国家自然科学基金(30901664)
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
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- 加热联合紫杉醇对人喉癌细胞Hep-2体外增殖抑制及凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨加热(hyperthermia,HT)联合紫杉醇(Taxol)对人喉癌细胞系(Hep-2细胞)体外增殖抑制及凋亡的影响。方法将Hep-2细胞分为实验组与对照组,实验组用不同浓度(0.1、1.0及10.0μmol/L)的Taxol预处理后联合热疗(39、41及43℃1 h)处理不同时间(24、48及72 h)后,采用Wright-Gimsa染色法观察Hep-2细胞凋亡的形态学变化;以四甲基偶氮唑盐(MTT)还原试验检测细胞活力,以细胞增殖率作为细胞损伤指标,流式细胞术检测细胞凋亡发生率。结果加热41℃组细胞增殖率与其他不同温度同剂量组比较均显著降低(P<0.01);39℃组与对照组37℃组比较差异无统计学意义(P>0.05);热疗联合Taxol组处理细胞48 h后,细胞出现凋亡形态学改变。与热疗和Taxol单药组相比,热疗联合Taxol组对细胞的抑制率显著增强(P<0.01),其作用呈时间和剂量依赖性;热疗联合Taxol组诱导细胞凋亡率与单药组及单热疗组相比较均增高(P<0.05);而单药紫杉醇组与单独热疗组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论热疗和Taxol单药体外均可抑制Hep-2细胞增殖并诱导其调亡。热疗和Taxol联合应用对Hep-2细胞体外增殖抑制其诱导凋亡作用显著增强;诱导凋亡可能是细胞增殖抑制的作用机制之一。
- 王承龙张帅黄东海田勇泉赵素萍
- 关键词：热疗紫杉醇凋亡化疗敏感性
- EphA2调控头颈部鳞状细胞癌血管新生及转移的体内实验被引量：3
- 2012年
- 目的 研究EphA2对头颈部鳞状细胞癌（简称鳞癌）血管新生及颈淋巴转移的影响.方法 利用慢病毒介导的短发夹RNA（ short hairpin RNA,shRNA）沉默EphA2在高转移性头颈鳞癌细胞株M2中的表达,嘌呤霉素筛选稳定克隆,反转录PCR及Western blot技术检测EphA2沉默效果；构建头颈鳞癌高转移动物模型,通过HE染色验证其成瘤及颈淋巴转移情况；免疫组织化学技术检测移植瘤微血管密度,Western blot技术检测移植瘤标本中EphA2及血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况.结果 筛选出EphA2基因稳定沉默的M2细胞（定义为M2 EphA2 RNA＋即实验组）,并成功构建头颈鳞癌高转移动物模型,成瘤率达100％.25 d后,实验组移植瘤体积为（430.7±190.0） mm3（x±s,以下同）较对照组的（1179.0 ±289.4） mm3明显减少（t =5.597,P＜0.01）,质量显著减轻（t=-4.560,P＜0.05）,且双侧颈淋巴转移率明显降低（Mann-Whitney U=10.0,P＜0.05）.Western blot 显示实验组移植瘤组织中EphA2及VEGF蛋白表达显著下调,免疫组织化学技术发现实验组瘤体微血管密度为（4.74±0.67）个/视野,显著少于对照组的（14.17±0.59）个/视野（t=26.751,P＜0.01）.结论 EphA2沉默能抑制头颈部鳞癌细胞的生长及转移,并能明显减少头颈部鳞癌组织内的肿瘤新生血管,且该肿瘤新生血管的抑制可能与促血管生成因子VEGF的减少有关.
