国家自然科学基金(39770352)
- 作品数：11 被引量：22H指数：3
- 相关作者：周智广蒋铁建苏恒牛晓红王晓希更多>>
- 相关机构：中南大学湘雅二医院中南大学长治医学院附属和济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省中青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 完全弗氏佐剂恢复NOD鼠胸腺细胞对凋亡信号地塞米松的敏感性
- 2002年
- 王晓希周智广蒋铁建苏恒牛晓红
- 关键词：完全弗氏佐剂NOD凋亡信号地塞米松敏感性
- 脂质体与完全弗氏佐剂预防NOD鼠胰岛炎探讨被引量：4
- 2002年
- 目的 :探讨完全弗氏佐剂 (CFA)、不完全弗氏佐剂 (IFA)、大复层脂质体 (LML)、小单层阳离子脂质体(DOTAP)对NOD鼠胰岛炎和糖尿病发病的影响。方法 :①将 3周龄的NOD雌鼠随机分为 3组 ,分别给予CFA后脚板注射 (n =16 ) ,IFA和PBS乳化后腹腔注射 (n =16 ) ,单独PBS后脚板注射 (n =16 )。观察 12周龄胰岛病理及 30周龄糖尿病发病情况。②将 3周龄的NOD雌鼠随机分为 3组 ,分别给予大复层脂质体 (LML) (n =13) ,小单层阳离子脂质体 (DOTAP) (n =13) ,单独PBS腹腔注射 (n =13) ,同上观察胰岛病理及糖尿病发病情况。结果 :①CFA后脚板注射能明显降低胰岛炎计分 ,减少糖尿病的发生。 30周龄时 ,CFA组的发病率明显低于PBS后脚板注射对照组 (分别为9 2 %和 81 8% ,P =0 .0 0 1)。 12周龄时 ,CFA组胰岛炎计分明显低于对照组 [分别为 (0 0 5± 0 0 2 )和 (0 5 4± 0 11) ,P<0 .0 0 1]。②LML腹腔注射能明显降低胰岛炎计分。 12周龄时 ,LML组胰岛炎计分明显低于PBS腹腔注射对照组 [分别为 (0 16± 0 0 2 )和 (0 5 8± 0 0 6 ) ,P <0 .0 0 1]。 30周龄时 ,LML组糖尿病发生率为 6 0 % ,对照组为 90 % ,两组间无统计学差异。③在预防胰岛炎的作用上 ,CFA优于LML。结论 :CFA后脚板注射可预防NOD鼠发生糖尿病并减?
- 苏恒蒋铁建周智广
- 关键词：脂质体胰岛炎NOD鼠
- 胰岛素预防NOD鼠糖尿病的机制研究
- 2007年
- 目的观察胰岛素(Ins)对非肥胖糖尿病(NOD)小鼠胰岛炎和糖尿病的影响,并探讨其诱导免疫耐受的机制。方法60只NOD雌鼠随机分为胰岛素(NPH)处理组和PBS对照组,分别于第4、12、20、28周予皮下注射NPH6U(60μl)及PBS60μl+不完全弗氏佐剂60μl。于12周龄观察胰岛炎和胰岛β细胞凋亡;测定血清和脾细胞上清IL-4和干扰素(IFN)γ浓度;检测胰岛内和脾细胞IL-4、IFN-γ mRNA的表达;并行联合过继转移实验。结果Ins组糖尿病发病率和β细胞凋亡率比PBS组低。血清和脾细胞上清IL-4浓度及胰岛内和脾细胞IL-4 mRNA表达较PBS组高,而IFN-γ浓度及IFN-γ mRNA表达比PBS组低。过继转移实验Ins组DM发病率比PBS组低。结论Ins能诱导NOD鼠调节T细胞的产生,使全身和胰岛局部T细胞由Th1向Th2转型,抑制β细胞凋亡,从而预防DM。
- 蒋铁建周智广苏恒
- 关键词：小鼠糖尿病细胞因子
- NOD小鼠胰岛分离与纯化的方法研究被引量：7
- 2002年
