北京市自然科学基金(6052010)
- 作品数：4 被引量：33H指数：4
- 相关作者：李兴红郭京泽李志勇夏惠娟刘跃庭更多>>
- 相关机构：天津出入境检验检疫局北京市农林科学院河北农业大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 邯郸、保定番茄黄化曲叶病毒检测及其DNA-A全序列分析被引量：6
- 2011年
- 2009年河北保定和邯郸地区番茄受到一种毁灭性的新病毒危害,对两地5个病样检测,结果均为番茄黄化曲叶病毒,但未检测到卫星DNAβ分子。对保定和邯郸分离物DNA-A全长进行克隆测序,两分离物DNA-A全长均为2 781 bp,这两个分离物DNA-A全长与其他地区番茄黄化曲叶病毒分离物同源性为98.6%～99.8%,发现其基因间隔区变异稍大,与其他地区番茄黄化曲叶病毒分离物同源性为96.2%～99.7%。邯郸分离物与山东分离物(SD-2)亲缘关系最近,保定分离物与南京分离物(JSNJ1)亲缘关系最近。聚类分析表明,中国几个省市分离物有很高的同源性,但可以分为两个分支,邯郸和保定的分离物分别在两个分支内。
- 李志勇谢夏青李兴红董志平
- 关键词：番茄黄化曲叶病毒分子检测DNA-A
- 辣椒轻斑驳病毒检测方法的比较被引量：5
- 2008年
- 为寻求一种灵敏、经济、快捷检测辣椒轻斑驳病毒(Pepper mild mottle Tobamovirus,PMMoV)的检测方法,以辣椒轻斑驳病毒侵染的甜椒叶片为材料,采用DIG标记的核酸斑点杂交、RT-PCR和DAS-ELISA3种方法检测不同系列稀释倍数的辣椒叶片总RNA和叶片提取液,测试3种方法的稀释限点。结果表明,RT-PCR灵敏度最高,地高辛斑点杂交灵敏度次之,DAS-ELISA灵敏度最低。在3种方法中地高辛斑点杂交方法与其他两种方法相比灵敏度较高,不需要任何特定仪器,而且适合大量样品的检测,所以此方法有很好的应用前景。
- 王亚南王锡锋
- 关键词：辣椒轻斑驳病毒DAS-ELISART-PCRDIG
- 实时荧光RT-PCR检测辣椒轻斑驳病毒的初步研究被引量：8
- 2008年
- 本研究选取辣椒轻斑驳病毒PMMoV、烟草花叶病毒TMV、黄瓜花叶病毒CMV和马铃薯Y病毒PVY作为试验材料,根据PMMoV衣壳蛋白(CP)RNA的序列特异性位点,设计出Taqman荧光探针及其引物,采用实时荧光RT-PCR技术对PMMoV进行快速检测,同时与ELISA方法进行了灵敏度比较,结果表明:该方法具有较高的灵敏度及较强的特异性,PMMoV检测结果为阳性,TMV、CMV和PVY均无荧光信号,为阴性,灵敏度是传统的ELISA方法的100倍,而且大大缩短了检测时间。该方法快速、准确、灵敏、简便、安全,具有实际应用价值,适用于植物病毒病害的快速检测。
- 郭京泽李兴红廖芳张文明刘鹏刘跃庭
- 关键词：辣椒轻斑驳病毒实时荧光RT-PCR
- 保定地区一种新辣椒病毒病的鉴定被引量：16
- 2006年
- 从保定东郊温室大棚中典型花叶症状的甜椒病株上得到1个病毒分离物（BD），经枯斑二三生烟分离纯化3次后，并保存在茄门甜椒上。通过酶联免疫方法、鉴别寄主反应、电镜观察测定等，确定保定分离物是辣椒轻斑驳病毒（Pepper mild mottle virus，PMMoV）。用Trizol提取病叶总RNA，反转录为cDNA，通过2对特异性引物，分别扩增出病毒外壳蛋白基因片段和与病毒复制相关蛋白基因片段。保定分离物的病毒外壳蛋白基因，与5个PMMoV分离物核甘酸同源性为94．5％～100％，而与3个TMV分离物核苷酸同源性为65．4％～67．7％，从而进一步验证了保定分离物为PMMOV。
- 夏惠娟李志勇郭京泽李兴红
- 关键词：辣椒轻斑驳病毒反转录PCR辣椒
