湖南省科技计划项目(2011TT2060)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：中南大学更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金湖南省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 分离、纯化及鉴定肝细胞和免疫细胞分泌的HMGB1被引量：1
- 2011年
- 目的:分离纯化肝细胞HepG2与免疫细胞U937分泌的高迁移率族蛋白1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),并加以鉴定。方法:体外培养人肝细胞HepG2与免疫细胞U937,采用400 ng/mL的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激20 h后收集细胞培养液上清。采用超滤浓缩,阳离子交换层析,阴离子交换层析,Sephadex G75凝胶过滤层析结合免疫沉淀的方法,进行分离纯化;聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western印迹进行蛋白分子质量及性质鉴定。结果:2株细胞分离纯化得到的蛋白经SDS-PAGE鉴定其纯度达90%以上,分子质量约为26 kD,Western印迹鉴定为HMGB1。结论:该纯化方法可获得纯度较高的HMGB1。
- 萧梅芳戴霞红周蓉蓉刘建平章保新赵树山范学工
- 关键词：高迁移率族蛋白1分离纯化HEPG2细胞U937细胞
