国家自然科学基金(39770297)
- 作品数：7 被引量：49H指数：4
- 相关作者：来茂德黄琼黄智达王慧萍程蕾更多>>
- 相关机构：浙江大学浙江大学医学院附属第一医院浙江医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人结直肠癌组织9p21-22区微卫星改变的研究被引量：5
- 1999年
- 目的 研究ｐ１６ 的改变是不是结直肠癌发展的重要的基因改变，探讨９ｐ２１２２ 区的分子遗传学改变与结直肠癌的关系。方法 采用ＰＣＲ、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染色等方法，检测９５例散发性结直肠癌患者癌组织９ｐ２１２２ 区４ 个位点的微卫星改变，包括微卫星不稳定性（ＭＳＩ） 及杂合性缺失（ＬＯＨ） ，研究其发生率，并将之与临床病理资料进行比较，并对ｐ１６ 内含子区表现有ＭＳＩ者进行了直接测序，研究内含子结构的改变状态。结果 在９ｐ２１２２ 区散发性结直肠癌的微卫星改变发生率为１７．９０％ （１７／９５） 。ＭＳＩ阳性组具有以下特征与ＭＳＩ阴性组不同：（１） 患者年龄较小，大多＜ ５０岁（Ｐ＜０ ．０５） ；（２）ＭＳＩ阳性组易发生粘液腺癌（ Ｐ＜０．０１） 。５ 例在ｐ１６（２） 位点ＭＳＩ阳性的病例直接测序都证明有Ａ数目的增加或减少。结论 选择合适的微卫星标记，就可对人类基因组任一染色体任一位点进行遗传不稳定性研究，可进而找到其他潜在的肿瘤相关基因，阐明肿瘤的发病机制。结果还提示，ｐ１６ 与结直肠癌关系不甚密切。
- 张宇伟来茂德
- 关键词：直肠肿瘤结肠肿瘤P16基因
- 结直肠腺瘤中的微卫星不稳定性类型
- 2003年
- 应用微切割 聚合酶链反应 单链长度多态性 (PCR SSLP)的方法 ,检测 1 6个微卫星位点在 5 9例 6 2个结直肠腺瘤标本的微卫星不稳定性状态 .结果表明 :腺瘤 1 6个位点的总微卫星不稳定性(microsatelliteinstability ,MSI)发生率为 1 4 4 % ,MSI H所占的比率为 9 7% ;在 1 0例可以同时微切割得到腺瘤和癌变成分的病例中 ,腺瘤和癌变成分在每个微卫星位点的改变情况不完全相同 ,并且当在某一位点同时表现为阳性时 ,部分凝胶电泳的图像相同 ,而部分不同 ;在某些位点表现为癌变成分的异常条带泳动速度更快 ,说明序列比腺瘤中更短 ;MSI H与病人的年龄、性别、腺瘤发生部位和病理学亚型之间未见统计学差异 ,但MSI H组的平均年龄 (5 6 5 0± 1 1 38)低于MSI L组 (6 0 36±1 1 34) ,女性所占比率 (5 6 )明显高于男性 ,6例MSI H中无 1例组织学类型为管状腺瘤 ;各位点在MSI H组的MSI改变率明显高于MSI L组 ,在TGFβRⅡ (A) 1 0 、hMSH6、TCF4、BAT2 6等位点有明显差异 (P <0 0 5 ,其中BAT2 6的P <0 0 1 ) .可以推断 :在结直肠癌发生发展的早期即腺瘤阶段即可表现微卫星不稳定性 ;微卫星不稳定性可以随结直肠肿瘤的发展过程而发展 ,并且特定的微卫星位点的改变可能仅发生于肿瘤进程的特定阶段 ;在结直肠癌?
- 程蕾王慧萍黄琼来茂德
- 关键词：结直肠肿瘤腺瘤微卫星
- RER+结直肠癌组织转化生长因子βⅡ型受体的突变被引量：3
- 2004年
- 目的 检测转化生长因子 βⅡ型受体 (TGF βRⅡ ) (A) 10 、TGF βRⅡ (GT) 3、TGF βRⅡ 452 /454、TGF βRⅡ 53 3、hMSH3 (A) 8、hMSH6(C) 8、Bax (G) 8、胰岛素样生长因子Ⅱ型受体 (IGFⅡR) (G) 8、IGFⅡR (CT) 3 等微卫星突变热点及TGF βRⅡ点突变在RER +结直肠癌中的突变率、突变发生在肿瘤进程的哪一阶段。方法 采用聚合酶链反应 单链长度多态性分析 (PCR SSLP)、微切割 PCR SSLP、PCR 单链构象多态性分析、克隆测序、免疫组织化学对 76例结直肠癌标本进行分析。结果 RER +(replicationerrorpositive)肿瘤TGF βRⅡ (A) 10 突变率约为 3 / 9,突变可发生于重度不典型增生腺瘤。其余位点未见突变。RER +结直肠癌多见于男性 ,发病年龄较早 (P <0 0 5) ;肿瘤多位于结肠 (P <0 0 5)。结论 RER +结直肠癌多见于较年轻男性 ,好发于结肠 ,仅约三分之一病例存在TGF βRⅡ(A) 10 突变 ;TGF βRⅡ (A) 10 突变发生于重度不典型增生腺瘤 ,可能对RER +腺瘤进展为癌起重要作用。RER +结直肠癌在临床病例特征上与西方发达国家的病例存在差异 。
- 来茂德黄智达黄琼陈俭
- 关键词：RER结直肠癌基因突变发病机制
