国家自然科学基金(81271851) 作品数:7 被引量:5 H指数:1 相关作者: 陈晖 苏锦明 叶力 李彧 曾锦荣 更多>> 相关机构: 广西医科大学 广西医科大学第一附属医院 武汉大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广西壮族自治区自然科学基金 广西卫生厅科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
丙型肝炎病毒直接抗病毒药物的研究进展 2014年 全球丙型肝炎病毒(Hepatitis C Virus,HCV)感染者超过1.8亿,HCV感染可导致慢性肝病、肝硬化和肝细胞癌(HCC)等疾病,已成为严重的健康问题。HCV是基因组大小9.6kb的单链RNA病毒,属黄病毒科,丙型肝炎病毒属, 陈晖 苏锦明 叶力关键词:丙型肝炎病毒 持续病毒学应答 TELAPREVIR BOCEPREVIR 霉酚酸对丙型肝炎病毒复制的抑制作用 2013年 目的调查临床使用的免疫抑制剂,包括霉酚酸、雷帕霉素和他克莫司(FK-506)对肝细胞中HCV复制的影响。方法用各种免疫抑制剂处理HCVJFH-1感染的肝细胞,利用实时定量RTPCR检测HCVRNA的水平,用WesternBlot检测HCV核心蛋白表达水平。结果用霉酚酸处理HCVJFH-1感染的肝细胞,可以极大地降低HCVRNA的水平和减少HCV核心蛋白的表达;雷帕霉素和FK-506对HCV复制的影响不大。外源性鸟嘌呤核苷可以逆转霉酚酸对HCV复制的抑制作用。结论在肝细胞中霉酚酸通过耗尽细胞的鸟嘌呤核苷抑制HCV复制。霉酚酸在临床上可能有益于HCV感染的肝移植患者。 陈晖 曾锦荣 叶力 苏锦明 李彧 霍文哲关键词:肝炎 丙型 肝炎病毒属 免疫抑制剂 霉酚酸 霉酚酸对肝细胞自噬相关因子表达的影响 2016年 目的比较日本爆发性丙型肝炎病毒1型(hepatitis C virus Japanese fulminant hepatitis-1,HCV JFH-1)感染的Huh7细胞中细胞自噬因子在霉酚酸(mycophenolic acid,MPA)处理组与对照组的表达差异,探讨MPA对肝细胞自噬相关因子的调节影响。方法用HCV JFH-1感染Huh7细胞,用5μg/ml的霉酚酸处理细胞24 h,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q PCR)和蛋白免疫印迹法测定细胞内HCV、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated-protein 1 light chain,MAP1-LC3B,简写LC3B)、自噬相关因子3(autophagy-related gene 3,ATG3)和自噬相关因子7(autophagy-related gene 7,ATG7)的信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)和蛋白相对表达量,比较上述因子在处理组和对照组之间的差异。结果在核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)和蛋白水平上,MPA可以降低HCV在Huh7细胞中的表达并且降低自噬标记物LC3B mRNA和LC3B-II的蛋白质表达(均有P<0.001);MPA可以使Huh7细胞中的自噬相关因子ATG3和ATG7的mRNA和蛋白相对表达量下降(P<0.001;P=0.003;P=0.010;P=0.002)。结论 MPA可以抑制HCV JFH-1在Huh7细胞中的复制和细胞自噬,并且可以下调自噬因子ATG3和ATG7的表达,推测MPA可能通过调节自噬关键因子表达来抑制细胞自噬从而拮抗HCV的复制。 蒋俊俊 苏锦明 李彧 陈晖 梁冰玉 黄颉刚 潘沛江 刘洁 赵芳凝 梁浩 霍文哲 叶力关键词:霉酚酸 自噬 各型干扰素对肝细胞HCV复制相关微RNA表达的影响 被引量:3 2014年 目的探讨不同类型干扰素(IFN)对肝细胞丙型肝炎病毒(HCV)复制相关微RNA(miRNA)表达的影响。方法用不同浓度的I型(IFN-α、IFN-β)、Ⅱ型(IFN-γ)和Ⅲ型(IFN-h1)IFN处理Huh7细胞24h,用未经处理的Huh7细胞作为对照,采用实时荧光定量PCR检测Huh7细胞中HCV复制相关miRNA的表达及其差异,实验均重复4次。结果IFN-α、IFN-β、IFN-γ1组miRNA-196、miRNA.296、miRNA.351、miRNA-431和miRNA-448的表达均高于对照组(474.5±57.7、436.0±37.8、431.3±43.5比99.54-2.4,389.5±44.0、416.3±36.7、284.8±20.9比99.04-0.8,453.3±51.1、473.8±24.0、522.0±40.3比99.5±2.1,288.3±44.9、294.3±29.9、450.0±29.5比100.5±2.4,319.0±35.4、357.0±27.5、446.54-61.2比99.8±1.0,均P〈0.05)。IFN-^y组miRNA-196、miRNA一351和miRNA-448的表达(271.3±29.6、140.5±27.5、177.8±23.4)均高于对照组(均P〈0.05),而miRNA-296和miRNA-431的表达与对照组差异均无统计学意义(均P〉0.05)。