您的位置： 专家智库 > >

国家自然科学基金(30430290)

作品数：10 被引量：28H指数：3
相关作者：栗占国奚永志赵义薛红宋新强更多>>
相关机构：北京大学解放军第307医院澳大利亚墨尔本大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 10篇中文期刊文章

领域

  • 9篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 9篇类风湿
  • 9篇风湿
  • 8篇关节炎
  • 5篇细胞
  • 4篇型胶原
  • 4篇性关节炎
  • 4篇类风湿关节炎
  • 4篇类风湿性
  • 4篇风湿关节炎
  • 4篇风湿性
  • 3篇抗原
  • 3篇类风湿性关节...
  • 3篇风湿性关节炎
  • 2篇真核
  • 2篇真核表达
  • 2篇人类白细胞
  • 2篇人类白细胞抗...
  • 2篇细胞抗原
  • 2篇滑膜
  • 2篇胶原

机构

  • 6篇北京大学
  • 4篇解放军第30...
  • 2篇澳大利亚墨尔...
  • 1篇首都医科大学...
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇北京协和医学...

作者

  • 6篇栗占国
  • 4篇奚永志
  • 3篇赵义
  • 2篇孙玉英
  • 2篇陈振军
  • 2篇骆媛
  • 2篇谭刘欣
  • 2篇袁方
  • 2篇王丹
  • 2篇张连峰
  • 2篇赵金霞
  • 2篇刘楠
  • 2篇刘曙光
  • 2篇梁飞
  • 2篇史晋霞
  • 2篇向志光
  • 2篇刘金锋
  • 2篇宋新强
  • 2篇薛红
  • 1篇徐大模

传媒

  • 3篇中华医学杂志
  • 2篇中华风湿病学...
  • 1篇中国科学（C...
  • 1篇中国免疫学杂...
  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇中国比较医学...
  • 1篇中华临床免疫...