- 结直肠腺瘤的微卫星不稳定状态与相关基因表达的研究被引量：7
- 2004年
- 应用微切割-聚合酶链反应-单链长度多态性(PCR SSLP)的方法,检测59例62个结直肠腺瘤,包括散发性腺瘤及家族性腺瘤性息肉病(FAP)腺瘤在BAT26等16个微卫星基因座在结直肠腺瘤标本的微卫星不稳定性(MSI)状态;并应用免疫组织化学SP法检测β 连接素(β catenin)、TP53、BAX等的表达情况,初步探讨错配修复(MMR)基因在结直肠癌发生的早期即腺瘤阶段的作用及其意义。结果显示:(1)腺瘤16个基因座的总MSI发生率为14.4%;同一病人的不同腺瘤在某些相同的基因座表现出不同的MSI状态;(2)5例FAP病人均表现为MSI L,其中有3例在hMSH3基因座表现为MSI阳性;(3)β 连接素在腺瘤和腺癌细胞膜阳性率分别为42.9%和11.4%,表达差异有显著统计学意义(P<0.001);(4)TP53、D5S346、TCF4(A)9、TGFβRⅡ(GT)3、TGFβRⅡ(A)10等微卫星基因座的MSI改变与相应的免疫组织化学指标TP53、β 连接素、TGFβRⅡ等在腺瘤及腺癌中的阳性表达有密切关系。可以推断:(1)在结直肠癌发生发展的早期即腺瘤阶段即可表现微卫星不稳定性,腺瘤中存在1p染色体的改变、APC基因的改变及TGFβ信号转导途径的异常;(2)随着腺瘤向腺癌的进展,β 连接素的阳性着色由细胞膜转移至细胞内,而且胞浆阳性强度增加;可以推断腺瘤中APC β 联蛋白 TCF4信号转导途径的异常。
- 程蕾王慧萍黄琼来茂德
- 关键词：结肠直肠癌腺瘤免疫组织化学微卫星不稳定性
- 溃疡性结肠炎及伴发癌的p53改变和微卫星不稳定性被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨溃疡性结肠炎和不典型增生、癌变组织的 p5 3基因改变和微卫星不稳定性状况。方法 :采用SP法检测 2 1例 70个手术切除的溃疡性结肠炎标本和 2 5例正常人的 P5 3蛋白表达 ;人工微切割 - PCR- SSCP/HA-克隆测序技术检测溃疡性结肠炎标本 p5 3基因第 5 - 8外显子的点突变 ;SSLP-测序技术检测 10个微卫星位点的改变情况。结果 :P5 3蛋白免疫组化发现 2 5例正常人全部阴性 ;溃疡性结肠炎患者 4例阳性 ,其中炎症性、低度不典型增生 (LGD)、高度不典型增生 (HGD)与癌变阳性标本分别为 0 /5例、1/7例、2 /7例和 1/2例。SSCP/HA、SSLP结果各有 2例阳性 ,其中 1例癌变病例癌组织 p5 3基因第 6外显子及 Bat2 6微卫星位点均阳性 ,其 LGD区 Bat2 6也阳性 ;1例 LGD病例 Bat2 6位点阳性 ;另 1例 HGD病例 p5 3基因第 8外显子阳性 ,后者经测序证实发生了移码突变。 2 1例标本在 TGFβRII(A) 10 、IGFIIR(G) 8、IGFIIR(CT) 5、TGFβRII(GT) 3 、BAX(G) 8、h MSH3(A) 8、h MSH6(C) 8、TCF4 (A) 9和 DPC4 (CA) 179个微卫星位点都阴性。结论 :溃疡性结肠炎和癌变黏膜的早期就存在 P5 3蛋白的过表达和微卫星不稳定性 ,前者部分是基因突变的结果。
- 李君来茂德黄琼
- 关键词：溃疡性结肠炎P53基因微卫星不稳定性DNA序列分析
- 在石蜡切片中进行微切割-PCR-银染的方法被引量：12
- 2000年
- 目的 探索在石蜡切片中应用微切割 - PCR-银染技术 ,检测大肠癌的微卫星不稳定性和杂合性缺失。方法 用微切割技术在 2 8例石蜡切片中提取淋巴细胞和间质细胞、癌旁粘膜腺管、不典型增生腺管、腺瘤腺管和腺癌细胞 ,每例至少包含 3种类型细胞 ,经蛋白酶 K消化后 ,直接用于 PCR扩增 ,产物进行8%变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 -银染。共进行了 TGF-βR (A) 1 0 、h MSH2 (A) 2 6 - Bat2 6 ,h MSH3(A) 8,h MSH6(C) 84个微卫星位点的检测。结果 h MSH3(A) 8和 h MSH6 (C) 8位点在 2 8例标本全部扩增出目的片段 ,而TGF-βR (A) 1 0 和 h MSH2 (A) 2 6 位点则分别有 2 3例、2 2例扩增出目的片段 ,且 h MSH2 (A) 2 6 位点有 5例癌细胞呈阳性 ,其中 1例同时有腺瘤细胞阳性。结论 微切割 - PCR-银染技术应用于石蜡切片 ,可获得较满意的结果 。
- 黄智达黄琼来茂德
- 关键词：微切割石蜡切片大肠癌微卫星不稳定性PCR
- 结直肠癌发生的分子机制研究进展被引量：22
- 2000年
- 来茂德
- 关键词：结直肠癌分子模型微卫星不稳定性
