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广东省科技计划工业攻关项目(2008A020100001)

作品数：1 被引量：2H指数：1
相关作者：吴丽红范沛施振旦刘玉鹏黄黎珍更多>>
相关机构：华南农业大学南方医科大学更多>>
发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇原核
  • 1篇原核表达
  • 1篇受体
  • 1篇瘦素
  • 1篇瘦素受体
  • 1篇西藏小型猪
  • 1篇克隆及原核表...
  • 1篇及其受体
  • 1篇核表达
  • 1篇胞外区
  • 1篇LEPTIN

机构

  • 1篇华南农业大学
  • 1篇南方医科大学

作者

  • 1篇顾为望
  • 1篇王丛莉
  • 1篇黄黎珍
  • 1篇刘玉鹏
  • 1篇施振旦
  • 1篇范沛
  • 1篇吴丽红

传媒

  • 1篇中国比较医学...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
西藏小型猪Leptin及其受体胞外区片段的克隆及原核表达被引量：2
2011年
目的克隆及原核表达西藏小型猪瘦素(Leptin)成熟肽及瘦素受体胞外区片段。方法根据西藏小型猪瘦素序列(GenBank号:GQ240885.1)和猪瘦素受体基因胞外域序列(GenBank号:AF167719.1)分别设计并合成两对引物扩增瘦素、瘦素受体基因胞外域编码区1654-2319位片段,以西藏小型猪组织总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得了特异性片段。再以该两个特异性片段为模板,另外设计两对带有BanHⅠ和HidⅢ酶切位点的套式引物分别扩增瘦素64-504位(成熟肽编码区)和瘦素受体基因胞外域编码区1655-2314位的cDNA片段,将该两片段克隆入pMD18-T载体并转化感受态细菌E.coli DH5α测序并永久保存。此两片段经酶切后克隆到表达载体pRSET A的BamHⅠ和HindⅢ两酶切位点之间,构建重组质粒pR-OB和pR-OBR-a并在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中表达,SDS-PAGE电泳鉴定表达产物。结果在IPTG诱导下促使重组菌pR-OB表达了相对分子质量约18×103左右的融合蛋白;重组菌pR-OBR-a表达了相对分子质量约27×103左右的融合蛋白。结论说明重组质粒pR-OB、pR-OBR-a在大肠杆菌BL21(DE3)中分别可表达西藏小型猪瘦素成熟肽、瘦素受体片段蛋白,为进一步研究瘦素、瘦素受体功能和应用提供了基础。
吴丽红范沛王丛莉刘玉鹏黄黎珍施振旦顾为望
关键词：原核表达
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