国家自然科学基金(30770759)
- 作品数：15 被引量：29H指数：3
- 相关作者：孙保亮杨明峰张颜波袁慧谢方民更多>>
- 相关机构：泰山医学院附属医院济宁市第一人民医院济宁医学院附属湖西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省教育厅科技计划山东省中医药科技发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 蛛网膜下腔出血大鼠脑内蛋白质经淋巴引流的荧光示踪被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨蛛网膜下腔出血（SAH）大鼠脑实质内大分子物质经淋巴引流的变化.方法 将健康成年雄性Wistar大鼠分为生理盐水组、伊文思蓝标记白蛋白（EBA）组、SAH＋EBA组.采用枕大池两次注入自体动脉血法建立SAH模型,应用改良的脑实质微量注射技术将EBA注入大鼠左侧尾壳核,生理盐水组用生理盐水代替EBA.于注射后0.5、1、2、3、5 d处死动物,观察并比较各组不同时间点EBA在脑内、颈总动脉壁、颈部淋巴结等部位的分布.结果 EBA组于注射后1 d荧光信号首先出现在左侧脑实质、侧脑室及其血管周围,并逐步到达对侧;双侧颈总动脉外膜有密集的荧光信号,颈部淋巴结可见荧光信号.2 d后脑内荧光信号明显减弱,嗅球内荧光信号逐渐增强,腹主动脉旁淋巴结内有点状荧光信号.各淋巴结内荧光均于3 d时最强.SAH后脑内EBA引流至嗅球、颈部淋巴结和腹主动脉旁淋巴结的量减少且速度减慢.于0.5、1、2、3、5 d,EBA组颈深淋巴结EBA荧光密度分别为14.5±3.2、27.5±7.4、60.3±12.3、138.0±12.0和108.1±13.4,SAH＋EBA组分别为8.9±2.0、11.9±2.5、17.4±3.7、26.7±4.5和59.0±8.1,后组各时间点密度均低于前组（F=13.17、24.04、66.81、302.77、59.36,P＜0.01）;2、3、5 d,EBA组腹主动脉旁淋巴结EBA荧光密度分别为26.3±5.9、47.5±9.6和41.0±9.3,SAH＋EBA组分别为11.0±1.5、12.5±2.8、23.6±3.2,后组各时间点均低于前组（F=38.17、72.52、19.01,P＜0.01）.结论 SAH可导致脑内大分子物质经淋巴系统引流的功能障碍.
- 孙保亮贾莉杨明峰袁慧张颜波孙田歌
- 关键词：蛛网膜下腔出血大分子物质淋巴系统
- 不同给药方式下降钙素基因相关肽在蛛网膜下腔出血大鼠的组织分布被引量：2
- 2015年
- 目的探讨经鼻给药、经静脉给药降钙素基因相关肽（CGRP）在蛛网膜下腔出血（SAH）大鼠的组织分布。方法采用枕大池两次注入新鲜自体动脉血的方法建立SAH大鼠模型，64只大鼠按随机数字表法分为4组：（1）A组（n=16）：经鼻给予125I标记的CGRP（125I-CGRP）处理正常大鼠；（2）B组（n=16）：经鼻给予125I-CGRP处理SAH模型大鼠；（3）C组（n=16）：经股静脉给予125I-CGRP处理正常大鼠；（4）D组（n=16）：经股静脉给予125I-CGRP处理SAH模型大鼠。采用放射性同位素示踪法比较处理30rain后各组大鼠CGRP的组织分布。结果经鼻给予125I-CGRP后，正常大鼠和SAH模型大鼠各脑区、颈髓和脑脊液的CGRP浓度均显著高于经静脉给药，而血液、甲状腺、颈深淋巴结、肝和肺组织CGRP浓度均显著低于经静脉给药（均P〈0．05）。经鼻给药后以嗅球的CGRP浓度最高，其次为脑脊液和颈髓。结论经鼻给药和经静脉给药CGRP具有组织分布差异性，在中枢神经系统的药物治疗上经鼻给药具有显著优势。
- 吴庆建孙树印宋大庆张颜波闫承军孙保亮
- 关键词：降钙素基因相关肽中枢神经系统给药鼻内蛛网膜下腔出血
- 经鼻给予降钙素基因相关肽治疗蛛网膜下隙出血后脑血管痉挛
- 目的探讨经鼻靶向中枢导入降钙素基因相关肽(CGRP)对蛛网膜下隙出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)的缓解作用。方法采用枕大池二次注血大鼠SAH模型,将动物随机分为正常组、SAH组、经鼻给0.9%氯化钠注射液(NS)+S...
