甘肃省自然科学基金(3ZS051-A25-076)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：柳纪省李江涛殷相平胡永浩邹媛媛更多>>
- 相关机构：中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃农业大学中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 狂犬病毒CVS株G基因和IFN-a基因共表达重组腺病毒载体的构建被引量：1
- 2008年
- 通过RT-PCR方法扩增得到狂犬病毒G基因,PCR方法得到IFN-Αa基因并亚克隆入pIRES获得pIRES-a质粒.双酶切G基因和pIRES-a质粒并回收目的基因与腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV连接,再与pAdEasy-1质粒在BJ5183菌中同源重组产生腺病毒载体质粒.线性化后的重组腺病毒质粒转染人胚肾293细胞,通过观察报告基因绿色荧光蛋白的表达鉴定重组的腺病毒.结果表明:该重组病毒质粒经酶切鉴定与预期结果一致;转染293细胞后观察到绿色荧光蛋白的表达,说明成功构建了G和IFN-a双基因共表达重组腺病毒载体.
- 李江涛殷相平柳纪省胡永浩
- 关键词：重组腺病毒
- 狂犬病病毒CVS株核蛋白基因的原核表达、纯化及鉴定被引量：5
- 2008年
- 用RT-PCR技术对狂犬病病毒(RV)CVS株核蛋白(N)基因进行扩增,经克隆与序列分析,该基因编码450个氨基酸残基。将目的基因克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建了重组质粒pET-N,将其转化表达菌BL21(DE3),于37℃1.0mmol∕L IPTG条件下诱导表达。大肠杆菌菌体裂解产物经SDS-PAGE电泳分析,在分子量约为54kD处出现一新蛋白带,和预期的目的蛋白的分子量相符。质谱鉴定的结果表明成功表达了RV N蛋白,为狂犬病的进一步研究奠定了基础。
- 李江涛李轶女殷相平邹媛媛张志芳柳纪省
- 关键词：狂犬病病毒核蛋白原核表达
- 猪繁殖与呼吸综合症病毒E基因克隆及重组腺病毒表达载体的构建
- 2009年
- 研究采用RT-PCR技术对猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)E基因进行了克隆、测序和特征分析,得到长度为603 bp,编码201个氨基酸残基的目的基因片段。将克隆到的E基因插入到pAdTrack-CMV穿梭质粒中,再将重组穿梭质粒pAdTrack-CMV/E用PmeⅠ线性化后电转化携带有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-E,成功获得了含有PRRSVE基因的重组腺病毒表达载体。为猪繁殖与呼吸综合症活载体疫苗的研制提供了依据。
- 刘光瑞李宝玉柳纪省胡永浩
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合症病毒E基因腺病毒
