环境化学与生态毒理学国家重点实验室开放基金(KF2008-17)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：程卫东赵春燕刘婷婷苏刚卫东锋更多>>
- 相关机构：兰州大学北京师范大学更多>>
- 发文基金：环境化学与生态毒理学国家重点实验室开放基金甘肃省国际合作计划甘肃省中青年科技研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 墓头回提取物作用白血病K562细胞蛋白双向电泳方法的建立被引量：2
- 2011年
- 目的建立适用于体外培养的K562细胞总蛋白的双向电泳图谱,提高电泳分辨率和重复性,以进一步了解中药墓头回作用于白血病细胞的新机制。方法采用标准裂解法提取K562细胞总蛋白,后续进行丙酮沉淀和三氯乙酸/丙酮沉淀,分别比较一步裂解法所得蛋白和丙酮沉淀法、三氯乙酸/丙酮沉淀法所得蛋白的双向电泳图谱,优选最佳的样品制备方法。此外在等电聚焦时,聚焦电压在传统聚焦条件上进行优化。结果 丙酮沉淀法不仅能减少蛋白降解,而且增加蛋白的溶解性,因此丙酮沉淀法所得蛋白的双向电泳图谱显示出更好的溶解性和重复性,在聚焦条件上对传统聚焦条件的优化使横向和纵向拖尾有明显改善,所得图谱蛋白点更清晰,分离更完全,能获得分辨率较高的双向电泳图谱。结论 在标准裂解液提取蛋白基础上结合丙酮沉淀法更适于制备K562细胞的双向电泳样品,等电聚焦(IEF)电泳时适当延长除盐时间能更有效的分离K562细胞全蛋白,而且后续实验证明此方法同样成功建立了墓头回作用白血病K562细胞蛋白和肿瘤组织蛋白2-DE图谱。
- 刘婷婷卫东锋赵春燕苏刚吴剑华卢艳曹慧明程卫东
- 关键词：K562细胞双向电泳墓头回
- 异叶败酱提取物对白血病K562细胞作用的蛋白质组学研究被引量：1
- 2012年
- 目的研究异叶败酱提取物作用于人白血病K562细胞的分子机制。方法以异叶败酱提取物作用于K562细胞后提取细胞总蛋白,用双向电泳对蛋白进行分离,对异叶败酱提取物处理前后的K562细胞总蛋白双向电泳图谱进行差异分析,通过质谱技术鉴定差异明显的蛋白质。结果通过对比分析异叶败酱提取物处理前后的白血病K562细胞总蛋白双向电泳图谱,发现异叶败酱提取物处理组中有23个蛋白点发生了明显改变。经质谱和Mascot软件分析,成功鉴定了3个蛋白质,分别为热休克蛋白90β,甘油醛-3-磷酸脱氢酶,血红蛋白。结论通过蛋白质组学技术,发现了异叶败酱提取物处理前后白血病K562细胞差异明显的蛋白质点23个,这些差异蛋白质可能是异叶败酱提取物对白血病K562细胞产生增殖抑制、凋亡诱导和诱导分化作用的关键蛋白质。
- 卫东锋赵春燕程卫东刘婷婷胡燕苏刚
- 关键词：异叶败酱K562细胞蛋白质组学凋亡诱导