- 迟淑梅王舰孙保亮
- 关键词：脑血管痉挛鼻腔给药降钙素基因相关肽
- 文献传递
- 经鼻导入rhG-CSF后脑梗死大鼠内源性神经干细胞的增殖与迁移被引量：3
- 2009年
- 目的探讨人重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)经鼻靶向中枢给药对脑梗死大鼠内源性神经干细胞增殖与迁移的调节作用。方法线栓法制作大脑中动脉阻塞模型(MCAO),皮下或鼻腔给予rhG-CSF(60μg/kg)。运用5-溴脱氧尿苷嘧啶(BrdU)标记及免疫组织化学法检测局灶性脑梗死大鼠室管膜及脑室下层(SVZ)神经干细胞的增殖。结果正常组及假手术对照组大鼠SVZ区域散在少量BrdU阳性细胞;术后7 d和14d,脑梗死组大鼠SVZ区BrdU阳性细胞数明显增加;rhG-CSF组BrdU阳性细胞数进一步增加;经鼻给药组的BrdU阳性细胞数明显高于相应时间点的皮下用药组(P<0.01)。结论rhG-CSF鼻腔给药可以促进脑梗死后大鼠内源性神经干细胞的增殖和靶向迁移。
- 何美清刘喜梅孙保亮
- 关键词：粒细胞集落刺激因子梗塞大脑中动脉干细胞鼻内
- 经鼻靶向给予降钙素基因相关肽对蛛网膜下腔出血后海马区细胞凋亡的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探讨经鼻靶向中枢给予降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对海马细胞凋亡和脑损伤的作用。方法枕大池2次注血法制作蛛网膜下腔出血(subarach-noid hemorrhage,SAH)模型。将48只♂Wistar大鼠随机分为正常对照组、SAH组、生理盐水(NS)+SAH组(经鼻给予NS)、CGRP+SAH组(经鼻给予CGRP),每组12只。于第2次注血3 d后,采用免疫荧光技术检测海马组织中Bcl-2和caspase-3的蛋白表达。结果免疫荧光染色显示Bcl-2和caspase-3在正常对照组大鼠海马组织中只观察到极少量表达;SAH组、NS+SAH组Bcl-2和caspase-3蛋白表达明显增多;与SAH组和NS+SAH组相比较,经鼻给予CGRP治疗后,Bcl-2表达显著升高,caspase-3表达水平显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 CGRP经鼻靶向中枢给药能有效抑制SAH大鼠海马组织细胞凋亡,对脑损伤具有显著保护作用。
- 迟淑梅王泽民张利章晓英陈洁芳孙保亮
- 关键词：蛛网膜下腔出血鼻腔给药降钙素基因相关肽脑损伤
- 粒细胞集落刺激因子经鼻给药对大鼠脑梗死后的促血管新生作用被引量：3
- 2013年
- 目的探讨经鼻腔给予粒细胞集落刺激因子（G．CSF）对急性脑梗死后血管新生的影响。方法sD大鼠采取线栓法制作大脑中动脉闭塞模型（MCAO），按照投币法（随机数字表示法）将Sprague．Dawley大鼠随机分为假手术组、模型对照组、鼻腔给生理盐水组（INNS组）、皮下给药组（IHG．CSF组）、鼻腔给药组（ING—CSF）组。再灌注后72h对各组大鼠进行神经行为学评分，通过TTC染色测量脑梗死体积，用荧光免疫法检测血管内皮生长因子在脑内的表达并计数脑内新生血管密度。结果在脑缺血72h点ING—CSF组的神经功能评分[（3．90＋1．65）分]与IHG—CSF组[（10．55＋2．19）分]相比有显著改善，差异有统计学意义（P〈0．01）；ING-CSF组的脑梗死体积[（20．01±3．30）％]明显减小，与IHG-CSF组[（33．48±4．49）％]相比有统计学意义（P〈0．01），INNS组[（60．20＋7．72）％]与模型组[（61．496．41）％]相比差异无统计学意义（尸〉0．05）；ING-CSF组大鼠脑内VEGF表达（荧光密度）为33．352．79，较模型对照组（21．48_＋2．65）、INNS组（21．482．65）、假手术组（5．811．08）、IHG-CSF组（25．012．09）明显增加，微血管密度显著增加（P〈O．06）。结论经鼻给予G-CSF对于脑梗死的治疗具有显著的神经保护作用，并可显著促进血管新生。
- 韩翔宇于永梅何美清张颜波杨明峰孙保亮
- 关键词：粒细胞集落刺激因子脑梗死血管新生鼻腔给药
- 脑脊液中大分子物质经淋巴途径引流评估方法的建立被引量：1
- 2010年
- 目的探讨大鼠脑脊液(CSF)中大分子物质经淋巴途径引流的评估方法。方法采用颈淋巴管结扎和颈淋巴结摘除法制作大鼠颈部淋巴引流阻断(CLB)模型,将动物分为非CLB组和CLB组。将125I标记的人血清白蛋白(125I-HSA,CSF示踪剂)注入大鼠左侧脑室,在24h内连续取动脉血样,并检测血浆中CSF示踪剂125I-HSA的浓度。根据药代动力学一室模型的基本原理,绘制浓度-时间曲线,计算出125I-HSA从CSF转运至血浆的浓度-时间曲线下面积(AUC)、血浆中125I-HSA的最大浓度(Cmax)、转运速率常数(Ka)、浓度达峰时间(Tmax)等药代动力学参数,根据两组的差值推算出大鼠CSF示踪剂经淋巴引流途径清除的AUC、Cmax、Ka和Tmax。结果大鼠CSF示踪剂125I-HSA经淋巴引流途径清除的AUC、Cmax、Ka分别为51.97mg·L-1·h-1、2.91mg·L-1、0.64h-1,分别占经蛛网膜绒毛和淋巴引流两条途径清除的AUC、Cmax、Ka的71.53%、44.02%、58.18%。CLB组Tmax(8.36±0.82)h长于非CLB组(3.57±0.54)h。结论成功建立了大鼠CSF中大分子物质经淋巴途径引流的评估方法,经淋巴途径的引流在大鼠CSF大分子物质清除中具有重要作用。
