温州市科技计划项目(N2006A001)
- 作品数:3 被引量:19H指数:2
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- 水稻SSR-PCR反应体系的优化被引量:7
- 2009年
- [目的]为了探索水稻最佳SSR-PCR反应体系。[方法]以水稻R117为试验材料,研究Mg2+、dNTP、引物浓度、Taq DNA聚合酶用量以及退火温度对水稻SSR-PCR扩增结果的影响。[结果]当Mg2+浓度2.00 mmol/L,dNTP浓度0.15 mmol/L,引物浓度0.30μmol/L,Taq DNA聚合酶用量2.0 U,退火温度56.6℃时,PCR扩增DNA条带最亮。[结论]在20μl反应体系中,上述结果为水稻最适SSR-PCR反应体系。
- 朱世杨罗天宽张小玲陈海英唐征刘庆
- 关键词:水稻DNASSRPCR
- 利用分子标记辅助选择改良温恢117白叶枯病抗性
- 2011年
- 以恢复系温恢117为受体,以IRBB21为抗白叶枯病基因Xa21的供体,通过杂交、多次回交和自交,结合分子标记辅助选择技术,将Xa21基因导入温恢117中,结合抗性基因Xa21的分子检测和农艺性状表现,筛选出带有Xa21基因的15个恢复系株系。采用白叶枯病菌株的专化强毒菌系P6进行接种鉴定,各株系的白叶枯病抗性均强于受体亲本温恢117,其中株系M033抗性与IRBB21相当,而农艺性状与温恢117相近。
- 罗天宽张小玲杨文清卢华金朱世杨荆赞革唐征刘庆
- 关键词:水稻白叶枯病抗性分子标记辅助选择
- 8种水稻基因组DNA提取方法的比较被引量:12
- 2009年
- [目的]寻找操作简便、耗时短、成本低的水稻基因组DNA提取方法。[方法]分别以水稻幼嫩黄化叶片和老叶片为材料,用8种方法提取其中的DNA,测定所提DNA的浓度和纯度,并对其进行PCR扩增和电泳检测,比较各方法的提取效果。[结果]8种方法提取的DNA浓度分别为35.15、30.80、67.30、26.15、23.55、8.95、48.05、54.26μg/ml,方法③提取的DNA浓度最大,但PCR扩增效果较差;改进的SDS法(方法⑦、⑧)提取的DNA纯度较高,PCR扩增产物电泳条带较亮,但这2种方法操作程序复杂,成本较高,提取每份样品的成本分别为14、31元,远高于其他提取方法。[结论]除方法③外,其余5种简化方法均能得到较高质量的水稻基因组DNA,且提取成本远低于传统SDS法。
- 朱世杨罗天宽张小玲陈海英唐征刘庆
- 关键词:水稻基因组DNA