国家教育部博士点基金(20100101110102)
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 相关作者:杜爱芳陈学秋周前进张红丽马羽洁更多>>
- 相关机构:浙江大学更多>>
- 发文基金:国家教育部博士点基金中央高校基本科研业务费专项资金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 捻转血矛线虫三期幼虫抗干燥的差异表达基因的研究
- 捻转血矛线虫感染性三期幼虫对干燥作用具有很强的抵抗力,够克服恶劣的干燥环境而存活,环境适宜时可恢复到正常状态并继续感染宿主是造成该病难以有效控制的重要原因。为研究捻转血矛线虫感染性三期幼虫抵抗干燥的的分子生物学机制,我们...
- 陈学秋周前进闫宝龙杨怡张红丽杜爱芳
- 文献传递
- 利用mRNA差异显示技术分离捻转血矛线虫感染性三期幼虫抗干燥相关基因被引量:1
- 2013年
- 捻转血矛线虫感染性三期幼虫对干燥环境具有很强的抵抗力,环境适宜时可恢复到正常状态并继续感染宿主。为初步探讨捻转血矛线虫感染性三期幼虫抗干燥的分子机制,试验对该期幼虫施以不同干燥条件的处理,筛选出虫体存活率达到90%的干燥条件。在筛选到的条件下(相对湿度为50%,时间为60h)处理虫体,采用mRNA差异显示技术分析干燥环境下培养的虫体和正常虫体的mRNA表达差异。经验证获得了48个差异表达的EST序列,其中25个(52.08%)序列与现有捻转血矛线虫基因组数据库有高度同源性;15个(31.25%)序列与已知线虫的cDNA序列或基因组序列有较高同源性;9个(18.75%)序列与其他线虫已知蛋白质氨基酸序列同源性较高。差异表达序列AF-U01C与多种线虫的蛋白酶体β亚基家族成员同源性达90%,差异表达序列AG-U01A与多种线虫的β酮脂酰CoA硫解酶(3-ketoacyl-CoA thiolase)同源性达65%。结果为进一步研究寄生性线虫抗干燥机制奠定基础。
- 陈学秋马羽洁周前进张红丽杨怡闫宝龙杜爱芳
- 关键词:MRNA差异显示技术
- 利用mRNA差异显示技术克隆分析捻转血矛线虫滞育相关基因被引量:2
- 2012年
- 以培养获得的捻转血矛线虫滞育期虫体及同期正常发育的虫体为研究材料,采用设计的锚定引物和随机引物,通过mRNA差异显示PCR技术对滞育期幼虫的差异表达基因进行了筛选。结果获得了74个滞育期差异表达的基因EST。生物信息学分析表明:29个差异序列与已知的捻转血矛线虫基因组序列具有同源性;14个差异序列与已知线虫的EST具有同源性。同源基因中的rps-30、T24F1.2等已被证明参与了秀丽隐杆线虫的滞育形成。差异序列的克隆为捻转血矛线虫滞育相关基因及滞育形成机制的研究奠定了基础。
- 郑柏玲张红丽周前进陈学秋杜爱芳
- 关键词:捻转血矛线虫滞育MRNA差异显示
- 捻转血矛线虫感染性三期幼虫gst基因的筛选及抗干燥功能分析
- 2015年
- 为研究干燥作用对捻转血矛线虫L3期幼虫mRNA表达的影响,筛选并分析干燥相关表达基因,本试验利用mRNA差异显示技术得到了捻转血矛线虫干燥相关基因,通过相对荧光定量PCR验证所获基因的表达情况,并在秀丽隐杆线虫中通过RNA干扰抑制相关同源基因的表达检测干燥后复苏虫体生存率以研究基因抗干燥功能。结果显示,差异表达序列GH-U02A与已知捻转血矛线虫谷胱甘肽-S-转移酶(GST)氨基酸同源性为94%。对秀丽隐杆线虫Ce-gst-7基因进行RNA干扰后,虫体在干燥后的生存率降低,证明gst基因在线虫中有抗干燥功能。
- 马羽洁陈学秋闫宝龙杨怡郭筱璐杜爱芳
- 关键词:GST