北京市科技计划项目(Z0004105040311)
- 作品数：4 被引量：29H指数：3
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- 发文基金：北京市科技计划项目国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 七叶皂苷肾细胞毒性及抗氧化剂的拮抗作用被引量：19
- 2008年
- 目的研究七叶皂苷不同组分和七叶皂苷钠注射剂提取物（ESA）的肾毒性及可能的作用机制。方法以成人肾近曲小管上皮细胞（HK-2）为模型，氯化汞（HgCl2）为阳性对照，研究含七叶皂苷Ia（A）与Ib（B）的提取物（A＋B）、含异七叶皂苷Ia（C）与Ib（D）提取物（C＋D）、含A＋B＋C＋D及ESA的细胞毒性以及抗氧化剂维生素C（VitC）和还原型谷胱甘肽（GSH）对ESA毒性的拮抗作用。用MTT、法检测细胞存活率；乳酸脱氢酶（LDH）释放实验检测细胞膜损伤；倒置显微镜观察细胞形态学改变；流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡。结果A＋B，C＋D、A＋B＋C＋D和ESA分别与HK-2细胞作用24h，均显著抑制细胞的存活，并且具有良好的浓度-效应关系，半数抑制浓度（IC50）值分别为：（26．5±1．7），（35．4±2．2），（28．4±1．8）和（23．3±1．7）μmol·L^-1。A＋B，A＋B＋C＋D（60～100μmol·L^-1），C＋D和ESA（40～100μmol·L^-1）分别与HK-2细胞作用24h，LDH释放率明显升高。80μmol·L^-1A＋B，C＋D，A＋B＋C＋D和ESA分别与HK-2细胞作用24h，相差显微镜下可观察到细胞收缩、变圆。ESA和A＋B＋C＋D均能导致HK-2细胞出现明显的G2／M期阻滞，同时伴有S期细胞减少，并且随着浓度的增加，G2／M期细胞所占的比例逐渐增加。抗氧化剂Vit C不能桔抗HgCl2和ESA引起的细胞损伤作用；GSH对HgCl2 30μmol·L^-1引起的细胞损伤有一定的拮抗作用，GSH对ESA30及60μmol·L^-1引起的细胞损伤均有一定的拮抗作用，但对ESA100μmol·L^-1引起的细胞损伤无拮抗作用。结论七叶皂苷对肾小管上皮细胞具有明显的毒性，七叶皂苷不同组分之间的毒性存在显著差异。氧化损伤可能是其毒性机制之一。
- 沈晓帆王旗杨秀伟江芳
- 关键词：七叶皂苷HK-2细胞维生素C谷胱甘肽
- 顺式-和反式-阿霍烯在Caco-2细胞模型中的体外摄取、转运和外排特性被引量：8
- 2007年
- 研究顺式-阿霍烯(Z-Ajo)和反式-阿霍烯(E-Ajo)的肠细胞摄取、转运和外排特性。采用体外培养的人结肠Caco-2细胞单层模型评价,应用高效液相色谱法测定Z-Ajo和E-Ajo的含量。结果表明,仅能在Caco-2细胞单层的顶侧检测到Z-Ajo或E-Ajo;阿霍烯在Caco-2细胞中的代谢可被抗氧化剂维生素C、细胞色素P450药物代谢酶3A亚型抑制剂甲吡酮和ATP抑制剂叠氮化钠所抑制。Z-Ajo和E-Ajo皆不能透过Caco-2单层细胞而被迅速代谢,其代谢与CYP450药物代谢酶有关。
- 田莉杨秀伟王莹徐嵬
- 关键词：CACO-2细胞单层跨膜转运
- 七叶皂苷HK-2细胞毒性的氧化应激机制被引量：4
- 2010年
- 目的进一步研究七叶皂苷肾细胞毒性的氧化应激机制及谷胱甘肽(GSH)对七叶皂苷毒性的保护作用。方法以人肾近曲小管上皮细胞(HK-2)为模型,荧光探针法检测七叶皂苷钠(SA)0,10,15,20和25μmol·L-1处理2h后细胞内活性氧(ROS)含量变化;分别用N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)1,5和10mmol·L-1,丁硫氨酸亚砜亚胺(BSO)0.5和2.5mmol·L-1预处理HK-2细胞4h,然后加入SA20μmol·L-1作用24h,DTNB法测定预处理后及加入SA后细胞内GSH的含量;MTT法测定经NAC5mmol·L-1或BSO2.5mmol·L-1预处理及未经预处理的HK-2细胞与SA10,15,20,25,30和40μmol·L-1作用24h后的细胞存活率,并计算IC50值。结果 SA15,20和25μmol·L-1作用2h后,HK-2细胞内ROS含量显著高于正常对照组(P<0.01)。与正常对照组1×106个细胞内的GSH含量(5.1±1.2)nmol相比,BSO2.5mmol·L-1及NAC10mmol·L-1预处理后1×106个细胞内的GSH含量2.8±0.8和(2.7±2.3)nmol均显著降低(P<0.05),其他预处理组GSH含量无显著变化。除NAC10mmol·L-1外,各预处理组与SA20μmol·L-1作用24h后GSH含量显著降低(P<0.01)。与未经预处理的SA20,25和30μmol·L-1细胞存活率〔(83±5)%,(69±5)%和(54±6)%〕相比,经BSO2.5mmol·L-1预处理后,对应的细胞存活率显著降低,分别为〔(69±6)%,(40±13)%和(25±15)%〕(P<0.05),NAC预处理对细胞存活率无显著影响;未经预处理及NAC和BSO预处理的SA的IC50分别为31.3±1.7,23.6±2.7和(34.2±1.5)μmol·L-1。结论七叶皂苷通过氧化应激途径发挥肾细胞毒性,细胞内谷胱甘肽可对其氧化损伤起到保护作用。
- 张鑫袁兰杨秀伟焦士勇王旗
- 关键词：七叶皂苷HK-2细胞氧化应激谷胱甘肽
- 金属硫蛋白电化学分析法的建立及应用被引量：1
- 2007年
- 金属硫蛋白（metallothionein，简称MT）是一类在生物界中普遍存在的低分子量、富含半胱氨酸的热稳定性蛋白，结构分析表明MT含有两个结构域：α结构域和β结构域，分别结合4个和3个金属离子。MT的重要功能是结合重金属与清除氧自由基，还具有参与体内微量元素储存、运输和代谢，增强机体对各种不良状态的适应能力及抗电离辐射作用的功能。因此对MT进行快速、灵敏的检测有助于进一步研究和探讨其生物学功能，对生物化学、发育生物学及毒理学研究都有重要意义。
- 曾克武王旗杨晓达张宝旭王夔
- 关键词：金属硫蛋白电化学分析法清除氧自由基体内微量元素发育生物学结构域
- 七叶皂苷肾细胞毒性与热休克蛋白表达呈负相关
- 目的 研究七叶皂苷的肾细胞毒性与热休克蛋白(HSP)表达水平间的关联,并初步探讨代谢对七叶皂苷毒性的影响.方法 MDCK细胞导入pHSE-SEAP质粒,以热休克与重金属刺激考察模型的有效性；通过检测分泌型碱性磷酸酶(SE...
- 张鑫杨秀伟杨晓达王旗
