国家重点基础研究发展计划(2007CB714036)
- 作品数：11 被引量：82H指数：6
- 相关作者：陈坚堵国成李秀芬吴敬华兆哲更多>>
- 相关机构：江南大学浙江工业大学内蒙古师范大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金食品科学与技术国家重点实验室科研基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 利用来源于Paenibacillus macerans的α-CGTase突变体Y89D制备α-环糊精被引量：10
- 2011年
- 对α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGTase)突变体Y89D制备α-环糊精的影响因素进行初步研究。其因素包括淀粉种类(马铃薯淀粉、玉米淀粉、木薯淀粉、可溶性淀粉)、加酶量、反应时间、pH值、有机溶剂(乙醇、异丙醇、正丁醇、正癸醇)和温度。结果表明:选用5g/100mL马铃薯淀粉、pH5.0、温度30℃、加酶量控制在每克淀粉5U左右,反应体系中加入体积分数5%的正癸醇,反应6h后,淀粉总转化率可达70%,其中α-环糊精在产物中质量分数约为85%,转化产物中含有少量β-环糊精(15%),而极少生成γ-环糊精。因此,α-CGTase突变体Y89D在制备α-环糊精工艺中具有很好的工业化应用前景。
- 王宁吴丹陈晟陈坚吴敬
- 关键词：Α-环糊精Α-环糊精葡萄糖基转移酶转化率
- 微曝气Fenton氧化法处理模拟双酚A废水的效果及其生物验证被引量：8
- 2009年
- 研究了微曝气Fenton氧化法关键工艺参数对模拟双酚A(BPA)废水处理效果的影响,并从活性污泥性质和污染物去除率两方面,采用膜生物反应器(membrane bioreactor,MBR)对微曝气Fenton氧化法的处理效果进行了实验验证,为实现BPA废水的生物处理奠定基础。结果表明,初始pH值、反应时间、H2O2/COD(质量浓度比)、H2O2/Fe2+(摩尔浓度比)、反应温度及曝气量均对预处理效果有较大影响,在最佳条件下,COD去除率可达70%,BOD/COD值则由原废水的0.02提高到0.50以上。MBR处理上述出水的结果表明,经微曝气Fenton氧化处理BPA的废水,可较好地适应后续的生化处理。
- 何志明李秀芬堵国成陈坚
- 关键词：双酚A膜生物反应器COD去除率BOD/COD
- 溶液化学特性对果聚糖在聚偏氟乙烯膜上吸附的影响
- 2009年
- 活性污泥体系中存在产生果聚糖的诸多微生物,研究其在膜表面的吸附行为有利于控制膜生物反应器中的膜污染。结果表明,果聚糖在聚偏氟乙烯膜上的吸附可在60 min内达平衡。随溶液pH值的增大,果聚糖吸附量先降低后增加,在pH=7.0处取得最小值,为20 mg/m2。而吸附量随离子强度的变化趋势则是先增加后降低,在离子强度为0.004处取得最大值,为39 mg/m2。果聚糖在聚偏氟乙烯膜表面的吸附等温线遵循兰格缪尔方程,并给出了不同溶液化学条件的吸附自由能。果聚糖与聚偏氟乙烯膜之间的吸附可能受静电力和范德华力的共同作用,且吸附是可逆的。
- 徐绘霞李秀芬陈坚堵国成
- 关键词：果聚糖聚偏氟乙烯膜
- 新型碱性果胶酶用于棉针织物精练的工艺优化被引量：6
- 2008年
- 针对芽孢杆菌Bacillussp.WSHB04-02所产碱性果胶酶在棉织物精练中存在的问题,研究该碱性果胶酶应用于棉针织物精练的工艺条件,并进行优化。利用单因素法考察pH值、温度、酶用量和处理时间4个因素对酶精练效果的影响,得出该碱性果胶酶用于棉针织物精练的最优工艺条件为:酶活浓度960 U/L(1.2 mL/L),pH值7.0,温度60℃,处理时间40 min。对利用优化工艺处理的棉针织物的织物失重率、毛效、果胶去除率进行测定,与国外公司的相关产品以及传统碱精练工艺的使用效果做了比较。结果表明,新型碱性果胶酶具有中性、耐热性较好、成本较低和环境污染少的优点。
