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国家自然科学基金(30370726)

作品数:2 被引量:14H指数:2
相关作者:陈永福林爱星陈小玲任立明黄志清更多>>
相关机构:中国农业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学
  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇酵母
  • 1篇基因打靶
  • 1篇分泌表达
  • 1篇毕赤酵母
  • 1篇打靶

机构

  • 2篇中国农业大学

作者

  • 2篇林爱星
  • 2篇陈永福
  • 1篇胡宏宇
  • 1篇黄志清
  • 1篇周健
  • 1篇任立明
  • 1篇陈小玲

传媒

  • 1篇中国生物医学...
  • 1篇生物工程学报

年份

  • 2篇2005
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
敲除猪α1,3-半乳糖基转移酶基因并敲入HLA-G1基因的打靶载体构建被引量:3
2005年
本实验室已克隆到猪α1,3半乳糖基转移酶基因(α1,3GT,第九外显子不全)。其中pMD3arm载体上有5.0kb的片段,该片段包括了小部分第8外显子,完整的第8内含子和一部分第9外显子。本实验中利用LAPCR的方法,从猪的基因组中获得约2.0kb的猪α1,3GT的第9外显子序列的扩增产物,将片段克隆于pGEMTeasy载体。将5.0kb和2.0kb片段分别作为打靶载体的5′,3′同源臂,以neo为正选择标记基因,以GFP为负选择标记基因,构建敲除猪α1,3半乳糖基转移酶基因并同时能表达人白细胞抗原HLAG1基因的的打靶载体pZJ。经酶切图谱和测序结果的鉴定成功地构建出敲除猪α1,3半乳糖基转移酶基因并同时能表达人白细胞抗原HLAG1基因的正负双向选择的打靶载体,为异种器官移植提供了很好的探索。
周健林爱星陈永福
关键词:基因打靶
猪干扰素-γ基因在毕赤酵母中的分泌表达被引量:11
2005年
将去除信号肽的猪干扰素γ(PoIFNγ)基因置于酿酒酵母α因子分泌信号的DNA序列后,构建成pPIC9KαPoIFNγ分泌型重组表达载体,电转化导入毕赤酵母GS115中,经G418筛选后获得2株多拷贝插入的重组子。SDSPAGE和Westernblot分析结果表明,所获得的重组子能够分泌表达出17kD和23kD左右的PoIFNγ特异蛋白,其表达量为108mgL,占培养液总蛋白的60%。实验首次在毕赤酵母表达系统中实现了PoIFNγ基因的分泌表达。
黄志清胡宏宇陈小玲任立明林爱星陈永福
关键词:毕赤酵母分泌表达
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