国家自然科学基金(31070164) 作品数:11 被引量:85 H指数:6 相关作者: 张宗申 金朝霞 赵欣 熊海浪 王增利 更多>> 相关机构: 大连工业大学 华南农业大学 中央民族大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 大连市科技局优秀青年科技人才基金 中国博士后科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
氮源和磷源对金铁锁毛状根悬浮培养的影响 被引量:9 2013年 以生物量和总皂苷两个参数为指标,研究了氮源(NH+4,NO-3)与磷源(PO3-4)浓度对金铁锁毛状根悬浮培养过程中的影响。培养基中NH+4与NO-3的浓度比为1∶2时,毛状根生物量和总皂苷的收获量都达到最高值,PO3-4的浓度在6.25mmol/L时具有同样的效果;毛状根对培养液中NO-3和PO3-4吸收利用与其生长周期基本一致,它们的含量在20d左右下降到最低;综合考虑,氮源和磷源的最佳组合为NH+410mmol/L,NO-320mmol/L,PO3-46.25mmol/L。 刘军 陈显化 金朝霞 王冰 张宗申关键词:金铁锁 毛状根 次级代谢 光强对悬浮培养下铁皮石斛原球茎生长的影响 被引量:11 2014年 以长势均一、色泽深绿的铁皮石斛原球茎为试验材料,分别在1 000lx、2 000lx和3 000lx的光强下进行12h/d的光照培养,每隔7d测定其鲜质量、多糖含量、叶绿素含量及叶绿素a/b,研究光强对悬浮培养下铁皮石斛原球茎生长的影响。结果表明,2 000lx光强完全满足液体条件下铁皮石斛原球茎生长的要求,鲜质量和多糖(23.4%)的积累最高,同时叶绿素含量也最大,光强较低时,其叶绿素a/b值也较低,这与自然生境下铁皮石斛的相关参数一致。表明提供一定光强和光周期,采取悬浮方式规模化培养铁皮石斛原球茎是可行的。 杨小兵 王增利 史昊 张宗申 金朝霞关键词:铁皮石斛 原球茎 光照 叶绿素 滇重楼种子萌发及组织培养研究 被引量:25 2011年 研究了滇重楼种子休眠的解除方法以及外植体处理、培养条件对其幼苗生长发育的影响。结果表明,滇重楼种子在连续经过4℃低温层积4—5个月、红外光照射30min、二次变温(4℃-40℃-20%)处理、混合液(19mmol/L KNO3+800mg/L GA3)保湿7d后,休眠能得到明显解除,播种在营养钵(珍珠岩:蛭石=h1)中60d,萌发率可达40%;对胚根长至2cm的萌发种子进行HgCl2消毒的最合适时间是10min,既能控制污染率又不伤及胚芽的活性;在22℃、每天光照12h(1000lx)的条件下,去除胚乳的幼芽在附加0.5mg6-BA和0.5mgIAA的MS培养基上培养30d后即可长成具有单叶的完整植株。 熊海浪 易继财 张宗申关键词:滇重楼 种子 萌发 铁皮石斛原球茎悬浮培养及其多糖积累的研究 被引量:14 2012年 将利用铁皮石斛种子诱导的原球茎在液体条件下培养,研究植物激素和有机添加物对原球茎增殖以及多糖积累的影响。结果表明,在N6液体培养基中附加1.0mg/L NAA+1.0mg/LKT+5%香蕉汁提取物+5%土豆汁提取物,最有利于铁皮石斛原球茎增殖和多糖积累,培养30d时,原球茎鲜质量达到122.9g/L,多糖含量在25d时达到24.2%。结果提示,利用液体培养规模化生产铁皮石斛原球茎是可行的,是铁皮石斛大田传统栽培方式的重要替代途径。 王增利 史昊 张宗申关键词:铁皮石斛 原球茎 多糖含量 东北矮紫杉细胞悬浮培养中褐化问题的研究 被引量:5 2012年 [目的]研究东北矮紫杉悬浮培养细胞褐化现象,为紫衫细胞悬浮培养提供指导方法。[方法]以东北矮紫杉愈伤组织为试验材料,探讨不同培养基、N/P比、pH、培养转速、光照及强度等因素对矮紫杉细胞悬浮培养褐化的影响。[结果]将无褐化的愈伤组织转接到pH 7.0的2mB5培养基中,于22℃、1 500 lx光强、90 r/min转速的条件下光照培养24 h,细胞褐化现象能得到明显抑制。[结论]该研究结果为紫衫细胞悬浮培养奠定了基础,对于大规模工业化生产紫杉醇具有重要意义。 王培忠 赵欣 张宗申关键词:褐化 愈伤组织 悬浮细胞培养 Study on the Browning in Cell Suspension Culture of Taxus cuspidata 被引量:1 2012年 [Objective] This study aimed to investigate the browning of T. cuspidata cells in suspension culture and provide the guidance for the cell suspension culture of T. cuspidata. [Method] T. cuspidata callus was used as