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DNA-EGS1386胞内诱导核酶P抑制人巨细胞病毒UL49基因的表达被引量：1: 2009年; 外部引导序列(EGSs)是一类与mRNA靶序列互补并能引导核酶P切割靶mRNA的小分子RNA。本实验构建稳定表达UL49基因的HeLa细胞系,设计合成了针对于人巨细胞病毒(HCMV)UL49基因的12ntDNA性质的EGS1386,通过转染稳定表达UL49基因的细胞系,荧光定量PCR和Western blotting检测细胞内目的基因UL49的表达情况。结果显示在DNA-EGS1386作用下UL49基因的表达量降低了50%,表明DNA-EGS1386可以有效引导人的核酶P切割目标mRNA。因此,DNA-EGS可以发展成为一种新的基因沉默技术和潜在的抗病毒试剂。; 崔延伟曾志锋李弘剑李月琴周琪杨丹邹奕杨光周天鸿; 关键词：基因沉默

人巨细胞病毒Merlin株全基因组的重叠基因结构与功能分析: 2011年; 目的分析人巨细胞病毒（HCMV）merlin株全基因组存在ORF重叠的基因,揭示HCMV重叠基因的结构与功能特征.方法应用生物信息学方法搜索HCMV Merlin全基因组中的ORF重叠基因,分析HCMV merlin株重叠基因的编码序列CDS和ORF起止位点,计算CDS和ORF的长度,编码蛋白的相对分子质量,重叠长度,蛋白编码方向,确定重叠序列,重叠类型,分析重叠基因的表达时相和编码蛋白的功能.结果 HCMV merlin株存在39个重叠ORF的基因,占全基因总数的23%,39个ORF重叠基因之中有13个IE基因,9个E基因,17个L基因,可分为16个重叠群,2个基因重叠的有11个重叠群,3个基因相互重叠的有3个重叠群,4个基因相互重叠的有2个重叠群,重叠基因功能广泛.结论 HCMV Merlin株中存在大量的复杂的重叠基因,为进一步研究重叠基因的转录和翻译调控机制奠定了基础.; 杨光李月琴邹奕张欣周天鸿; 关键词：巨细胞病毒基因组生物信息学

人类巨细胞病毒HCMV UL49区域一个新转录本的发现: 2010年; 将人类巨细胞病毒HCMVTowne株接种至人包皮成纤维细胞(HFF)中,收集病毒感染后的细胞,抽提病毒RNA,运用RT-PCR技术扩增基因的序列,对PCR产物作TA克隆,重组体进行测序和生物信息学分析。结果表明,HCMV的UL49区域存在一个新转录本,暂命名为UL49X。将所获得的序列与HCMV基因组比对分析表明,UL49X序列为68783bp到78608bp处的基因片段,并发现从69194bp到71530bp处有个典型的内含子。; 廖文镇杨光李月琴张欣邹弈李弘剑周天鸿; 关键词：HCMV RT-PCR

腺病毒介导的人巨细胞病毒UL49基因小鼠模型的建立被引量：1: 2010年; 建立表达HCMVUL49基因的转基因小鼠,为抗病毒药物研究提供有效的实验动物模型。将UL49-GFP基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316中,构建重组质粒pDC316-UL49-GFP,与腺病毒骨架质粒pBHGloxΔE1,3Cre通过脂质体介导共转染293细胞,重组产生腺病毒Ad-UL49-GFP,经PCR和Western blot鉴定正确后,大量扩增、纯化,制备高滴度重组腺病毒。纯化腺病毒经尾静脉注射感染小鼠,通过荧光定量PCR和Western blot方法,检测UL49基因在小鼠体内组织分布和表达时相。结果显示UL49基因在小鼠的心、肝、脾、肺、肾组织均有表达,并且表达量由高到低顺序依次是:肝、脾、肾、心、肺,在腺病毒感染第3天在各靶器官表达水平较高,此后逐渐下降,第14天时仅存在肝和脾中。表明表达UL49基因的小鼠模型构建成功。小鼠模型的成功建立为下一步筛选以UL49基因为靶的抗病毒药物奠定了基础。; 杨丹崔延伟李弘剑李月琴周琪曾志锋张欣杨光周天鸿; 关键词：人类巨细胞病毒腺病毒载体动物模型

HCMV既往感染对大学生神经行为的影响: 2011年; 目的探讨巨细胞病毒（HCMV）既：往感染与大学生神经行为特征之间的关系。方法招募87名在校大学生，采用伯乐．神经行为测试评价系统（B．NES）进行测试，同时采血分离血清检测受试对象的HCMVIgG抗体，采用SPSS软件对B．NES测试结果进行统计分析。结果有76人既往感染过巨细胞病毒，11人未感染过，巨细胞病毒的感染率为87．36％。既往感染HCMV的大学生在情感状态测试的“忧郁沮丧”方面得分为8．89±6．60，低于未感染的大学生组（15．73±9．00），差异有统计学意义（P〈0．05）；在情感状态测试的其他方面、学习记忆、感知与心理运动方面感染组和对照组均差异无统计学意义（P〉0．05）。结论既往感染HCMV与抑郁的情感状态水平的降低存在关联。; 杨光李月琴荆春霞卜晨峰高劲黎哲赖利丹朱玮玮周天鸿; 关键词：巨细胞病毒神经行为学表现

改进型外部引导序列抑制人巨细胞病毒UL49基因的表达(英文)被引量：1: 2009年; 外部引导序列(EGS)技术(The EGS-based technology)是一种新型的基因沉默技术,能诱导内源性的核酶P(RNase P)对靶mRNA进行有效切割.以人类巨细胞病毒(HCMV)UL49基因mRNA片段为靶序列,基于前人实验基础上设计出更为精简与高效的改进型EGS(miniEGS),DNA片段长度仅为12bp.构建稳定表达HCMVUL49的细胞系,通过应用荧光定量PCR及Western印迹分别鉴定miniEGS对内源性UL49的抑制效率.结果显示,miniEGS能在HeLa细胞中能达到很高的转染效率(97.9%),并且在转染稳定表达UL49的HeLa细胞系后,发现UL49基因的mRNA与蛋白表达水平都出现明显下降(50%).研究表明,改进型的EGS序列不仅能有效抑制目的基因的表达,同时因其序列设计的精简性与高效性,可更好地应用到以后的抗病毒研究中.; 周琪曾志锋李弘剑李月琴崔延伟杨丹邹奕杨光周天鸿; 关键词：人巨细胞病毒基因沉默

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中国博士后科学基金(20080430845)