河南省医学科技攻关计划项目(201003005)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：丁一乐晓萍郭林霞郭志军柴玉荣更多>>
- 相关机构：郑州大学新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目更多>>
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- 胃癌细胞中再生蛋白Ⅰ基因第2内含子的调控功能
- 2013年
- 目的：观察胃癌细胞中再生蛋白Ⅰ （Reg Ⅰ）基因第2内含子的调控功能.方法：分别从人外周血、胃癌细胞BGC823和SGC7901中提取基因组DNA,克隆Reg Ⅰ第2内含子.构建荧光素酶报告载体pGL4-Human-intron 2、pGL4-BGC823-intron 2和pGL4-SGC7901-intron 2,分别转染胃癌细胞BGC823和SGC7901,荧光检测仪检测荧光素酶活性.结果：RegⅠ基因第2内含子序列与GenBank公布的序列基本一致,但517～531的腺嘌呤A在不同来源的DNA中有差异重复.重组质粒转染胃癌细胞中的萤光素酶活性均高于对照组；转染胃癌细胞来源的intron 2重组质粒,荧光素酶活性低于转染人来源的intron 2.胃泌素孵育后,荧光素酶活性无明显改变.结论：胃癌细胞中Reg Ⅰ第2内含子具有促进基因表达的功能.
- 柴玉荣郭志军丁一
- 关键词：内含子胃泌素胃癌细胞
- 胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应
- 2013年
- 目的探讨胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ(Reg Ⅰ)基因转录因子的效应。方法应用巢式PCR技术从胃癌细胞SGC7901基因组DNA扩增Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段,将该片段插入pMD19-T载体,序列分析鉴定。应用随机引物法以地高辛分别标记1414bp及其HindⅢ酶切800bp和614bp片段,经灵敏度检测后,作为探针。应用Genomatix MatInspector在线分析软件分析Reg Ⅰ基因启动子1414bp片段的转录因子结合位点。分别以10-7mol/L和10-8mol/L胃泌素G-17处理胃癌细胞SGC7901 48h,提取核蛋白。应用DNA-蛋白质印迹法(Southernblotting),分别以地高辛标记的1414bp、800bp和614bp片段为探针检测胃泌素对胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因转录因子的效应。结果 1414bp探针可检测到20条蛋白主带。胃泌素孵育后,带型没有变化,但是一些条带的灰度值改变,带9、12、13、14、15和16的灰度值明显降低(P<0.05);不同浓度胃泌素处理组之间上述6个条带的灰度值差异不明显(P>0.05)。614bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和13,胃泌素处理后,此3条主带的灰度值明显降低(P<0.05)。800bp探针可检测到灰度值变化的6条主带中的带9、12和14,胃泌素处理后,仅带14的灰度值明显降低(P<0.05)。614bp和800bp探针均未检出带15和带16。结论胃癌细胞SGC7901 Reg Ⅰ基因表达由多个转录因子协同调控。降低几个转录因子的结合活性可能是胃泌素上调胃癌细胞SGC7901Reg Ⅰ基因表达的途径之一。
- 吴艳芳郭林霞乐晓萍丁一
- 关键词：REG胃泌素转录因子胃癌细胞
