广东省自然科学基金(9151009504000008)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 人肥大细胞类糜蛋白酶分泌型真核表达载体的构建被引量：1
- 2010年
- 目的构建人肥大细胞类糜蛋白酶(MC-Chy)分泌型真核表达载体。方法以MC-Chy基因的质粒pDEST17/CMA为模板,通过PCR扩增出融合有免疫球蛋白κ链信号肽的人MC-Chy基因,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1,通过PCR、酶切和DNA测序鉴定。结果 PCR扩增出免疫球蛋白κ链融合人MC-Chy基因,DNA序列测定结果显示目的基因片段正确插入真核表达载体pcDNA3.1。结论成功构建了人MC-Chy分泌型真核表达载体,为下一步重组类糜蛋白酶的制备及其功能的深入研究奠定了基础。
- 唐晓磊何素辉梁晓东陈章权
- 关键词：肥大细胞类糜蛋白酶真核表达
- 人肥大细胞羧肽酶真核表达重组质粒DNA的免疫原性观察
- 2011年
- 目的观察人肥大细胞羧肽酶(hMC-CP)真核表达重组质粒DNA的免疫原性。方法以分泌性和非分泌性hMC-CP真核表达重组质粒(pcDNA3.1/S-CP,pcDNA3.1/CP)DNA为免疫原,分别以皮下及肌肉两种途径免疫BALB/c小鼠,间隔免疫时间2周,共免疫3次;末次免疫后第7天,采用ELISA法检测血清中特异性抗体的产生。结果以pcDNA3.1/S-CP、pcDNA3.1/CP DNA免疫小鼠后,都能诱导产生抗hMC-CP抗体,而pcDNA3.1空载体和NS则不能。通过肌注途径,以pcDNA3.1/S-CP免疫小鼠所得血清抗体效价均值为1∶6 400,以pcDNA3.1/CP免疫小鼠所得血清抗体效价均值为1∶3 200,两者比较,P>0.05;通过皮下注射途径,以pcDNA3.1/S-CP、pcDNA3.1/CP DNA免疫小鼠所得的免疫血清抗体效价均值均为1∶3 200,两者比较,P>0.05;而同一载体肌肉与皮下免疫,所得血清抗体效价比较,P>0.05。结论 hMC-CP真核表达重组质粒DNA具有较好的免疫原性,表达质粒是否为分泌性表达不影响其免疫原性,其免疫原性也不受质粒DNA注射途径的影响。
- 侯玉涛邝珠芳柯庆喜陈章权
- 关键词：真核表达质粒