年份

  • 1篇2009
  • 4篇2008
  • 2篇2007
  • 2篇2006
  • 1篇2005
共 10 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
新型鸡Ⅱ型胶原基因疫苗治疗胶原诱导的大鼠类风湿性关节炎的疗效观察被引量：2
2006年
目的系统观察含编码鸡Ⅱ型胶原基因(CCOL2A1)疫苗pcDNA-CCOL2A1对大鼠胶原诱导的关节炎(CIA)的治疗作用。方法以鸡Ⅱ型胶原(CCⅡ)诱导的Wistar大鼠为类风湿关节炎(RA)模型即CIA,系统观察一次性尾部静脉注射20μg／kg、200μg／kg、400μg／kg 3个不同剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗和pcDNA3．1空载体对CIA的治疗效果。通过评估治疗前后CIA鼠关节肿胀指数的改善,结合放射影像学和组织病理学方法,系统分析pcDNA-CCOL2A1基因疫苗对CIA关节炎的治疗作用。结果CIA大鼠在注射pcDNA-CCOL2A1基因疫苗后的第5天,在200μg／kg剂量组就可观察到CIA大鼠四肢关节肿胀程度明显减轻;放射影像学和组织病理学检查显示,经过200μg/kg治疗后,使关节软骨及其下面的骨小梁结构与正常组接近,关节软骨及其下面的骨质结构得到保护,可使炎症分数下降为对照组的50％,仅关节滑膜略有增生,与空载体组比较差异有统计学意义(P<0．05);而20μg／kg和400μg／kg两剂量组与空载体组比较则无任何治疗效果(P>0．05)。结论pcDNA-CCOL2A1基因疫苗对CIA大鼠关节炎有显著的治疗作用。
宋新强骆媛王丹刘曙光刘金锋袁方薛红刘楠梁飞孙玉英奚永志
关键词：类风湿性关节炎胶原
CD4^＋CD25^＋Treg细胞在类风湿关节炎中的研究进展被引量：1
2008年
类风湿关节炎（RA）病因、发病机制和治疗新策略的探索始终是国内外热点。迄今由于RA的病因和发病机制不清，目前尚无法根治。目前临床上使用的各种药物疗法除了毒副作用外，阻止RA骨破坏以及关节变形的作用有限，最终导致功能障碍残疾。因此，选择性地阻断RA病理生理过程的新型药物或疗法是风湿病学领域亟待解决的问题。鉴于RA患者的滑膜炎症和关节破坏变形与免疫功能的失衡密切相关，而导致这种病理生理的改变主要是由前炎性CD4^＋的Th1（pro—inflammatory T helper 1）介导的这一事实。
谭刘欣奚永志
关键词：CD4^+CD25^+TREG细胞类风湿关节炎INFLAMMATORY病理生理过程药物疗法关节变形
瓜氨酸化人乳头状瘤病毒47-E2 345-362肽抗体在类风湿关节炎发病中的意义
2008年
目的 检测类风湿关节炎（RA）患者血清中与聚丝蛋白原306-324多肽高度同源的人乳头状瘤病毒E2 245-362肽及瓜氨酸化E2 345-362肽的抗体水平，并探讨其在RA发病中的意义。方法 选取RA患者119例、其他风湿病患者223例、健康对照101名。应用NCBI数据库BLAST方法检索出与聚丝蛋白原306-324肽高度同源的人乳头状瘤病毒（HPV）47型E2蛋白的345～362多肽序列（E2 345-362），并以瓜氨酸替换此多肽序列中第348位上的精氨酸。合成并纯化E2 345-362肽及瓜氨酸化E2 345-362肽。分别以E2 345-362肽及瓜氨酸化E2 345-362肽为抗原，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测患者血清中相关抗体的水平。并研究其与RA患者发病年龄、病程、疾病活动指数（DAS28）评分、抗环瓜氨酸（CCP）抗体、抗肽酰精氨酸脱亚胺酶（PADI）4抗体、C反应蛋白（CRP）、关节X线分期等指标的关系。结果 ①RA患者组血清中抗瓜氨酸化E2 345-362肽抗体的阳性率（41．2％）及滴度（Au值为105．7）明显高于其他对照组（P均〈0．01）；RA患者、其他对照组血清中抗E2 345-362肽抗体的阳性率差异无统计学意义。②与CCP抗原预孵育后的血清中抗瓜氨酸化E2 345-362肽抗体水平明显下降（P〈0．05）。③抗瓜氨酸化E2 345-362肽抗体阳性组与阴性组抗CCP抗体的阳性率差异有统计学意义（P〈0．01）：两组间的抗PADI4抗体阳性率及滴度差异有统计学意义（P〈0．01）；相关性分析显示抗瓜氨酸化E2 345-362肽抗体滴度与抗PADI4抗体滴度具有相关性（r=0．485，P〈0．01）。④抗瓜氨酸化E2 345-362肽抗体阳性患者的DAS28评分、ESR及X线分期均高于阴性患者（P均〈0．05）；抗瓜氨酸化E2 345-362肽抗体阳性组的抗角蛋白抗体（AKA）阳性率、抗核周因子（APF）阳性率及RF均高于阴性组（P均〈0．05）。结论 RA患者血清中可以检测到抗瓜氨酸化HPV47-E2 345-362肽的�
史晋霞赵义赵金霞栗占国
类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库的构建被引量：7
2005年
