广西壮族自治区自然科学基金(0991219)
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 相关作者：吴健敏覃绍敏白安斌马玲陈凤莲更多>>
- 相关机构：广西兽医研究所广西大学军事医学科学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科技攻关计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪细环病毒的检测及与多种病原混合感染的调查分析被引量：10
- 2013年
- 为了解细环病毒(Torque teno virus,TTV)在广西猪群中的感染情况,本研究运用Nest-PCR方法,对2009—2011年采自广西140个规模猪场的156份血液、流产胎儿及肺脏、脾脏、肾脏、肝脏、淋巴结等组织样品进行检测,并对阳性样品的非编码区(UTR)进行克隆测序及遗传进化分析;同时对部分样品进行猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、典型猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)检测及细菌的分离鉴定。结果发现,广西猪群中TTV总感染率达到93.6%,TTV2的感染率(76.9%)不仅明显高于TTV1(16.7%),且毒株间遗传变异较大。TTV多与PCV2和PRRSV混合感染,且以与PRRSV混合感染率更高(64.29%)。猪群中存在2重、3重,甚至4重TTV与其他病毒的混合感染。临床上TTV与细菌的混合感染(或细菌继发感染)以链球菌和副猪嗜血杆菌多见。本研究证实在广西猪群中存在TTV感染,且存在普遍的TTV与PRRSV、PCV2和CSFV混合感染。
- 韦建兴梁兆强欧阳康白安斌覃绍敏钟雅婷韦丽丽陆芹章吴健敏
- 新生仔猪感染PRV、PRRSV和PPV的诊断被引量：1
- 2016年
- 为了对广西隆安县某小型猪场发病仔猪进行确诊,运用PCR诊断技术,综合细菌学检测结果和临床症状分析,判断本次疫情为猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪细小病毒(PPV)混合感染引起。检测结果提示该场存在PRV、PRRSV、PPV等病毒在临床上严重的混合感染,对新生仔猪危害很大,应采取综合的防控措施才能有效控制病情。
- 李常挺陆以全姜佳佳吴健敏
- 抗PRRSV双功能单链抗体基因的构建、序列分析及蛋白结构预测
- 2015年
- 为构建抗PRRSV与抗人红细胞单链抗体(2E8-Sc Fv)融合的双功能单链抗体基因并预测其结构和功能,本研究以PRRSV杂交瘤细胞株为模板,通过RT-PCR和SOE-PCR构建PRRSV-Sc Fv基因,将其重组到2E8-Sc Fv C端构建双功能单链抗体基因并测序分析,利用生物信息学软件预测其结构功能。结果显示,成功获得长735 bp的PRRSV-Sc Fv基因,由Linker、VH和VL组成,VH、VL均含明确的CDR和FR区及特征性Cys,与多种鼠源Sc Fv基因高度同源,具有重组功能性鼠源抗体可变区特征,与2E8融合后形成全长1 470 bp的2E8-PRRSV-Sc Fv基因。经生物信息学分析,融合基因编码490个氨基酸,亲水性评估值为-0.365,为亲水性蛋白;结构预测分析显示,其存在丰富的二级结构,可折叠形成含有多个沟槽结构的空间构象,利于抗原的结合,理论上具有良好的抗原结合活性。本研究成功构建抗PRRSV双功能单链抗体基因并对其编码的蛋白质结构进行了预测,为今后进行融合蛋白的表达及最终研究PRRSV抗原快速检测方法奠定基础。
- 刘金凤吴健敏杜毅超覃绍敏林俊马玲白安斌陈凤莲饶桂波
- 关键词：蛋白结构预测
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5和M基因重组腺病毒的构建及表达被引量：2
- 2012年
- 为构建猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组腺病毒活载体疫苗,本研究将PRRSV GP5和M基因串联表达盒定向克隆至穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA多克隆位点处,获得重组穿梭质粒pacAd5CMVK-NpA-GP5-M,与骨架质粒pacAd5 9.2-100共转染293AD细胞,包装出含有GP5和M基因的重组腺病毒rAd5-GP5-M。应用PCR技术、间接免疫荧光、Western blot分析,结果表明,GP5和M基因已经被成功整合到了腺病毒基因组上,且GP5和M蛋白在293AD细胞上均得到了表达;滴度测定表明,该重组腺病毒rAd5v-GP5-M的TCID50为10-6.5/mL;连续传代试验表明该重组腺病毒可在细胞内稳定繁殖,有效地转录并表达GP5和M蛋白,具有较高的遗传稳定性。该研究为PRRSV重组腺病毒疫苗的研制打下了基础。
- 高博马玲张念毛燕陈凤莲张守峰刘烨张菲扈荣良吴健敏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因M基因重组腺病毒
- 新生仔猪大批死亡疫情诊断及HP-PRRSV的分离鉴定被引量：7
- 2016年
- 本试验通过对高发病率、高死亡率的新生仔猪腹泻病例进行诊断与控制,以期为该病的防控提供参考和借鉴。2013年1月初广西玉林某规模猪场发生以2-3日龄仔猪腹泻、呕吐、精神不振为主的疫情,发病率80%,死亡率80%-100%。为确定此次疫病的病因,本研究从发病猪群中采集10份病死猪小肠、脾脏、肺脏、淋巴结等组织进行细菌分离、PCR检测、病毒分离、病毒效价（TCID50）测定、基因测序与分析。检测结果显示猪流行性腹泻病毒（PEDV）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）均为阳性,猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）和猪轮状病毒（PRoV）均为阴性,未分离到致病菌。克隆测序分离株的ORF7和Nsp2全基因序列,结果显示分离株为美洲型PRRSV,ORF7基因全长为372bp,编码123个氨基酸;Nsp2基因全长为2 850bp,编码950个氨基酸,其中Nsp2基因在第481、532—560位发生了共30个氨基酸的不连续缺失,与高致病性PRRSV（HP-PRRSV）JXA1株Nsp2基因缺失特征一致,属于HP-PRRSV分离株。匀浆病料接种Marc-145细胞,48h开始出现PRRSV特征性病变,TCID50为10-5.75/0.1mL。推测此次新生仔猪大批死亡主要是PEDV感染后继发高致病性猪繁殖与呼吸综合征所致。
- 陈冰马玲刘金凤林俊张健吴健敏白安斌
- 关键词：新生仔猪猪流行性腹泻病毒高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒
