国家自然科学基金(30672049)
- 作品数:3 被引量:5H指数:1
- 相关作者:刘永锋王本刚赵宁程颖石蕊更多>>
- 相关机构:中国医科大学附属第一医院大连大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金卫生行业科研专项更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 应用阿加曲班在体外抑制针对胰岛的即刻经血液介导的炎性反应被引量:1
- 2009年
- 目的探讨凝血酶抑制剂——阿加曲班对胰岛移植后即刻经血液介导的炎性反应(IBMIR)的抑制作用。方法分离、纯化Wistar大鼠胰岛,采用体外循环模型模拟IBMIR,设立空白对照组、对照组与实验组,对照组将血液与胰岛直接混合,实验组在对照组的基础上加入阿加曲班注射液,空白对照组只加入血液,而无胰岛。各组于37℃下循环反应60min后,将内容物通过70μm滤网过滤,将对照组与实验组的过滤残余血栓块和组织经膜式薄层细胞检测(TCT),滤过液进行血常规检测,并以胰岛素释放试验判定其中胰岛的功能。结果实验组滤过液中的血小板数、白细胞数、单核细胞数和淋巴细胞百分数显著高于对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。实验组的胰岛在高糖和低糖的刺激下,胰岛素释放量明显高于对照组,其胰岛素释放指数为3.36±0.18,明显高于对照组的2.25±0.18(P〈0.05)。对照组过滤残余的血栓块和组织中胰岛数量较少,结构破坏严重,被膜不完整,胰岛周围见大量红细胞形成的微血栓包绕,实验组中胰岛数量较多,结构完整,呈团块状,胰岛周围未见明显微血栓形成。结论阿加曲班在体外可以有效抑制针对胰岛的IBMIR,减轻对胰岛细胞的损伤。
- 王本刚程颖石蕊赵宁刘永锋
- 关键词:抗凝血酶类胰岛血液凝固
- RGD肽保护大鼠胰岛活性和功能的实验研究
- 2011年
- 目的探讨RGD肽对分离纯化后的胰岛活性和功能的影响。方法将实验大鼠分成两组:1640组和RGD组。采用Ficoll不连续密度梯度离心纯化胰岛,浓度分别为:27%、25%、23%、20.5%和11%。1周后,用丫啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光染色观察RGD肽对胰岛活性的影响。胰岛素分泌功能检测:采用放免法检测培养液中胰岛素含量,计算胰岛素释放指数(SI)。流式细胞仪检测:caspase-9和磷酸化Akt阳性细胞比例,观察RGD肽对caspase-9及Akt的影响。结果采用改良梯度离心法,平均每只大鼠可获约600IEQ~700IEQ胰岛,YO/EB荧光染色,结果显示刚分离后胰岛活率〉95%。1640组培养1周后胰岛分泌指数为1.64±0.28,RGD组胰岛分泌指数为2.28±0.16,较1640组明显增加,差异具有统计学意义(P〈0.05)。流式细胞仪检测结果表明胰岛1640组培养1周后,激活的caspase-9为(22.66±3.56)%,RGD组激活的caspase-9为(10.54±1.96)%,较1640组明显降低13%,且其差异具有统计学意义(P〈0.05);检测RGD对Akt磷酸化的影响,胰岛1640组培养1周后,Akt磷酸化占(31.47±4.08)%,RGD组磷酸化Akt占(61.054±6.03)%,较1640组明显升高,其差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论RGD可通过Akt/PKB的磷酸化抑制细胞凋亡。
- 张克忠刘永锋张佳林
- 关键词:RGD肽胰岛活性胰岛功能
- 胰岛移植术后立即经血液介导的炎症反应机制被引量:4
- 2010年
- 目的初步探讨胰岛移植术后立即经血液介导的炎症反应(instant blood-mediated in-flammatory reaction,IBMIR)的发生机制。方法Wistar大鼠,雌雄不限,体重为250~300g,分离、纯化胰岛,建立体外循环模型,于37℃下循环反应60min后加入胰岛800当量模拟IBMIR,分别于循环前、加入胰岛前、加入胰岛后5min、15min、30min、60min后留取血液行血常规检测,用酶标法检测血浆凝血酶-抗凝血酶复合物(thrombin-antithrombin complex,TAT),并用酶联免疫吸附法检查血浆补体3a(C3a)含量。循环60min后取过滤残余血栓和组织行形态学检查。结果加入胰岛体外循环60min后血液中的血小板几乎全部耗竭,白细胞及单核细胞减少亦较为明显,但淋巴细胞比例变化不明显。血浆中的TAT、C3a含量随循环时间延长而增加。循环60min后的过滤残余的血栓块和组织中胰岛数量较少,结构破坏严重,被膜不完整,胰岛周围被微血栓包绕,大量中性粒细胞浸润。结论凝血反应、补体激活和白细胞激活可能是导致IBMIR的重要机制。
- 程颖李鹏王本刚石蕊赵宁刘永锋
- 关键词:胰岛移植