4．912，P〈0．05）有关。新鲜胃癌组织中PAK4蛋白的表达量显著高于癌旁正常胃黏膜组织（t=-5．978，P〈0．01），且随胃癌TNM分期的进展，其表达量逐渐增加。7种人胃癌细胞系中均有PAK4蛋白的表达，与GES-1细胞系相比，PAK4蛋自在ACTS、BGC823、MKN45和N87细胞系中呈高表达，而在MGC803、MKN1和SGC7901细胞系中呈低表达。结论PAK4蛋白的过度表达可能与人胃癌的发生发展及预后有关。
- 李泽徐惠绵李丰
- 关键词：胃肿瘤胃癌组织
- 人PAK4基因原核表达载体的构建及其重组蛋白表达被引量：2
- 2006年
- 目的构建hPAK4的原核表达载体并诱导和鉴定其表达。方法pCAN2-PAK4质粒经XhoI和BamH I双酶切后,克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,在E.coliBL21中诱导GST-hPAK4融合蛋白表达,并经W estern印迹鉴定结果。结果hPAK4编码序列已被克隆至GST融合表达载体pGEX-5X-1,双酶切鉴定片段大小为2.4kb,并在E.coliBL21中获得了诱导表达,蛋白的分子量为92KD。结论成功构建了hPAK4基因原核表达载体,诱导表达出GST-hPAK4融合蛋白。
- 李妍邵阳光李丰
- 关键词：原核表达融合蛋白
