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国家自然科学基金(81072710)

作品数：1 被引量：5H指数：1
相关作者：龚苗子郑杰李刚崔湘霖由江峰更多>>
相关机构：北京大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇抑制基因
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤抑制
  • 1篇肿瘤转移
  • 1篇肿瘤转移抑制
  • 1篇肿瘤转移抑制...
  • 1篇转录
  • 1篇转录激活
  • 1篇转移抑制基因
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇基因
  • 1篇SPL
  • 1篇KLF6

机构

  • 1篇北京大学

作者

  • 1篇裴斐
  • 1篇由江峰
  • 1篇崔湘霖
  • 1篇李刚
  • 1篇郑杰
  • 1篇龚苗子

传媒

  • 1篇中华病理学杂...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
KLF6和Spl共同促进肿瘤转移抑制基因1的转录激活被引量：5
2011年
目的探讨肿瘤转移抑制基因1（TMSG-1）的基因转录调控机制。方法PCR扩增TMSG．1转录起始位点上游-271bp与下游＋303bp之间不同长度片段，连入荧光素酶报告基因质粒pGL3-basic，各重组质粒转染后对表达的荧光素酶活性进行检测；对重组质粒pGL3-237插入DNA序列的潜在转录因子结合位点进行定点突变，然后检测其荧光素酶活性的变化；运用凝胶迁移阻滞和染色质免疫共沉淀验证转录因子KLF6和Spl与TMSG-1DNA调控区的相互作用；通过免疫共沉淀实验分析转录因子KLF6和Spl之间的相互作用；对人前列腺癌PC-3M不同转移潜能亚系PC-3M-E8、PC-3M．2134，人肺巨细胞癌PG不同转移潜能亚系PG-BEl、PG-LH7通过荧光定量PCR分析TMSG．1和野生型KLF6mRNA水平；将KLF6真核表达质粒转染PC-3M-284后检测TMSG-1蛋白水平及细胞侵袭能力的变化。结果通过荧光素酶报告基因实验鉴定出TMSG．1基因第1号外显子内存在明显促进基因转录的调控区域＋59～＋123bp。对该区域序列定点突变后重组荧光素酶报告基因表达的荧光素酶活性下降，而共转染未突变的荧光素酶报告基因质粒和KLF6或Spl的真核表达质粒则荧光素酶活性上升，差异具有统计学意义（P〈0．01）。凝胶迁移阻滞和染色质免疫共沉淀结果显示，转录因子KLF6和Spl与该区域特定序列存在相互作用。免疫共沉淀结果验证转录因子KLF6与Spl之间存在相互作用。荧光定量PCR结果显示前列腺癌细胞低转移亚系PC．3M-21M中TMSG-1和野生型KLF6mRNA水平均高于高转移亚系PC．3M-1E8（P〈0．05，P〈0．01），同样肺巨细胞癌低转移亚系PG．LH7中TMSG-1和野生型KLF6mRNA水平均高于高转移亚系PG-BEl（均P〈0．01）。PC-3M-284细胞转染KLF6真核表达质粒后检测到TMSG-1蛋白的增加和细胞侵袭能力的下降。结论前列腺癌细胞中转录因子KLF6与Spl共同作用促进肿瘤转移抑制相关基因
龚苗子由江峰裴斐崔湘霖李刚郑杰
关键词：肿瘤转移转录基因肿瘤抑制细胞系肿瘤
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