国家自然科学基金(31100448) 作品数:8 被引量:44 H指数:4 相关作者: 赵银娟 吴小芹 薛斌 杨韵 吴小扁 更多>> 相关机构: 南京林业大学 南京大学 南京农业大学 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 江苏省博士后科研资助计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
一株耐高温抑菌黏质沙雷氏菌的鉴定及其红色素的初步分离 被引量:5 2013年 [目的]为了了解黏质沙雷氏菌的抑菌机理及温度对其产生色素的影响。[方法]从土壤中分离纯化得到1株产红色素细菌,对该菌进行生理生化和16S rDNA鉴定,同时对该菌产生的红色素进行了初步的探讨。[结果]该菌为黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens),在28℃条件下培养红色素产量最高,37℃下仍能产生色素,说明该菌株是耐高温红色素产生菌。紫外全波长扫描分析和薄板层析结果表明,其红色色素有可能是灵菌红素。[结论]该菌对霉状杆菌和镰刀菌等病原菌具有一定的抑制作用。 赵银娟 薛斌 李桂娥 吴小扁关键词:红色素 黏质沙雷氏菌 根瘤菌87-1-1诱导刺槐根表皮传递细胞特异性表达的cDNA文库构建及序列分析 2014年 探寻根瘤菌诱导刺槐后根表皮细胞分化成传递细胞的特异性表达基因及其分子机制.采用抑制差减杂交(suppression subtraction hybridization,SSH)技术构建刺槐根系被接种根瘤菌和未被接种根瘤菌二者间的正反两个c DNA文库.各挑选正反文库中500个克隆进行测序,在Blastn、Blastp、Swiss Prot、KEGG、COG、Interpro以及Gene ontology(GO)数据库中进行比对注释.结合生理过程对ESTs进行分析,共获得725条非冗余序列(uni EST),正反向文库分别为385条和340条,其中包括674个单一序列(singlets),51个拼接序列(contigs).在Nt库比对中有674条uni ESTs与已知基因匹配,占比93%;在Nr库比对中有648条序列有匹配蛋白,占比89%.有正向文库213个uni ESTs和反向文库156个uni ESTs能进行Geney ontology(GO)功能注释,在细胞组分被注释了270次,分子功能被注释了448次,生物过程被注释了484次.uni ESTs的功能分析显示,正向文库中多与细胞翻译后修饰、转录因子、细胞信号通路、细胞壁/细胞膜/内膜系统以及细胞骨架相关蛋白有关,部分是结瘤相关基因.而反向文库中与细胞生长、代谢物形成的基因相关较多,这与根瘤菌处理刺槐后的生理过程一致.在根瘤菌诱导的刺槐根组织文库中发现特异性基因如MYB类转录因子、囊泡相关膜蛋白等与传递细胞相关的基因,结果有助于进一步研究此类传递细胞的形成分化机制. 赵银娟 孙敦平 韩素芬 吴小芹关键词:根瘤菌 刺槐 传递细胞 SSH GGPPS基因干扰腺病毒载体的构建及鉴定 2013年 构建GGPPS基因干扰腺病毒质粒载体并加以鉴定.根据GGPPS基因序列设计GGPPS干扰序列引物,定向克隆至穿梭载体pshuttle-H1的BglⅡ和HindⅢ位点,PmeⅠ酶切线性化的pShuttle-H1-SiGGPPS干扰质粒,并与腺病毒载体(pAdEasy-1质粒)共同转化E.coli BJ5183感受态细菌,产生重组腺病毒载体.用PacⅠ酶切线性化的回收质粒,转染293A细胞包装腺病毒颗粒,在倒置显微镜下观察细胞CPE,用TCID50法测定病毒颗粒的浓度,并初步观察病毒感染PC12细胞对目的基因的干扰效率.经酶切鉴定、测序证实成功构建GGPPS基因干扰腺病毒载体.包装的腺病毒浓缩悬液滴度为1.995×107PFU/mL.GGPPS在人中具有保守性,该病毒能在人源的WRL-68细胞中成功表达,并且对GGPPS基因干扰效率达70%以上. 