深圳市南山区科技计划项目(2006007)
- 作品数:1 被引量:1H指数:1
- 相关作者:梁冰鲁卫平顾大勇周元国王华更多>>
- 相关机构:解放军第401医院深圳出入境检验检疫局第三军医大学大坪医院更多>>
- 发文基金:深圳市南山区科技计划项目中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 纳米金新型基因芯片检测系统结合限制性酶切非PCR法同时检测多种病原性微生物的研究被引量:1
- 2009年
- 目的研究将纳米金新型基因芯片检测系统与限制性酶切非PCR法结合以实现同时对多种病原性微生物进行检测的方法。方法以幽门螺杆菌、肺炎支原体、沙眼衣原体、白色念珠菌、解脲脲原体、EB病毒作为检测目标,选择HhaⅠ内切酶作为工具酶。对所有待检样本核酸进行HhaⅠ酶切,对酶切产物进行同聚A加尾处理,并结合纳米金新型芯片检测系统,分别与特异性探针及通用探针进行两次杂交以完成对目标微生物的检测。通过对168份临床样品的检测,考察新构建芯片的检测结果与荧光定量PCR检测结果的符合率;对构建芯片的稳定性及检测灵敏度进行测试。结果新构建的基于限制性酶切非PCR法的纳米金芯片技术实现了对选定目标的检测。对168份临床样品的检测结果显示,该芯片检测与荧光定量PCR检测的结果有150例完全相符,符合率为89.2%;进一步芯片检测性能实验结果表明,该芯片检测稳定性为100%,检测敏感性为50pmol/L。结论本研究构建的基于限制性酶切非PCR法的纳米金芯片技术可以同时实现对细菌、真菌、支原体、衣原体及病毒等微生物的检测,适用性广且对大幅度提高检测通量有积极意义。
- 梁冰顾大勇鲁卫平王华周元国
- 关键词:纳米金寡核苷酸序列分析病原微生物