- 孙保亮贾莉孙田歌杨明峰袁慧王彦辉高允生
- 关键词：脑脊液大分子物质引流淋巴
- CGRP经鼻用药促进蛛网膜下腔出血后脑血供和VEGF表达被引量：4
- 2009年
- 目的探讨经鼻给予降钙素基因相关肽(CGRP)对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血供和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法将Wistar大鼠随机分入正常对照组、SAH组、经鼻生理盐水(NS)+SAH、经鼻CGRP+SAH组。用枕大池两次注入自体动脉血法制作SAH模型,CGRP和NS经鼻腔给予。用激光多普勒血流计检测皮层局部脑血流量(rCBF)动态变化;于第2次枕大池注血后3d,将大鼠处死取脑制作冰冻切片,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测大脑皮层VEGF蛋白表达。结果解剖学观察表明SAH模型制作成功。SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层rCBF持续下降,经鼻CGRP+SAH组大脑皮层rCBF下降的程度较轻。第2次枕大池注血后3d,SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层VEGF蛋白表达增多,经鼻CGRP+SAH组大鼠大脑皮层VEGF蛋白表达进一步增强。结论CGRP经鼻用药可缓解SAH脑血供下降,并促进血管新生。
- 孙保亮申发平曹明志杨明峰袁慧张颜波谢方民
- 关键词：经鼻给药蛛网膜下腔出血脑血管痉挛
- 经鼻导入rhG—CSF对脑梗死大鼠皮层FasL和HO-1表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的探讨经鼻靶向中枢导入重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对脑梗死大鼠皮层Fas配体（FasL）和血红素氧合酶-1（HO-1）表达的影响。方法将60只大鼠按随机数字表法分为正常组、假手术组、脑梗死组、脑梗死＋皮下注射rhG—CSF组、脑梗死＋经鼻导人生理盐水组、脑梗死＋经鼻导入rhG—CSF组。线栓法制作大鼠可逆性大脑中动脉阻塞（MCAO）模型，2h后再灌注。于MCAO模型制作成功后1d、3d制备脑组织冠状冰冻切片，用免疫荧光染色检测FasL和HO-1在缺血半暗带皮层的表达，激光共聚焦显微镜采集图像并计数阳性细胞数。结果正常组和假手术组大鼠脑组织中见极少量FasL和HO—1阳性细胞．两组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。脑梗死组大鼠FasL和HO-1阳性细胞数明显增加（1d时较3d时高），表达区域主要为缺血半暗带皮层，与脑梗死＋经鼻导人生理盐水组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。经鼻给予rhG—CSF治疗后脑梗死大鼠脑组织内FasL阳性细胞表达下降．HO—1阳性细胞表达进一步上调，与脑梗死＋皮下注射rhG—CSF组大鼠比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论经鼻靶向中枢导入rhG—CSF可以通过降低FasL、上调HO-1表达抑制脑梗死大鼠缺血半暗带皮层神经元凋亡，参与脑保护机制。
- 何关清孙保亮张颜波刘文健程子翠韩翔宇杨明峰刘喜梅
- 关键词：脑梗死人重组粒细胞集落刺激因子FAS配体血红素氧合酶-1鼻腔给药
- 降钙素基因相关肽经鼻给药对蛛网膜下腔出血后大脑皮层细胞损伤的影响被引量：3
- 2010年
- 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)经鼻用药对蛛网膜下腔出血(SAH)后脑损伤的影响。方法将Wistar大鼠随机分为正常对照组、SAH组、经鼻生理盐水(NS)+SAH、经鼻CGRP+SAH组。用枕大池2次注入自体动脉血法制作SAH模型,CGRP和NS经鼻腔给予。于第2次枕大池注血后3 d,将大鼠处死取脑制作冰冻切片,用TUNEL法检测大脑皮层原位细胞凋亡,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜检测大脑皮层Bcl-2蛋白表达。结果解剖学观察表明,SAH模型制作成功。SAH组和经鼻NS+SAH组大脑皮层出现大量TUNEL阳性细胞,经鼻CGRP+SAH组大脑皮层TUNEL阳性细胞较经鼻NS+SAH组减少。SAH组和经鼻NS+SAH组大鼠大脑皮层Bcl-2蛋白表达明显增多,经鼻CGRP+SAH组大鼠大脑皮层Bcl-2蛋白表达较经鼻NS+SAH组增强。结论经鼻应用CGRP可减轻SAH后脑损伤。
- 孙保亮迟淑梅杨明峰张颜波袁慧
- 关键词：降钙素基因相关肽经鼻给药蛛网膜下腔出血脑损伤