赵银娟 来珊珊 李朝军 薛斌关键词:腺病毒 粘质沙雷氏菌NJZT-1产灵菌红素培养条件的优化 被引量:7 2015年 灵菌红素是一类具有多种生物活性的天然红色素的总称,主要由粘质沙雷氏菌产生,通常都有3个吡咯环组成的甲氧基吡咯骨架结构。灵菌红素具有抗肿瘤、免疫抑制、抗菌性、抗疟疾等多种生物学活性。通过单因素实验,分析了碳源、氮源、无机盐、表面活性剂、初始p H、培养温度等因素对粘质沙雷氏菌生长量及灵菌红素合成的影响。结果表明:粘质沙雷氏菌最佳产灵菌红素的培养条件为温度28℃,p H 7.0,培养基中碳源为淀粉,氮源为乙酸铵,无机盐为Fe Cl3,表面活性剂为二甲亚砜(DMSO),在此条件下粘质沙雷氏菌产灵菌红素条件为最佳。 赵银娟 杨韵 吴小芹关键词:灵菌红素 粘质沙雷氏菌 细菌生物被膜分散及分子调控机制研究进展 被引量:4 2021年 生物被膜分散(Biofilm Dispersal)是生物被膜发展后期细菌响应营养物、低浓度的一氧化氮、D-氨基酸、自诱导肽(Autoinducing Peptide,AIP)、酰基高丝氨酸内酯(Acyl Homoserine Lactones,AHL)、腺苷三磷酸(Adenosine Triphosphate,ATP)等信号变化而做出的一种程序性反应,有利于细菌从恶劣的生物被膜内部环境中脱离出来寻找新的定殖位点。此外,由生物被膜引起的细菌短暂的抗生素耐受性在分散过程中会恢复正常水平,这有助于治疗由致病菌引起的难治愈的生物被膜相关疾病。目前生物被膜分散的相关研究正处于起步阶段,本文希望通过综述生物被膜分散现象、信号分子及调控机制,可以更好地了解细菌生物被膜分散对于防控病原微生物和应用有益微生物的重要意义。 沈紫竹 李昱龙 孙志敏 樊奔 赵银娟关键词:生物被膜 分子机制 信号分子 羟基化酶产生菌Stenorophomonas maltophilia CGMCC 1.1788对农药氯噻啉生物转化的条件研究 2012年 [目的]探究羟基化酶产生菌Stenorophomonas maltophilia CGMCC 1.1788菌株中羟基化酶的转化活性。[方法]采用摇瓶发酵转化方法对羟基化酶产生菌S.maltophilia CGMCC 1.1788对农药氯噻啉的生物转化条件(不同生长时期的细胞、温度、pH等影响因子)进行了优化。[结果]确立了转化条件:100 ml锥形瓶最佳装液量10 ml,最佳反应温度25℃,最适pH 6.5,最佳反应底物起始浓度0.2 g/L,最佳反应时间48 h。[结论]为较好地发挥该菌的微生物转化功能及了解羟基化酶的生物学特性提供了理论依据。 赵银娟 袁生关键词:生物转化 枯草芽孢杆菌3610 ClpQY基因缺失突变株的构建及其功能 被引量:2 2015年 为了验证枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中Clp QY基因的功能,以枯草芽孢杆菌基因组为模板,PCR扩增出Clp QY基因上下游同源序列840 bp和983 bp的片段,并与自杀质粒p MAD载体连接,构建重组质粒p MADup-down,运用化学转化法通过枯草芽孢杆菌菌株PY79,采用LOOP IN和LOOP OUT的方法,获得不带抗性,且Clp QY完全敲除的枯草芽孢杆菌3610菌株。产孢试验表明,该基因在芽孢生成中为非必需基因,而在生物膜的形成过程中具有调节作用。高温生长试验显示,该基因对细胞逆境条件下的生长存在一定的调控功能。 赵银娟 严芳 吴小芹关键词:枯草芽孢杆菌 同源重组 基因敲除 产孢 CLP 微生物学实验课程的教学改革体会 被引量:26 2013年 微生物学是林学、生物科学等相关专业的重要专业基础课程,从微生物实验教学手段与方法的改革入手,以培养学生能力为导向,分析了传统微生物实验教学的不足,重组了教学内容,改进了教学手段,提出了电子化实验报告的撰写要求。不断提高微生物实验教学的质量,培养学生的动手能力和分析问题、解决问题的实际能力,提高了学生的学习热情和积极性。 赵银娟关键词:微生物学实验 教学改革