experimental materials, to explore the effect of different medium, N/P ratio, pH, shaking speed, illumination time and light intensity and other factors on browning of T. cuspidata cells in suspension culture. [Result] Non-browning callus was transferred to 2MB5 medium (pH 7.0) for illumination culture at 22℃ under light intensity of 1 500 lx with shaking speed of 90 r/min for 24 h. Results showed that the cell browning was significantly inhibited. [Conclusion] This study laid the foundation for cell suspension culture of T. cuspidata and had important significance to the large-scale industrial production of paclitaxel. 王培忠 赵欣 张宗申关键词:BROWNING CALLUS 影响濒危药用植物滇重楼愈伤组织发生的因素 被引量:8 2012年 目的研究影响重楼愈伤组织发生的关键因素。方法以重楼的根状茎、侧根、茎、叶、种胚等为材料,在添加不同配比的激素组合的MS培养基中培养。结果在上述5种材料中,只有种胚在胚乳看护培养的条件下才能诱导出愈伤组织;IAA诱导重楼愈伤组织的作用最大,而6-BA对重楼愈伤组织分化的调节作用较好;MS+2 mg.L-1IAA+0.02 mg.L-16-BA是诱导愈伤组织的最佳培养基,诱导率达到53.3%。结论合适的外植体和激素组合是诱导重楼愈伤组织的关键因素。 熊海浪 于振艳 张宗申 刘同祥 叶乾堂关键词:重楼 愈伤组织 药用植物 海参溶菌酶枯草芽孢杆菌基因工程菌构建 2014年 通过基因重组等技术构建重组海参溶菌酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌,并对此基因工程菌进行生长曲线的测定和稳定性分析。结果表明,海参溶菌酶基因特异引物在400 bp处扩增出特异性条带,与预期的海参溶菌酶基因大小一致;重组表达质粒pHT43-SjLys经双酶切验证得8 000 bp和400 bp左右的片段;重组海参溶菌酶的枯草芽孢杆菌基因工程菌与原始菌株WB600相比生长趋势基本一致,外源基因的插入对菌体的生理代谢未造成太大影响;在无选择压力的条件下,重组质粒的稳定性良好,连续传5次后的遗传稳定性为94%,并且提取质粒和双酶切验证后发现工程菌没有发现重排或丢失现象。表明重组海参溶菌酶基因工程菌pHT43-SjLys/WB600构建成功。 孙璐 刘志文 邹丹 李丹 潘博 丛丽娜关键词:基因重组 枯草芽孢杆菌 基因工程菌 草酸对金铁锁悬浮细胞的生理影响 被引量:3 2014年 以金铁锁悬浮细胞为材料,主要研究了草酸对植物细胞的生理影响。金铁锁悬浮细胞木质化程度随着草酸浓度的增加而增大,0.5mmol/L时木质化程度达到最大;选用草酸浓度0.5mmol/L处理,木质化程度随着处理时间的延长而逐渐增强,24h后木质化速度减缓。过氧化物酶(POD)活性随草酸处理浓度的增加而增大,处理浓度达到0.5 mmol/L左右达到最大值,而后活性逐渐减小;在0.5mmol/L草酸处理后,POD活性随处理时间的延长而逐渐增强,16h达到最大值,然后逐渐减弱。钙离子螯合剂(EGTA)、钾离子通道抑制剂(TEA)及氯离子通道抑制剂(SITS)处理对草酸激活的POD活性具有明显的抑制作用。草酸引起的金铁锁细胞壁木质化和POD活性有一定关系,并且草酸诱导的POD活性可能受质膜上离子通道的影响。 张健 金朝霞 顾孟阳 张宗申关键词:草酸 木质素 过氧化物酶 适合膜片钳电流测定的金铁锁原生质体制备技术 被引量:1 2012年 以金铁锁愈伤组织为材料,利用传统酶解法和快速酶解法,对金铁锁原生质体的制备分离技术进行比较和研究,记录全细胞电流,获得高质量的原生质体材料。结果表明,采用传统酶解法,2%纤维素酶R-10+1%果胶酶Y-23的混合酶液酶解7h,可以获得大量原生质体;采用快速酶解法,1.2%纤维素酶RS+0.5%果胶酶Y-23的混合酶液酶解15min,然后分别加入300μL、1mL基本介质稀释后,在400mmol/kg渗透压下可以获得高质量的原生质体。全细胞电流测定表明,快速酶解法制得的原生质体更适于作为膜片钳实验的材料。 赵欣 李岩 王丽爽 张宗申关键词:金铁锁 原生质体 膜片钳