不同浓度(10、100、1000U/m1)的IFN-α、IFN-β、IFN-γ1和10、100、1000rig/mlIFN—hl处理组的miRNA-122表达均低于对照组(49.3±4.9、32.0±3.7、24.5±3.7比99.5±2.1,53.5±1.9、35.5±2.7、25.8±4.0比98.8±1.3.60.8±7.1、43.8±4.0、33.5±4.2比99.3±2.6和50.0±2.9、35.5±3.3、22.3±3.8比100.3±1.5,均P〈0.01)。结论不同类型IFN均具有上调抑制HCV复制miRNA的能力,同时可以下调支持HCV复制的miRNA-122的表达,表明调节HCV复制相关miRNA表达是不同类型IFN抗HCV的一个普遍机制。而Ⅱ型IFN与其他类型IFN调节HCV复制相关miRNA表达的模式有所不同,表明Ⅱ型IFN与I、Ⅲ型IFN在miRNA水平上具有不同的抗病毒机制。 陈晖 叶力 苏锦明 蒋敦科 李彧 曾锦荣 阮族明关键词:干扰素类 微RNAS 不同类型干扰素对Toll样受体在Huh7细胞中表达的影响 被引量:1 2014年 目的探讨不同类型干扰素对肝细胞Toll样受体(toll like receptor,TLR)3、4、7、9表达的影响。方法感染丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)JFH-1病毒的Huh7细胞分别加入干扰素α(interferon,IFN-α)、IFN-β、IFN-γ、IFN-λ1处理24 h,以实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)分析Toll样受体3、4、7、9以及HCV复制水平的变化。结果各干扰素均能抑制HCV的复制(t分别为-45.699、-68.165、-70.994、-67.111,均有P<0.001)。方差分析显示各干扰素处理组间TLR3、TLR4、TLR7及TLR9的相对表达量差异有统计学意义(F分别为125.901、263.537、163.289、31.774,均有P<0.001),进一步两两比较可知,IFN-α、IFN-β能上调TLR3(t分别为21.312、25.420,均有P<0.001)、TLR7(t分别为26.456、24.289,均有P<0.001)的表达,同时下调TLR9的表达,而对TLR4的表达没有影响;IFN-γ可上调TLR4、TLR7的表达,对TLR3和TLR9的表达没有影响;IFN-λ1可上调TLR3、TLR7、TLR9的表达水平,但对TLR4的表达没有影响。结论不同干扰素对肝细胞不同Toll样受体表达的作用不同,反映出不同干扰素具有不同的抗病毒作用机制。 陈晖 李彧 蒋敦科 苏锦明 曾锦荣 阮族明 莫林芳 叶力关键词:干扰素 丙型肝炎病毒 TOLL样受体 干扰素λ1对Huh7细胞自噬相关基因ATG3、ATG5及Bcl-xl表达的影响 被引量:1 2015年 目的研究干扰素λ1(interferonλ1,IFN-λ1)对肝细胞内自噬相关基因表达的影响,探讨IFN-λ1抗HCV的新机制。方法感染HCV JFH-1毒株的Huh7细胞加入IFN-λ1处理,采用实时荧光逆转录定量PCR法分析细胞自噬相关基因LC3、Beclin、ATG3、ATG5、ATG7、Bcl-xl、Bad mRNA表达以及HCV RNA水平的变化,采用Western Blot检测自噬相关基因和HCV Core在蛋白水平的变化。结果 IFN-λ1抑制HCV在Huh7细胞中的复制,与对照组相比,IFN-λ1可以下调HCV RNA的水平(t=-4.513,P=0.011)和HCV Core蛋白相对表达量(t=6.943,P=0.020);IFN-λ1可下调细胞自噬基因ATG3、ATG5的mRNA表达(t=10.311,P=0.007;t=-14.246,P=0.004),同时上调细胞自噬抑制因子Bcl-xl的mRNA表达(t=-5.246,P=0.034)。IFN-λ1对ATG3、ATG5的蛋白表达同样具有抑制作用(t=6.668,P=0.022;t=13.343,P=0.006)。结论干扰素λ1可能通过抑制肝细胞内自噬基因ATG3、ATG5的表达以及上调细胞自噬抑制因子Bcl-xl的表达,破坏细胞自噬过程,从而达到抗HCV的作用。 李彧 陈晖 苏锦明 蒋俊俊 梁冰玉 黄颉刚 潘沛江 刘洁 赵芳凝 莫林芳 梁浩 霍文哲 叶力关键词:干扰素类 丙型肝炎病毒 基因表达 胃腺癌血管活性肠肽受体mRNA表达的研究 2014年 目的研究血管活性肠肽受体mRNA在胃腺癌组织和AGS人胃腺癌细胞中的表达情况,探讨其在胃腺癌发病过程中的作用。方法采用RT-PCR方法,检测24例胃腺癌组织、24例正常胃腺组织及不同传代AGS人胃腺癌细胞中VIPR mRNA的表达。结果胃腺癌患者组VIPR1 mRNA表达率为45.00%(9/24),低于正常对照组的83.33%(20/24)(P<0.05);VIPR2 mRNA表达率在胃腺癌患者组和正常对照组分别为50.00%(10/24)和66.67%(16/24),差异无统计学意义(P>0.05)。与正常胃窦黏膜比较,VIPR1 mRNA的表达量下降(P<0.05),但VIPR2 mRNA的表达量和正常胃窦黏膜差异无统计学意义(P>0.05)。不同传代AGS人胃腺癌细胞中均有VIPR mRNA的表达,但传代细胞之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论VIPR mRNA的低表达可能与胃腺癌的发生发展有关,检测VIPR mRNA表达对胃腺癌的诊断具有一定的指导意义。 陈晖 廖艳研 莫林芳 阮族明 蒋俊俊 梁冰玉 潘沛江关键词:胃腺癌 MRNA