目的构建类风湿关节炎(RA)滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库,为筛选和鉴定RA特异性基因的研究奠定基础。方法取确诊RA患者的滑膜组织,用Trizol试剂提取总RNA,Oligotex离心柱分离mRNA,电泳检测其质量,逆转录合成双链cDNA,经末端修平、接头连接、酶切后去除过多接头,收集>300bp的cDNA片段,与T7Select10-3载体连接,体外包装并扩增得到类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库。最后,通过铺平板滴度测定及PCR技术鉴定文库质量。结果所构建原始文库重组克隆数为2×107pfu,扩增滴度8.9×1010pfu/ml。PCR法检测片段插入率为90%,插入片段在300～2000bp之间。文库噬菌体裂解液PCR扩增得到BiP基因片段。结论成功构建了高质量的RA滑膜T7噬菌体展示cDNA文库,为下一步RA自身抗原的筛选奠定了基础。
李茹陈巧林赖蓓栗占国
关键词：噬菌体展示CDNA文库类风湿关节炎滑膜自身抗原
Ⅱ型胶原变构肽鼻黏膜给药治疗胶原诱导性关节炎的实验研究被引量：3
2008年
目的:研究以丙氨酸替换Ⅱ型胶原(collagenⅡ,CⅡ)263-272序列中的267、270、271位氨基酸的变构肽鼻黏膜给药对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)的抑制作用及其作用机制。方法:以牛CⅡ免疫Lewis大鼠诱发CIA。于发病的当天开始给予CⅡ变构肽和原型肽鼻滴入治疗,连续每天给药,5d后,改为隔天给药,空白对照组给予磷酸盐缓冲液(phosphate buffered solution,PBS)。观察关节肿胀情况,记录关节炎评分以及体重的改变。治疗结束后处死大鼠,行后踝关节病理切片,观察关节病理改变。ELISA方法检测血清中抗CⅡ抗体亚型以及细胞因子的变化,流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+T细胞的变化,荧光定量PCR检测脾和淋巴结中Foxp3和TGF-βmRNA的表达水平。结果:(1)CⅡ变构肽可以抑制CIA的发展。实验结束时CⅡ变构肽、原型肽以及PBS组大鼠关节炎评分分别为2.50±2.43、4.50±2.23和6.33±2.73(变构肽治疗组与PBS对照组比较,P<0.05),各组大鼠后踝关节病理学评分分别为1.33±1.07、2.17±0.94和2.83±0.58,与PBS对照组相比,CⅡ变构肽可以明显抑制CIA关节病变的发展(P<0.05)。(2)与PBS对照组相比,CⅡ变构肽可以降低CIA大鼠体内抗CⅡ抗体IgG2a亚型的滴度(0.56±0.19和0.95±0.29,P<0.05)。CⅡ变构肽、原型肽及PBS对照组大鼠血清中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平分别为(185.33±29.77)、(231.62±41.82)和(220.64±83.61)ng/L,与原型肽组相比,CⅡ变构肽可以降低大鼠血清中IFN-γ水平。(3)CⅡ变构肽治疗对调节性T细胞的影响:3组大鼠外周血CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例差异无统计学意义,CⅡ变构肽治疗组大鼠脾和淋巴结中Foxp3和转化生长因子β(transforming growth factors β,TGF-β)mRNA的表达水平较对照组有升高趋势,但差异无统计学意义。结论:CⅡ变构肽鼻黏膜给药治疗可以抑制CIA的发展,CⅡ变构肽可能主要通过抑制CIA大鼠体内IgG2a型抗CⅡ抗体的产�
赵金霞李茹何菁史晋霞栗占国
关键词：关节炎变构肽
HLA－DRα和HLA-DRB1^＊0405表达载体的构建及其在真核细胞中的表达被引量：3
2007年
目的构建HLA-DRα和HLA-DRB1*0405真核表达载体,并使其在哺乳动物细胞内得到表达。方法从含HLA-DRα全长cDNA的质粒中扩增HLA-DRα的ORF序列,通过酶切将载体pIRES2-EGFP中的EGFP切除,将HLA-DRαORF插入到载体中;采用RT-PCR方法从HLA-DRB1*0405阳性人外周血单个核细胞中克隆出HLA-DRB1*0405 ORF序列,将其插入pIRES2-DRα载体的多克隆位点处,构建出真核表达载体pIRES2-DRαβ1*0405。对构建的载体进行限制性内切酶鉴定和测序。采用脂质体转染方法将表达载体转入小鼠成纤维细胞系DAP2.3中,通过流式细胞术和间接免疫荧光法对HLA-DRα和HLA-DRB1*0405的表达进行检测。结果酶切鉴定和测序证实目的基因插入正确且序列与GenBank一致。流式细胞术检测约41.41%的转pIRES2-HLA-DRαβ1*0405载体的细胞呈阳性,间接免疫荧光显示HLA-DRα和HLA-DRB1*0405在转基因细胞中得到表达并形成完整的HLA-DR4分子,表达于胞膜及胞质内。结论成功构建出真核表达载体pIRES2-DRαβ1*0405,并在小鼠成纤维细胞系中得到表达,为下一步进行稳定细胞系的建立和转基因鼠模型的构建奠定了基础。
赵义向志光陈振军张连峰栗占国
关键词：真核表达类风湿
人类白细胞抗原DR4（＊0405）表达细胞系的建立
2007年