- 目的 :研究非肥胖性糖尿病 (NOD)小鼠胰岛分离与纯化的方法。方法 :采用改良的胰导管逆行灌注胶原酶静止消化胰腺 ,分离成年NOD小鼠胰岛 ,不连续密度梯度Ficoll液 (2 5 % ,2 3% ,2 0 5 % ,11% )离心、纯化胰岛。用双硫棕 (Dithizone ,DTZ)对胰岛进行特异性染色 ,以葡萄糖刺激胰岛素释放检测胰岛功能。结果 :不同浓度 (0 5mg·ml-1,1mg·ml-1,2mg·ml-1)的胶原酶在不同时间 (2 0min ,4 0min ,6 0min)内静止消化胰腺后收获的胰岛数量和胰岛活性不同 ,采用 1mg·ml-1浓度的Ⅺ型胶原酶消化 4 0min后效果最好 ,平均能得到 (195± 8)个胰岛 /胰腺 ,活性 >90 % ,纯度 >90 %。DTZ染色后胰岛呈红色 ,形态完整。高糖刺激后胰岛素释放量为低糖刺激后的 2倍。结论 :改良的胰导管逆行灌注胶原酶静止消化NOD鼠胰腺 ,及不连续密度梯度Ficoll液纯化胰岛的方法 ,可获得数量较多 ,纯度较高和功能较好的胰岛。
- 蒋铁建苏恒周智广
- 关键词：胰岛纯化NOD小鼠糖尿病
- 皮下注射胰岛素抑制胰岛β细胞凋亡预防NOD鼠糖尿病被引量：2
- 2006年
- 目的:观察皮下注射胰岛素免疫干预对非肥胖糖尿病(non-obese diabetic,NOD)鼠胰岛炎、β细胞凋亡和糖尿病的影响,并探讨其诱导免疫耐受的机制。方法:60只NOD雌鼠随机分为胰岛素处理组(n=34)和磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)对照组(n=28),分别于4周、12周、20周、28周皮下注射中效胰岛素优泌林N(Humulin N)6U(60μL)+不完全弗氏佐剂(incomplete Freund’sadjuvant,IFA)60μL,对照组予PBS(60μL)+IFA(60μL)。于12周龄观察胰岛炎和胰岛β细胞凋亡;检测胰岛Fas和FasL的表达;测定血清IL-4和IFN-γ浓度,以及胰岛内I-Aβg7,IL-1β,IFN-γ,Fas,IL-4mRNA的表达水平。结果:NOD鼠皮下注射胰岛素加IFA组30周龄和52周龄时发病率仅为21.4%和28.6%,而皮下PBS加IFA组为71.4%和85.7%(P<0.05)。胰岛素组胰岛炎积分比对照组低,但差异无统计学意义(P>0.05)。胰岛素组胰岛Fas抗原表达和β细胞凋亡率均比PBS对照组低(均P<0.05)。胰岛素组胰岛内I-Aβg7,IFN-γ,IL-1β,FasmRNA表达较PBS对照组低(均P<0.05),而IL-4mRNA表达较对照组高(P<0.05);胰岛素组血清IL-4比PBS组高,IFN-γ比PBS组低(均P<0.05)。结论:皮下注射胰岛素能诱导NOD鼠的免疫耐受而预防糖尿病的发生,但不能阻断胰岛炎的进展。皮下注射胰岛素能诱导调节性T细胞产生,使全身和胰岛局部T细胞由Th1向Th2转型,从而抑制Fas介导的β细胞凋亡而预防糖尿病。
- 蒋铁建周智广苏恒
- 关键词：胰岛素免疫耐受1型糖尿病凋亡
- 完全弗氏佐剂抑制NOD鼠胰岛β细胞凋亡及其机制被引量：1
- 2006年
