福建省属公益类科研院所基本科研专项(2011R1025-2)
- 作品数：4 被引量：26H指数：3
- 相关作者：李兆龙王劭朱小丽陈少莺陈仕龙更多>>
- 相关机构：福建省农业科学院更多>>
- 发文基金：福建省属公益类科研院所基本科研专项福建省农业科学院科技创新团队建设基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鸡黄病毒CJD05株E基因克隆与序列分析被引量：6
- 2012年
- 为了解福建省鸡黄病毒(CFV)CJD05株来源及其遗传进化关系,根据鸭黄病毒(DFV)BYD-1株E基因全序列设计合成1对引物,特异性扩增CFV CJD05株的E基因,并对其序列进行分析。结果表明克隆获得CFV CJD05株1 503 bp的E基因特异性目的条带,同源性分析表明CFV CJD05株E基因核苷酸序列与DFVBYD-1株、鹅黄病毒(GFV)JS804株的同源性分别为99.2%、99.3%,氨基酸的同源性分别为99.0%、98.6%,表明CFV CJD05株、DFV BYD-1株和GFV JS804株高度同源,与坦布苏病毒(TBSV)的同源性高于其它虫媒介黄病毒。
- 王劭陈仕龙陈少莺林锋强程晓霞朱小丽江斌李兆龙
- 关键词：鸡黄病毒E基因
- 鸡黄病毒RT-PCR检测方法的建立被引量：3
- 2012年
- 为建立鸡黄病毒(CFV)分子生物学检测方法,本研究以虫媒介黄病毒基因3'末端通用引物EMF1/VD8作为鉴别引物,以CFV分离株CJD-05为模板,建立了检测CFV的RT-PCR方法。RT-PCR扩增产物测序结果显示,其扩增片段为708 bp,而该方法对其它禽类病毒病原核酸的扩增结果均为阴性,表明该方法具有较高的特异性。扩增的特异性片段与GenBank中CFV、鸭黄病毒和鹅黄病毒序列同源性达到100%、98%和99%。对参考病毒进行梯度稀释检测,该方法检测CFV的敏感度可达10-3TCID50/0.1 mL。采用所建立的RT-PCR方法对2009年福建省部分鸡场的112份临床样品进行检测,结果显示37份为CFV阳性。本研究建立的RT-PCR方法可以作为CFV在临床检测和分子流行病学调查的一种检测方法。
- 王劭陈仕龙陈少莺程晓霞林锋强朱小丽江斌李兆龙
- 关键词：鸡黄病毒RT-PCR
- 鸡黄病毒RT-PCR检测方法的建立
- 为建立鸡黄病毒（CFV）分子生物学诊断方法,本研究将虫媒介黄病毒基因3’末端通用引物EMF1/VD8作为鉴别引物,以CFV分离株CJD-05为模板,建立了检测CFV的RT-PCR方法。RT-PCR扩增产物测序结果显示,其...
- 王劭陈仕龙陈少莺程晓霞林锋强朱小丽江斌李兆龙
- 关键词：鸡黄病毒RT-PCR
- 文献传递
- 鸭黄病毒的分离鉴定被引量：7
- 2012年
- 从临床表现为产蛋下降、头颈歪斜、软脚为主要特征的发病蛋鸭卵巢、脑浆、肝、脾等组织中分离到1株病毒。分离毒能致死番鸭胚和鸡胚,人工感染产蛋期的蛋鸭能导致体温升高、产蛋急速下降,卵泡出血和萎缩;分离毒不能凝集鸡和鸽红细胞,能被鸡黄病毒高免血清特异中和;用禽黄病毒特异引物扩增为阳性。上述结果证实分离毒是黄病毒科黄病毒属的鸭黄病毒,是导致蛋鸭产蛋下降的病原。
- 陈仕龙陈少莺王劭李兆龙程晓霞林锋强朱小丽江斌黄梅清郑敏毛宁
- 关键词：蛋鸭产蛋下降鸭黄病毒
- 禽新型黄病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量：12
- 2012年
- 根据环介导等温扩增技术(LAMP),建立了一种适用于禽新型黄病毒的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)快速检测方法。根据禽新型黄病毒E蛋白基因序列,在保守区设计了一套针对禽新型黄病毒基因8个区域的6条特异性引物,并对反应条件进行优化。结果表明该方法对NDRV、GPV、MDRV、NDV、ILTV、FPV均无扩增反应,并可通过反应液是否有沉淀或向反应液中加入荧光染料来对结果进行可视化观察;扩增反应只需要在常规水浴锅中进行,45min内可完成反应;该方法对禽新型黄病毒RNA的最小检测限为1pg,灵敏度是一步法RT-PCR方法的100倍。本研究建立的RT-LAMP方法简便、快速、灵敏、特异,适合在基层进行禽新型黄病毒的快速检测。
- 李兆龙陈仕龙林锋强王劭程晓霞朱小丽陈少莺
- 关键词：RT-LAMP
