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国家自然科学基金(30901650)

作品数：5 被引量：16H指数：2
相关作者：刘琼于健汤明芳张兰兰白浪更多>>
相关机构：南方医科大学南方医院中山大学更多>>
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相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 5篇中文期刊文章

领域

  • 5篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇细胞
  • 3篇基因
  • 3篇巩膜
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光蛋白
  • 2篇重组腺相关病...
  • 2篇转染
  • 2篇豚鼠巩膜成纤...
  • 2篇纤维细胞
  • 2篇腺相关病毒
  • 2篇绿色荧光
  • 2篇绿色荧光蛋白
  • 2篇介导
  • 2篇近视
  • 2篇角膜
  • 2篇巩膜成纤维细...
  • 2篇病毒介导
  • 2篇成纤维细胞
  • 1篇新生血管

机构

  • 5篇南方医科大学...
  • 1篇中山大学

作者

  • 5篇于健
  • 5篇刘琼
  • 3篇汤明芳
  • 2篇张兰兰
  • 2篇白浪
  • 1篇曾骏文
  • 1篇谭青
  • 1篇吴炳义
  • 1篇唐晓娟
  • 1篇胡小娜
  • 1篇徐静

传媒

  • 3篇眼科新进展
  • 2篇国际眼科杂志

年份

  • 1篇2016
  • 3篇2011
  • 1篇2009
共 5 条 记 录，以下是 1-5
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排序方式：
8型重组腺相关病毒介导绿色荧光蛋白基因在角膜基质细胞中的表达及影响被引量：1
2011年
目的:评价8型重组腺相关病毒(rAAV8)介导增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)转染角膜基质细胞后的表达及对细胞增殖的影响。方法:以不同MOI的rAAV8-EGFP转染大鼠角膜基质细胞,转染后以倒置荧光显微镜观察角膜基质细胞中GFP的表达,流式细胞仪分析角膜基质细胞中rAAV8-EGFP表达的阳性率。MTT法分别检测rAAV8和rAAV8-EGFP转染对角膜基质细胞增殖的影响。结果:倒置荧光显微镜观察rAAV8-EGFP转染角膜基质细胞后GFP的阳性表达7d达到高峰,此时流式细胞仪检测rAAV8-EGFP对角膜基质细胞的转染效率分别为31.5%(MOI=5×103),42.5%(MOI=5×104),54.8%(MOI=5×105);MTT检测结果显示rAAV8及rAAV8-EGFP转染对角膜基质细胞增殖均无明显影响。结论:rAAV8-EGFP能有效地转染角膜基质细胞,并且对细胞增殖无明显影响。
汤明芳于健白浪刘琼
关键词：重组腺相关病毒基因转染角膜基质细胞增殖
形觉剥夺性近视眼巩膜组织中M受体5种亚型表达的变化
2009年
目的探讨豚鼠形觉剥夺性近视眼中,巩膜组织中M受体5种亚型的表达变化。方法1～2周龄的三色豚鼠36只,随机分为形觉剥夺性近视眼组(FDM组,21眼)、自身对照组(FC组,21只21眼)和正常组(N组,15只30眼)。FDM组制作动物模型,21d后测量3组动物眼屈光度和眼轴长度。提取各组眼巩膜组织总RNA和蛋白质,半定量RT-PCR和Westernblotting检测M受体5种亚型的表达变化。结果形觉剥夺21d后,FDM组与FC组、N组的屈光度和眼轴之间的差异均有统计学意义(均为P<0.05)。FDM组产生相对近视(-4.28±1.70)D,眼轴相对增长(0.27±0.17)mm。半定量RT-PCR结果显示:后极部巩膜组织中,FDM组与FC组、N组相比较,M1和M4亚型的表达均有显著性增加(均为P<0.05),而M2、M3和M5亚型的表达差异均无统计学意义(均为P>0.05),其中FDM组中M1亚型的表达增加了18.67%,M4亚型增加了26.48%(均为P<0.01)。Westernblotting结果显示:后极部巩膜组织中,FDM组与FC组、N组相比较,M1和M4亚型蛋白表达均有显著增加(均为P<0.01),而M2、M3和M5亚型的表达差异均无统计学意义(均为P>0.05),其中FDM组中M1亚型蛋白表达增加了24.65%,M4亚型蛋白增加了49.11%(均为P<0.01)。结论在豚鼠形觉剥夺性近视的形成中,后极部巩膜组织的M1和M4受体的表达显著性增加,提示在近视眼发生和发展中,巩膜组织的M受体可能参与调控眼球的生长。
刘琼于健曾骏文
关键词：M受体巩膜形觉剥夺性近视
转化生长因子-β(TGF-β)影响豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的研究被引量：11
2016年
