公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-7

全选清除导出

排序方式：

GITRL基因SNP-rs2236876分型方法的比较: 2015年; 目的:对3种单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)分型方法进行比较,选择准确有效的SNP分型方法对GITRL SNP-rs2236876A/G进行基因分型。方法:采用Taqman-MGB探针法,限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(cleaved amplification polymorphism sequence-tagged sites,PCR-RFLP)法和直接测序法对GITRL SNPrs2236876A/G进行分型并比较。结果:PCR-RLFP法分型结果直接通过电泳图可见,适合少量的实验对象;TaqmanMGB探针法通过不同的荧光区分不同的基因型,适合大量的实验对象;直接测序法交由测序公司测定,样本数量浮动范围较大,费用较高。结论:Taqman-MGB探针法适用于GITRL基因rs2236876A/G基因分型,PCR-RFLP法适用于基因分型结果的验证,直接测序法适用于鉴定有争议的PCR-RFLP法的验证结果。; 吴晶晶仝佳陈娟袁靖田洁汤新逸王胜军; 关键词：TAQMAN-MGB探针 PCR-RFLP

人IL-21 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：1: 2013年; 目的:建立检测人白细胞介素-21(interleukin-21,IL-21)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescencequantitative PCR,qRT-PCR)方法。方法:分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),磁珠分选CD4+细胞,经PHA刺激后提取总RNA并逆转录成cDNA。采用qRT-PCR方法检测IL-21 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,应用该方法检测Graves病患者CD4+T细胞中IL-21 mRNA的相对表达水平。结果:建立了人IL-21 mRNA的实时荧光定量PCR检测方法。该法的熔解曲线为单峰,核酸电泳显示为一特异性条带。Graves病患者CD4+T细胞中IL-21 mRNA的相对表达水平明显高于健康对照组(P<0.001)。结论:建立的检测人IL-21 mRNA的实时荧光定量PCR方法灵敏性、特异性好,为进一步临床应用提供了实验基础。; 朱晨露陈艳红魏衍财秦伟马洁许化溪王胜军; 关键词：白细胞介素-21 实时荧光定量PCR GRAVES病

小鼠白介素17受体A胞外段的表达、纯化及鉴定: 2012年; 目的:分别克隆小鼠白介素17受体A胞外段(mIL-17RAaa32-322)及小鼠IgG2AFc(mIgG2AFc)基因,构建mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白原核表达载体,并在体外表达、纯化及鉴定。方法:利用基因重组技术构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,并在E.coli Rosetta中表达mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,经镍离子螯合层析分离纯化后,用SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法进行鉴定。结果:成功构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,获得高效表达的融合蛋白,且蛋白质印迹证实为目的蛋白。结论:获得mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定基础。; 魏衍财朱晨露陈艳红秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸Samuel Essien Baidoo许化溪王胜军; 关键词：原核表达纯化

氧化偶氮甲烷和葡聚糖硫酸钠致肠炎相关性结直肠癌小鼠模型的建立被引量：2: 2015年; 目的:建立肠炎相关性结直肠癌的小鼠模型。方法:给予小鼠单次小剂量腹腔注射氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)联合2%葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulpate,DSS)自由饮用,建立肠炎相关性结直肠癌小鼠模型。对照组小鼠给予PBS腹腔注射后普通饮水。每天观察症状,2%DSS 5 d,普通饮水16 d,此21 d为1个循环,共进行4个循环,结束后,断颈处死小鼠,取脾脏、肠系膜淋巴结、结肠,观察并比较两组小鼠脾脏,肠系膜淋巴结大体改变和结肠HE染色情况。结果:与对照组比较,实验组小鼠脾脏、肠系膜淋巴结明显增大,结肠远端出现肿瘤。HE染色结果显示,实验组发病小鼠结肠黏膜层及黏膜下层出现广泛的炎症细胞浸润,腺体组织结构紊乱、破坏,出现腺管样结构,具有组织异型性。结论:单剂量AOM与DSS联合使用可在短期内诱导小鼠结肠肿瘤的发生。; 张悦田洁田新宇汤新逸杨珺耿丽娜马洁许化溪王胜军; 关键词：氧化偶氮甲烷葡聚糖硫酸钠结肠癌动物模型

Bcl-6基因3'UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-346靶向关系的验证被引量：1: 2014年; 目的:构建Bcl-6基因3'非编码区(3'untranslated region,3'UTR)荧光素酶报告质粒,分析miR-346对Bcl-6的调控作用。方法:通过PicTar数据库和miRanda数据库预测可能与Bcl-6基因3'UTR作用的miRNA;将人工合成的Bcl-6基因3'UTR区序列克隆至荧光素酶报告质粒psiCHECK-2;将重组荧光素酶报告质粒和miRNA mimics共转染293T细胞,用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果:PicTar数据库和miRanda数据库预测交叉结果显示,miR-346与Bcl-6基因3'UTR存在互补结合位点;构建的荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确;重组质粒和miR-346 mimics共转染293T细胞后,荧光素酶报告质粒表达的荧光素酶活性降低66%左右。结论:成功构建了Bcl-6基因3'UTR荧光素酶报告质粒,筛选出和Bcl-6表达相关的miRNA即miR-346。; 陈娟袁靖吴晶晶田洁汤新逸芮棵田新宇张悦刘海冰耿丽娜杨珺许化溪王胜军; 关键词：BCL-6基因微小RNA

胃癌组织IL-17RB的表达及意义: 2014年; 分析胃癌组织IL-17RB和IL-17B表达水平,探讨其与胃癌发生发展的关系及其可能机制。留取25例胃癌组织及其配对的癌旁组织,应用普通PCR和实时荧光定量PCR法检测IL-17RB和IL-17B的mRNA,采用Pearson法进行相关性分析;western blot和免疫荧光法检测胃癌组织及其配对的癌旁组织IL-17RB蛋白水平表达差异。结果显示,胃癌组织IL-17RB和IL-17B mRNA表达水平均明显高于癌旁组织,两者呈明显正相关;胃癌组织IL-17RB蛋白水平明显高于癌旁组织。在胃癌组织,IL-17B/IL-17RB信号对胃癌的发生发展具有一定作用。; 别庆丽孙彩霞吴玉敏杨慧健应欣宇苏兆亮王胜军许化溪; 关键词：胃癌

小鼠CCL20 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2: 2012年; 目的:建立检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20(CC chemokine ligand 20)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)的方法。方法:分离小鼠脂肪组织细胞,经PMA和离子霉素刺激4 h后收集细胞提取总RNA并逆转录为cDNA。采用qRT-PCR方法检测趋化因子CCL20 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,同时应用该方法检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20mRNA相对表达水平。结果:建立了小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的SYBR Green实时荧光定量PCR检测方法,结果显示该方法的熔解曲线为单峰,同时核酸电泳显示一条特异性条带。检测结果表明高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的相对表达水平明显高于正常饮食对照组(t=3.02,P<0.05)。结论:建立了检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20 mRNA的实时荧光定量PCR方法,特异性好、灵敏性强,为进一步研究小鼠CCL20的生物学功能提供了实验基础。; 陈艳红朱晨露魏衍财秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸许化溪王胜军; 关键词：SYBR 实时荧光定量PCR

全选清除导出

共1页<1>

江苏省自然科学基金(BK2011472)