- 吴辉钱国坻华兆哲阎贺静张朝晖堵国成陈坚
- 关键词：碱性果胶酶棉针织物
- 聚乙烯醇脱氢酶的提取及检测
- 2009年
- 为解决结合在细胞上的可溶性蛋白聚乙烯醇脱氢酶(PVADH)的检测困难问题,从提取及检测两方面对该酶进行研究,并对检测方法进行改进。结果表明,非离子型表面活性剂Triton X-100对可溶性蛋白PVADH的提取效果优于离子型表面活性剂烷基苯磺酸钠(LAS)和溴化十六烷基吡啶(CPB),酶活力比LAS和CPB提取后所得酶活力分别提高246.5%和831.3%。而非离子型表面活性剂中,Triton X-100与Tween 80相比,所得最高酶活提高了101.4%。Triton X-100浓度和提取时间对测定有明显影响,以1%Triton X-100提取18 h为宜,最高比酶活达14.9U/g。在PVADH检测体系中,加入电子受体启动反应比加入酶液与底物启动反应可使酶活性分别提高60.6%和126.5%;酶液与吡咯喹啉醌(PQQ)预先保温对检测该酶活性是十分重要的,可使酶活性提高59.1%。在检测系统中加入的KCN、CaC l2和PQQ的适宜浓度分别为1.0 mmol/L、0.5 mmol/L和2μmol/L,可使测定酶活分别提高37.1%、38.7%和214.0%。
- 李敏廖鲜艳堵国成陈坚
- 关键词：脱氢酶聚乙烯醇表面活性剂
- MBR中厌氧氨氧化运行特性及微生态结构被引量：7
- 2010年
- 研究了膜生物反应器（MBR）中厌氧氨氧化（Anammox）的运行特性与微生态结构变化。采用含氮模拟废水进行试验,最终获得粒径集中在0.2-1 mm的红褐色厌氧氨氧化颗粒污泥。运行结果显示,厌氧氨氧化菌能够承受的容积负荷达0.245 kgTN/（m3.d）;总氮、NH4＋-N和NO-2-N去除率分别达到80%、81%、91%。水力负荷冲击试验表明,当HRT从14 h下降到7.9h时,NH4＋-N、NO-2-N去除率相对稳定,分别保持在75%和85%左右,厌氧氨氧化仍然能够稳定进行。通过末端限制性酶切片断长度多态性（T-RFLP）试验发现,反应器运行完成后微生物呈多态性分布,优势菌突出,其中起Anammox作用的菌属主要为planctomyce、pirellula、gemmata、pseudomonas,这为厌氧氨氧化运行过程中微生物群落结构变化提供理论依据。
- 路青华兆哲李秀芬葛富青堵国成陈坚
- 关键词：膜生物反应器厌氧氨氧化颗粒污泥
- 化学添加剂提高重组α-环糊精葡萄糖基转移酶酶制剂稳定性被引量：4
- 2011年
- 通过向重组α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGT酶)液中添加化学添加剂以提高其热稳定性及贮存稳定性。在不同温度下研究了添加剂对酶液的贮存稳定性影响,并用圆二色谱(CD)研究了CGT酶在近紫外区和远紫外区蛋白质结构与热稳定性的变化关系。当单独加入各种添加剂在50℃水浴1 h和室温放置108 d后,发现含有20%甘油的酶液稳定性最好,与未加任何添加剂的对照酶液相比仍有91%和50%的酶活,对照酶液在50℃水浴1 h后仅有小于10%的活性,室温放置108 d后已经没有酶活。明胶、CaCl2和PEG400也有一定的保护效果。将4种保护剂分别以最佳浓度组合叠加添加到CGT酶发酵液中40℃贮存45 d,CGT酶的残酶活几乎不变,维持在100%左右。通过变温圆二色光谱分析α-CGT酶α-螺旋和β-折叠变化,发现了保护剂可以明显降低高温条件下酶的变性程度,有利于维持其二级结构及天然三维构象,使酶在高温时保持较高的酶活。化学添加剂可以明显提高α-CGT酶酶制剂的稳定性,为CGT酶的工业化应用提供稳定剂复配的方法,同时蛋白质的变温圆二色谱分析也为其他蛋白酶热稳定性研究提供了理论依据。