目的本研究探讨转化生长因子-β(transforming growth factor,TGF-β)体外刺激豚鼠巩膜成纤维细胞,观察豚鼠巩膜成纤维细胞增殖和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达。方法原代培养豚鼠巩膜成纤维细胞并鉴定,MTT法检测豚鼠巩膜成纤维细胞的增殖,培养液分别加入20 ng·m L-1TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3,分别于12 h、24 h、48 h、72 h,Real-time PCR检测α-SMA mRNA,Western-blotting和免疫荧光化学法检测其蛋白表达。结果与对照组相比,TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖,呈剂量依赖性(P<0.05),其中TGF-β1促进豚鼠巩膜成纤维细胞增殖作用最强(P<0.05);TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3均增加α-SMA的表达(均为P<0.001),TGF-β3促进α-SMA表达作用最强(P<0.001)。结论 TGF-β通过调控细胞外基质合成参与调控巩膜组织重塑。
张兰兰刘琼于健唐晓娟徐静
关键词：转化生长因子-ΒΑ-平滑肌肌动蛋白近视
慢病毒介导绿色荧光蛋白基因转染豚鼠巩膜成纤维细胞的实验研究被引量：3
2011年
目的观察慢病毒载体转染豚鼠巩膜成纤维细胞的有效性及对细胞活性的影响。方法转染组用慢病毒携带绿色荧光蛋白(lentiviral mediated green fluorescent protein,Lenti-GFP)转染豚鼠巩膜成纤维细胞,对照组加入空白培养液,转染组按最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50、100、200、400加入Lenti-GFP,转染2d、3d、4d、5d、6d和7d后,在倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测病毒对细胞增殖的影响。结果 Lenti-GFP转染细胞后48h可以看见绿色荧光;在同一MOI值下,随时间延长转染效率增高,第5天达到高峰;在MOI为400,转染5d时转染效率达82.86%;转染5d行MTT检测显示:MOI为50～400时,同一转染时间各组IOD值与对照组比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论慢病毒载体可以在体外稳定而有效地转染豚鼠巩膜成纤维细胞,且不影响细胞活性,是巩膜成纤维细胞理想的基因转染载体。
张兰兰于健吴炳义刘琼汤明芳谭青胡小娜
关键词：慢病毒载体绿色荧光蛋白巩膜成纤维细胞基因转染
腺相关病毒转内皮抑素基因抑制大鼠角膜新生血管的研究被引量：2
2011年
目的:探讨以重组腺相关病毒(rAAV)介导内皮抑素(ES)基因转移对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的抑制作用。方法:选取SPF级SD大鼠60只,角膜缝线法制作CNV模型,随机分为A,B,C和D共4组。A组:缝线后立即于上方近角膜缘处结膜下注射50μL rAAV-ES转染液;B组:缝线后刮除角膜上皮,用rAAV-ES转染液浸泡角膜10min;C组:缝线后用rAAV-ES转染液浸泡去上皮角膜10min后,同样部位结膜下注射50μL rAAV-ES转染液;D组:对照组,同样部位结膜下注射50μL生理盐水。在裂隙灯显微镜下观察各组CNV的生长情况,并计算其面积;免疫组织化学法观察ES基因表达情况;病理切片检测CNV密度;观察ES基因转移对CNV的抑制作用。结果:裂隙灯显微镜下观察各组大鼠缝线后CNV逐渐生长,14d达高峰,其后逐渐减少;21d后变性。定量数据重复测量的方差分析显示:时间因素与治疗因素之间存在交互效应(F=175.810,P<0.01)。缝线诱导后不同转染组间CNV面积亦有显著性差异(F=2243.816,P<0.01);其中以D组CNV面积最大;C组CNV面积最小。不同时间段CNV生长面积之间差异显著(F=1060.854,P<0.01);对CNV增生的抑制率随着转染时间的延长而增加,C组在缝线后28d,对CNV增殖的抑制率高达到58.25%。免疫组织化学检测显示:A组于上方角膜缘结膜和角膜上皮中可见ES染色阳性;B组在浅基质CNV的内皮细胞中发现少量ES染色阳性;C组角膜上皮及浅基质CNV的内皮细胞中可见较为明显的ES染色阳性;D组角膜细胞均为ES染色阴性。角膜切片结果显示:CNV密度在各转染组均比对照组稀疏。结论:rAAV-ES转基因可明显抑制缝线诱导的大鼠CNV的增生。采用单独结膜下注射rAAV-ES转染液或转染液局部浸泡去上皮角膜的转染途径均能抑制缝线诱导的CNV增生,联合转染途径对缝线诱导CNV增生的抑制效果更好。
汤明芳于健白浪刘琼
关键词：内皮抑素重组腺相关病毒角膜新生血管
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