- 目的:探讨完全弗氏佐剂( complete Freund’s adjuvant, CFA)对非肥胖糖尿病( nonobese dia-betic, NOD)鼠胰岛β细胞凋亡及凋亡相关基因Fas,FasL和Bcl-x表达的影响。方法:将4周龄NOD雌鼠随机分为CFA组(n=5)和生理盐水( NS)对照组(n=5 ) ,给CFA组鼠后脚板注射50μLCFA,对照者鼠后脚板注射等量NS。监测血糖,若血糖连续2 d≥11.1 mmol /L即诊断为糖尿病。当NOD鼠发生糖尿病或至30周龄时,处死动物,取胰腺组织制成薄切片,HE染色观察胰岛炎,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记( TUNEL)及ABC免疫组织化学双标记染色观察并计数凋亡的胰岛β细胞,ABC免疫组织化学法染色观察并记数Fas,FasL和Bcl-x表达阳性细胞。结果:至NOD鼠30周龄时,CFA处理组鼠无1只发生糖尿病,对照组鼠有3只发生糖尿病;CFA处理组的胰岛炎积分低于NS对照组(1.820±0.962 vs. 3.020±1.040,P<0.05 ) ;CFA处理组胰岛β细胞凋亡率、Fas阳性细胞率、FasL阳性细胞率均低于NS对照组[ (10.2±2.8) % vs. (15.9±6.5) %,(54.9±14.5)% vs.(75.7±12.9) %,(20.3±10.4) % vs. (27.9±12.0) %,P<0.05] ,Bcl-x阳性细胞率高于NS对照组[ (74.9±10.7) % vs. (66.0±18.3) %,P<0.05]。结论:CFA能够减轻NOD鼠胰岛β细胞凋亡,其机制与减少促凋亡基因Fas和FasL表达及增加抑制凋亡基因Bcl-x表达有关。
- 朱琳周智广杨文杨竹林张松
- 关键词：完全弗氏佐剂NOD鼠FAS抗原BCL-X凋亡胰岛炎
- NOD小鼠胰岛β细胞凋亡及完全弗氏佐剂的预防效应被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨NOD小鼠胰岛 β细胞凋亡的规律及完全弗氏佐剂 (CFA)在预防胰岛炎和糖尿病中的作用。方法 计数 12天龄、6周龄、12周龄未处理的NOD雌鼠胰岛 β细胞的凋亡。将 3周龄NOD雌鼠随机分入CFA组、PBS对照组 ,分别给予后足板一次性注射CFA 5 0 μl、PBS 5 0 μl,于 6周龄、12周龄、30周龄时 ,观察胰岛 β细胞凋亡率 ,胰岛炎程度和糖尿病发病率。 结果 未处理组 12天龄胰岛 β细胞凋亡率分别高于 6周龄、12周龄 (P <0 .0 1)。 6周、12周时CFA组胰岛炎积分 ,β细胞凋亡率均明显低于同期PBS组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1) ,6周龄、12周龄胰岛炎积分与 β细胞凋亡率存在正相关 (r =0 .5 9,P <0 .0 1)。到 30周龄时 ,CFA组糖尿病发病率 (9.1% )较PBS组 (81.8% )明显降低 (P=0 .0 0 1)。结论 早期给予NOD鼠CFA可明显减轻胰岛炎和预防糖尿病的发生 ,其机制与抑制 β细胞凋亡有关。
- 牛晓红周智广王晓希苏恒蒋铁建
- 关键词：近交NOD胰岛炎I型糖尿病
- 完全弗氏佐剂诱导胸腺细胞凋亡对NOD鼠1型糖尿病发生的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)诱导胸腺细胞凋亡对NOD鼠1型糖尿病的预防作用。方法42只3周龄NOD雌鼠随机均分为CFA组和PBS组(n=21),分别给予NOD鼠后足板一次性注射CFA50μl、磷酸盐缓冲液(PBS)50μl,于6、12周(各取5只小鼠)及30周(11只小鼠)时观察胰岛β细胞凋亡、胸腺细胞凋亡、胰岛炎程度和糖尿病发病率。结果与PBS组相比,6周、12周时CFA组胰岛炎积分明显降低(P<0.01),胰岛β细胞凋亡率明显减少(P<0.01),而经地塞米松诱导可见更多的胸腺细胞凋亡(P<0.01)。