- 郑贤良吴丹李兆丰陈坚吴敬
- 关键词：Α-环糊精葡萄糖基转移酶化学添加剂热稳定性圆二色光谱
- 接种污泥源对厌氧氨氧化启动效能的影响被引量：17
- 2009年
- 厌氧氨氧化（anaerobic ammonium oxidation,ANAMMOX）菌生长缓慢是影响其实际应用的主要问题之一,选取合适的接种污泥十分重要。本研究采用好氧污泥、厌氧颗粒污泥和厌氧消化污泥3种接种污泥,分别经过61、70和85 d的运行均实现了厌氧氨氧化过程,氨氮去除率分别为82%、92%和91%,总氮去除率达76%、82%和80%。分别接种3种污泥源的厌氧序批式反应器（ASBR）R1、R2、R3出水pH值最终稳定在8.4、8.5、8.5。好氧污泥呈絮状,但沉降性比接种前好,厌氧颗粒污泥解体后最终形成粒径集中在0.5-1.0 mm的污泥,厌氧消化污泥则呈沙化状态,有细小颗粒出现。根据厌氧氨氧化细胞产率系数及NH4^＋-N、NO2--N去除量和NO3--N生成量之间的计量学关系,估算出厌氧氨氧化菌产率系数（以1 mol NH4^＋产生的CH2O0.5N0.15量计）分别为0.080、0.105和0.114 mol.mol^-1,说明反应器内厌氧氨氧化菌有不同程度的衰减。总体而言,厌氧颗粒污泥是富集厌氧氨氧化菌的最适污泥源。
- 路青李秀芬华兆哲堵国成陈坚
- 关键词：厌氧氨氧化接种污泥
- 黑曲霉α-葡萄糖苷酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达被引量：16
- 2009年
- 【目的】以毕赤酵母(Pichia pastoris)KM71为宿主菌表达黑曲霉(Aspergillus niger)SG136 α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase)。【方法】以实验室保藏的A.niger SG136总DNA为模板,根据NCBI数据库中A.niger CBS 513.88 α-葡萄糖苷酶的cDNA序列(aglu)设计引物,通过PCR和重叠延伸PCR(overlap-PCR)方法,扩增得到aglu,将其克隆到载体pMD18-T simple vector,测序结果表明,aglu编码960个氨基酸。与A.niger CBS 513.88α-葡萄糖苷酶相比仅有一个氨基酸的差异。将得到的aglu亚克隆到质粒pPIC9K,构建表达载体pPIC9K-aglu,经BglⅡ线性化后电转化P.pastoris KM71,经过MD、YPD/G418平板筛选表型,PCR方法验证,获得分泌表达重组P.pastoris KM71/pPIC9K-aglu。摇瓶培养中通过添加终浓度为1%的甲醇诱导α-葡萄糖苷酶的分泌。【结果】SDS-PAGE显示表达蛋白的大小亚基分子量分别为98kDa和33kDa,阴性对照中没有出现此条带,非变性电泳检验为一条带。制备的粗酶液的酶学性质表明,转苷反应最适pH为5,最适温度为55℃。在最适pH和温度下,反应24h时低聚异麦芽糖的总含量达到最大为26.0%。【结论】黑曲霉α-葡萄糖苷酶在P.pastoris中获得可溶性表达,并证明有一定的转糖苷活性。
- 童星唐秋嵩吴玉飞吴敬陈坚
- 关键词：黑曲霉Α-葡萄糖苷酶克隆毕赤酵母
- A/O型序批式MBR处理印染废水被引量：3
- 2009年
- 探讨了A/O型序批式膜生物反应器(MBR)处理印染废水的可行性及效果,并对膜污染进行了初步分析。结果表明,MBR的A段可有效提高印染废水的BOD/COD值,同时进水BOD/COD值越低,效果越明显。A/O型序批式MBR对污染负荷具有较强的抗冲击能力,最高负荷时,COD、氨氮及色度的去除率分别为92.3%、92.7%和95.0%以上,出水浓度分别在60 mg/L、7 mg/L和40倍以下,相对于连续运行,其膜污染也明显减轻。
- 李靖梅张丽娜李秀芬陈坚堵国成
- 关键词：染整膜生物反应器
