国家杰出青年科学基金(30325017) 作品数:5 被引量:17 H指数:2 相关作者: 谢维 缪凤琴 张建琼 沈宇清 夏梅 更多>> 相关机构: 东南大学 连云港市第一人民医院 更多>> 发文基金: 国家杰出青年科学基金 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
肝癌细胞中HLA I类重链基因表达与启动子区域甲基化的相关性 被引量:2 2007年 目的:研究肝癌细胞株中DNA甲基化与HLAI类分子异常表达的相关性。方法:应用MSP技术对相关细胞系的HLA I类分子重链A、B、C位点启动子区域CpG岛的甲基化状态进行分析,Real-time PCR检测HLAI类分子重链mRNA水平的表达情况,Western blot检测RNA干扰后HLAI类分子重链表达情况。结果:在8株肝癌细胞系中HLA I类分子重链A、C位点启动子区域CpG岛存在甲基化;将启动子区域的DNA甲基化与相关基因表达数据相比较显示二者没有关联性;在RNA干扰DNA甲基化转移酶3a或3b的肝癌细胞系SMMC7721中,比较基因干扰前后HLA I类分子重链蛋白表达无显著变化。结论:在研究的肝癌细胞系中DNA甲基化没有参与调控肝癌中HLA I类分子的异常表达。 杨晋 张建琼 沈宇清 缪凤琴 夏梅 叶覃 许联红 谢维关键词:HLA DNA甲基化 甲基化特异性 食管癌组织HLA-I类抗原及相关分子的表达及意义 被引量:11 2004年 为探讨HLA抗原及相关分子在食管癌中的表达水平及其与病理学分型的关系 ,应用了 5种HLA抗原及相关分子单抗 ,采用免疫组织化学方法 (ABC法 )对江苏省 83例食管癌组织石蜡切片进行检测并结合肿瘤的临床病理资料综合分析 .得出结果 :HLA B/C、HLA A、β2 m、LMP2、calnexin各分子的下调率分别为 12 %、2 5 .3 %、15 .7%、19.3 %、2 0 .8% ;丢失率分别为 2 9%、3 3 .7%、49.3 %、2 4.1%、41.5 % .其中LMP2位点的表达与肿瘤分型相关 ,随着食管癌分化程度降低 ,下调率增加 .2 7例病例有淋巴结转移 ,但统计学分析各分子的表达与转移均无明显相关性 .研究表明 ,食管癌中有明显的HLA I类分子表达下调或缺失 . 缪凤琴 张建琼 单军 蒋芹 陈昊 李淑锋 张建民 谢维基于HLA等位基因频率的全球人群亲缘关系初探 被引量:2 2014年 目的:探讨不同实验方法、不同统计方法的HLA配型数据在分析全球人群亲缘关系中的作用和效能,为运用HLA基因的多态性分析全球人群的遗传关系提供理论依据。方法:收集了全球6大洲10个地理分区中的110个人群HLA-A,-B和-DRB1座位的高分辨率配型数据,并对这些等位基因命名进行了归一化处理,用统一的统计方法重新统计了各人群的等位基因频率,用N-J法构建了全球人群的关系树,进而对全球人群间的亲缘关系进行了初步分析。结果:同一地理区域内的人群相互聚类,不同区域间的人群完全分离。关系树不仅能很好地分析局部地区相似人群的异同,也能有效地分析全球各区域人群间的亲缘关系。结论:HLA基因的多态性适合对全球人群的亲缘关系进行研究,也是一种高效的研究人类学的分子标记物。 黄庆海 吴亚萌 李震 谢维关键词:人类白细胞抗原 等位基因频率 免疫遗传学 群体遗传学 胃癌细胞系MKN中HLA-Ⅰ类分子表达降低的机制研究 被引量:2 2006年 目的:探讨胃癌细胞系MKN中HLA-Ⅰ类抗原表达水平异常的分子机制。方法:以胃癌细胞系BGC823、MGC803和SGC7901为对照,利用流式细胞仪检测细胞表面HLA-Ⅰ类复合物的表达情况,W estern b lot检测HLA-Ⅰ类分子重链及轻链表达情况,半定量RT-PCR检测HLA-Ⅰ类分子重链、轻链和抗原加工分子mRNA水平的表达情况,并利用HLA基因区域的微卫星序列检测MKN细胞HLA基因在DNA水平的完整性。结果:胃癌细胞系MKN表面HLA-Ⅰ类复合物表达降低,重链A及B/C位点蛋白无表达而轻链表达无异常。在mRNA水平,胃癌细胞系MKN存在重链A、B、C各位点和抗原加工分子TAP1、LMP2、Tapasin、PA28β的表达缺失。微卫星DNA扩增结果初步显示,MKN细胞无HLA基因区域DNA的大片段丢失。结论:胃癌细胞系MKN HLA-Ⅰ类分子复合物表达降低可能是由HLA-Ⅰ类分子重链及其加工分子在转录水平改变而引起的。 沈宇清 张建琼 夏梅 缪凤琴 单祥年 谢维关键词:胃癌 微卫星序列 利用CEA_(694-702)-β2m融合蛋白制备HLA-CEA_(694-702)复合体 被引量:1 2009年 目的:获得大量CEA694-702-β2-微球蛋白(β2m)融合蛋白,并制备HLA-CEA694-702复合体。方法:通过引物设计在β2m基因的5′端引入CEA694-702序列和L inker序列,并将目的基因克隆到质粒pET28 a中,在BL21(DE3)中表达。CEA694-702-β2m和HLA重链蛋白用金属螯合亲和层析法进行纯化,并经稀释复性法复性。制备的HLA-CEA694-702复合体用PEG20000浓缩,应用ELISA鉴定其构象,并用尺寸排阻色谱纯化和鉴定。结果:HLA重链蛋白和CEA694-702-β2m蛋白经金属螯合亲和层析法纯化后纯度提高。ELISA鉴定结果表明稀释复性后HLA-CEA694-702复合体形成了正确的构象。利用尺寸排阻色谱对HLA-CEA694-702复合体成功地进行了纯化。结论:利用CEA694-702-β2m融合蛋白成功制备出HLA-CEA694-702复合体,为HLA-CEA694-702四聚体的制备奠定了基础。 孟凡岩 沈传来 郭薇 缪凤琴 谢维 张建琼关键词:Β2-微球蛋白