目的构建人类白细胞抗原（HIA）DR4（＊0005）真核表达载体，并使其在小鼠成纤维细胞系中得到稳定表达。方法从含且HLA-DRA全长eDNA的质粒中扩增HLA．DRA的开放读码框（ORF）序列，通过酶切将载体pIRES2-EGFP中的增强绿色荧光蛋白（EGFP）切除，将HLA-DRAORF插入到载体中；采用RT-PCR方法从HLA．DR4（＊04051阳性人外周血单个核细胞中克隆出HLA-DRB1＊0405ORF序列，将其插入pIRESrDRct载体的多克隆位点处，构建出真核表达载体pIRES，DRccβ＊0405。对构建的载体进行限制性内切酶鉴定和测序。采用脂质体转染方法将表达载体转入小鼠成纤维细胞系DAP2．3中，G418抗性筛选，并进行单克隆扩增。通过流式细胞术对细胞克隆进行鉴定，筛选出高表达HLA．DR4（＊0005）的细胞株，并采用激光共聚焦显微镜观察H1A-DR4（＊0405）在小鼠成纤维细胞中的表达情况。结果酶切鉴定和测序证实目的基因插入正确且序列与Genbank一致。流式细胞术筛选得到了高表达HLA-DR4（＊0005）的稳定转染细胞株，阳性率达到74．65％。激光共聚焦显微镜观察证实HLA-DR4（＊0405）分子在小鼠成纤维细胞系得到了表达，主要分布于胞膜及胞质内。结论成功构建出真核表达载体pIRES2-DRαβ1＊0405，并在小鼠成纤维细胞系中获得稳定表达，为进一步开展HM-DRB1＊0405的功能研究和转基因鼠模型的建立奠定了基础。
赵义向志光陈振军张连峰栗占国
关键词：人类白细胞抗原真核表达类风湿关节炎
Ⅱ型胶原免疫活性肽研究的进展被引量：6
2009年
类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是由多种致病因子激活Th1细胞进而介导的全身性自身免疫性疾病。已有研究证实，RA患者口服鸡或牛Ⅱ型胶原（collagen tvpeⅡ，CⅡ）能够诱导免疫耐受从而达到显著治疗部分RA的作用。然而，CⅡ并非对所有RA都有效。研究发现，在CⅡ中存在不同的抗原表位，它们含人类白细胞抗原（RLA）-DR1／DR4的结合位点和与T淋巴细胞反应的抗原表位。通过清除T淋巴细胞受体表位的不同氨基酸的侧链或替代T淋巴细胞结合氨基酸，可以阻断HLA-抗原肽复合物与T淋巴细胞形成氢键连接，从而抑制抗原提呈反应。本文对近年来对CⅡ免疫活性肽的研究进展综述如下。
谭刘欣奚永志
关键词：T淋巴细胞反应全身性自身免疫性疾病类风湿性关节炎人类白细胞抗原T淋巴细胞受体
肥大细胞和类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞共培养对白细胞介素-6分泌的影响被引量：3
2008年
目的观察肥大细胞和关节成纤维样滑膜细胞（FLS）共培养对FLS分泌白细胞介素（IL）石的影响及其作用机制。方法应用免疫组化染色法观察肥大细胞在关节滑膜中的分布。分离培养RA患者的FLS，加入肥大细胞系LAD-2共培养或用Transwell小室隔离共培养，观察上清中FLS分泌的细胞因子IL-6的变化。结果LAD-2几乎不产生IL-6，FLS组IL石的浓度为（3019±57）μg／L，而FLS与等量LAD-2细胞共培养的IL-6浓度为（7150±114）μg/L（P〈0．01）。且其增加程度与LAD-2细胞数量呈正相关。以4％甲醛固定和Transwell小室隔离两种方法分别阻断可溶性介质分泌和细胞间相互黏附，前一组中IL石增加可被阻断，但在后一组中不受影响。结论肥大细胞与FLS通过可溶性介质相互作用可增加FLS的IL石分泌，在RA发病中可能有重要意义。
穆荣徐大模栗占国
关键词：类风湿性肥大细胞成纤维细胞
鸡Ⅱ型胶原基因疫苗pcDNA-CCOL2A1能有效治疗大鼠类风湿性关节炎被引量：5
2006年
已证明Ⅱ型胶原(CII)是类风湿性关节炎(RA)最主要的自身免疫抗原,采用口服鸡Ⅱ型胶原蛋白(CCII)诱导免疫耐受治疗RA标志着RA治疗策略的重大进展之一.在国际上克隆成功鸡Ⅱ型胶原蛋白基因(CCOL2A1)的基础上,探讨了采用pcDNA-CCOL2A1基因疫苗策略治疗RA的科学性和可行性.将克隆的CCOL2A1基因连接于真核表达载体pcDNA3.1(+)上,即为基因疫苗pcDNA-CCOL2A1.然后将该表达载体pcDNA-CCOL2A1转染COS-7细胞,经Western blot分析显示,pcDNA-CCOL2A1在COS-7细胞中是以分泌型来表达CCII多肽链的α亚单位.随后,以CCII诱导的Wistar大鼠为RA模型即CIA,系统观察一次性尾部静脉注射20,200,400μg/kg3个不同剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗对CIA关节炎的治疗作用.结果表明,在注射后第5天200μg/kg组就可观察到大鼠关节肿胀程度明显减轻,与空载体组比较有显著性差异(P<0.05),而20,400μg/kg两剂量组与空载体组比较未观察到治疗效果(P>0.05).注射后6周,CIA大鼠血清中抗CII抗体浓度水平、TNF-α浓度在200μg/kg治疗组较空载体组明显降低(P<0.05),而400μg/kg组则显著的升高,20μg/kg组则无明显变化.此外,细胞因子TGF-β,IL-10浓度水平在200μg/kg组较空载体组明显升高(P<0.05),而20与400μg/kg两组则无显著性差异.脾细胞淋巴细胞增殖实验表明,200μg/kg剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗治疗组大鼠脾细胞对CII的反应能力较空载体组明显下降(P<0.05).此结果表明,200μg/kg剂量pcDNA-CCOL2A1基因疫苗能明显抑制CIA大鼠关节肿胀程度,降低抗CII抗体、TNF-α水平,提高细胞因子TGF-β,IL-10水平,降低脾细胞增殖反应能力,对CIA大鼠关节炎有显著的治疗作用.
宋新强骆媛王丹刘曙光刘金锋袁方薛红刘楠梁飞孙玉英奚永志
关键词：类风湿性关节炎免疫耐受
全选 清除 导出
共1页<1>
聚类工具0