6周、12周时胰岛炎积分与β细胞凋亡率呈正相关(r=0.511,P<0.05),与胸腺淋巴细胞凋亡率呈负相关(r=-0.549,P<0.05);β细胞凋亡率与胸腺淋巴细胞凋亡率呈负相关(r=-0.614,P<0.01)。30周时,CFA组糖尿病发病率为9.1%(1/11),而PBS组糖尿病发病率为81.8%(9/11),两组间差异具有统计学意义(P=0.001)。结论CFA可通过调节胸腺细胞凋亡,导致胰岛β细胞凋亡的减少,可能是减轻NOD鼠胰岛炎并预防1型糖尿病的机制之一。
- 牛晓红王晓希蒋铁建周智广
- 关键词：细胞凋亡
- 完全弗氏佐剂诱导脾脏T淋巴细胞凋亡预防非肥胖性糖尿病鼠1型糖尿病被引量：1
- 2002年
- 为探讨脾脏T淋巴细胞凋亡在完全弗氏佐剂 (CFA)预防非肥胖性糖尿病 (NOD)鼠糖尿病中的作用 ,4 2只NOD雌鼠随机分成CFA组 (2 1只 )和磷酸盐缓冲盐水 (PBS)组 (2 1只 ) ,3周龄时于鼠后脚板注射CFA 5 0 μl 只和PBS5 0 μl 只。按不同的观察时间分 6周、12周和 30周 3个观察组。采用TUNEL末端标记法和免疫组织化学方法观察脾脏T淋巴细胞凋亡情况。结果显示 :CFA诱导脾脏成熟的CD4 + T淋巴细胞凋亡 ,但不能诱导成熟的CD8+ T淋巴细胞凋亡 ;CFA能预防NOD鼠糖尿病的发生。提示CFA可通过诱导脾脏T淋巴细胞凋亡 ,以减少外周的CD4 + T淋巴细胞 ,达到预防NOD鼠
- 王晓希牛晓红周智广苏恒蒋铁建
- 关键词：完全弗氏佐剂脾脏T淋巴细胞1型糖尿病细胞凋亡动物疾病模型
- 完全弗氏佐剂预防非肥胖糖尿病鼠胰岛炎和糖尿病的效应被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨完全弗氏佐剂 (CFA)在预防非肥胖糖尿病 (NOD)鼠胰岛炎和糖尿病机制中的作用。方法 将 3周龄NOD雌鼠随机分入CFA组、磷酸盐缓冲液 (PBS)对照组 ,分别给予后足板一次性注射CFA 5 0 μl、PBS 5 0 μl,于 6周龄、12周龄、30周龄时观察胰岛 β细胞凋亡、胰岛炎程度和糖尿病发病率。结果 6周、12周时CFA组胰岛炎积分、β细胞凋亡率均明显低于同期PBS组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,6周龄、12周龄胰岛炎积分与 β细胞凋亡率存在正相关。到 30周龄时 ,CFA组 11只鼠只有 1只发生糖尿病 (1/11) ,明显低于PBS组 [11只中有 9只 (9/11) ],P =0 0 0 1。结论 早期给予NOD鼠CFA可明显减轻其胰岛炎和糖尿病的发生 ,其机制与抑制 β细胞凋亡有关。目的 探讨完全弗氏佐剂 (CFA)在预防非肥胖糖尿病 (NOD)鼠胰岛炎和糖尿病机制中的作用。方法 将 3周龄NOD雌鼠随机分入CFA组、磷酸盐缓冲液 (PBS)对照组 ,分别给予后足板一次性注射CFA 5 0 μl、PBS 5 0 μl,于 6周龄、12周龄、30周龄时观察胰岛 β细胞凋亡、胰岛炎程度和糖尿病发病率。结果 6周、12周时CFA组胰岛炎积分、β细胞凋亡率均明显低于同期PBS组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,6周龄、12周龄胰岛炎积分与 β细胞凋亡率存在正相关。到 30周龄时 ,CFA组 11?
- 牛晓红周智广蒋铁建苏恒
- 关键词：非肥胖糖尿病胰岛炎糖尿病动物实验胰岛Β细胞