- 刘勇张欣余长云邱元正黄东海周小娟谭平清肖健云田勇泉
- 关键词：头颈部肿瘤鳞状细胞EPHA2新生血管化病理性
- 高迁移率族蛋白1在喉鳞状细胞癌中的表达及其临床意义被引量：4
- 2012年
- 目的检测高迁移率族蛋白1（HMGBl）在喉鳞状细胞癌（简称喉鳞癌）组织中的表达，并探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系。方法采用免疫组织化学技术检测HMGBl蛋白在93例喉鳞癌和15例癌旁黏膜组织中的表达，并分析其表达水平与临床病理特征和预后的关系。结果HMGBl蛋白在喉鳞癌组织中的阳性率（87．1％）显著高于癌旁黏膜中的阳性率（46．7％，P=0．001），且其表达水平与喉鳞癌的T分期（X^2=10．878，P=0．004）、临床分期（X^2=21．115，P〈0．01）、转移（X2=28．298，P〈0．01）及复发（X^2=14．923，P=0．001）密切相关。Kaplan-Meier生存分析显示，HMGBl高表达组、中表达组和低表达组患者的5年无瘤生存率分别为27．8％、43．9％和91．7％，5年总生存率分别为38．9％、68．3％和91．7％，差异均有统计学意义（X^2=13．815，P=0．001；X2=11．912，P=0．003）。单因素及多因素Cox比例风险回归模型分析显示，HMGBI蛋白表达水平和淋巴结转移情况为喉鳞癌患者预后的独立影响因素。结论HMGBl蛋白在喉鳞癌组织中表达显著升高，且其高表达与喉鳞癌患者的预后密切相关。HMGBl可能在喉鳞癌的发生、发展中有重要作用．有可能成为评估喉鳞癌患者预后的重要分子标志物。
- 刘勇谢丛良邱元正田勇泉张欣黄东海周小娟谭平清余长云柒琳李波肖健云
- 关键词：喉肿瘤肿瘤鳞状细胞HMGB1蛋白肿瘤转移
- EGCG调控TGF—β1诱导头颈鳞状细胞癌细胞上皮一间质转化的实验研究被引量：3
- 2012年
- 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（epigallocaechin-3-gallate，EGCG）对重组人转化生成因子p1（transforming growth factor—β1，TGF-β1）蛋白诱导的头颈鳞癌细胞上皮一问质转化的影响及其分子机制。方法5ng／mlTGF—β1作用于头颈鳞癌Tu686细胞24h后，再加入浓度为20μmo／L的EGCG处理24h，观察其上皮一间质转化的形态学改变；5ng／mlTGF-β1作用24h后，加入不同浓度（0、10、20、30μmol／L）EGCG作用24h，反转录聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot检测上皮细胞标志物钙黏蛋白（E—cadhefin）、间质细胞标志物波形蛋白（Vimentin）及TGF-β1信号通路抑制性蛋白Smad7的表达；20μmol／LEGCG作用于5ng／mlTGF—β1处理过的Tu686细胞，于不同的时间点（6、12、24h）收集细胞，检测E—cadherin及Vimentin的表达。结果TGF-β1能诱导头颈鳞癌Tu686细胞发生上皮一间质转化形态学及分子水平改变，E—cadherin表达下调、Vimentin的表达增强，TGF-β1信号通路抑制性蛋白Smad7表达下调；EGCG能有效抑制TGF-β1诱导的上皮一问质转化过程，能促进E-cadherin表达上调、Vimentin表达下降及Smad7表达升高。结论EGCG能有效抑制TGF-β1诱导的头颈鳞癌Tu686细胞发生的上皮一间质转化过程，且该抑制作用可能与TGF-β1信号通路中抑制性因子Smad7的表达升高有关。
- 皮雷鸣刘勇余长云蔡耿明黄东海邱元正田勇泉张欣
- 关键词：鳞状细胞
- 促红细胞生成素产生肝细胞受体A2在喉鳞癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系被引量：6
- 2011年
- 目的检测促红细胞生成素产生肝细胞受体A2（EphA2）蛋白在喉鳞癌组织及细胞系中的表达，探讨其表达与喉鳞癌临床病理特征和预后之间的关系。方法采用Western blot技术，检测EphA2蛋白在喉鳞癌细胞株Hep-2及头颈部永生化上皮细胞株NP-69中的表达；采用免疫组织化学技术，检测EphA2蛋白在88例喉鳞癌及16例癌旁黏膜组织中的表达，并分析EphA2与临床病理特征和预后的关系。结果EphA2蛋白在Hep-2细胞株中的表达高于NP-69细胞株。EphA2蛋白在喉鳞癌组织及癌旁黏膜组织中的阳性表达率分别为80．7％和43．8％，差异有统计学意义（P〈0．001）。EphA2高表达与喉鳞癌的临床分期（P=0．005）、淋巴结转移（P=0．025）和复发（P=0．021）密切相关。Kaplan—Meier生存分析结果显示，EphA2高表达组与低表达组的5年无瘤生存率分别为33．3％和63．2％，5年生存率分别为46．7％和81．6％，差异有统计学意义（P=0．003，P=0．002）。EphA2表达水平结合临床分期对喉鳞癌预后具有更好的预测价值。单因素及多因素Cox比例风险回归模型进一步显示，EphA2表达水平为喉鳞癌预后的独立影响因素（P=0．019）。结论EphA2蛋白在喉鳞癌组织和细胞中的表达显著升高，且其高表达与喉鳞癌患者的复发、转移及预后密切相关。EphA2可能在喉鳞癌的发生、发展中有重要作用，有望成为评估喉鳞癌复发、转移及预后的重要分子标志物。
- 刘勇张欣邱元正黄东海周小娟谭平清蔡耿明戴耀章余长云肖健云田勇泉
- 关键词：喉肿瘤预后EPHA2
