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中央高校基本科研业务费专项资金(DUT11SM09)
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
相关作者:
宋克东
朱丽丽
刘天庆
马学虎
石芳鑫
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相关机构:
大连医科大学附属第一医院
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发文基金:
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作者
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崔占峰
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方美云
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石芳鑫
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人自体血清支持脐血源HSCs和MSCs共培养研究
2012年
考察使用cytodex-3微载体共培养人脐带血(UCB)来源的造血干细胞(HSCs)和间充质干细胞(MSCs)的可行性,并评价其应用于未来临床治疗中的可能性.考虑到临床应用的安全性要求,尝试采用采集于UCB的人自体血清(HAS)取代目前广泛使用的胎牛血清(FBS),以期在体外共培养后可同时获得UCB-HSCs和UCB-MSCs.由于MSCs贴附的cytodex-3载体与悬浮的HSCs之间的密度差异,在共培养后自由沉降分离这两种不同类型的干细胞将会十分容易.为优化培养条件,评估了用不同含量的HAS(2.8%、5.6%、8.3%和11.1%)对UCB-MSCs和UCB-HSCs扩增的影响.结果表明,5.6%HAS培养UCB-HSCs最优,扩增倍数达(1.88±0.33)倍,且同时对UCB-MSCs的扩增亦无很大影响.因此,共培养条件下的HAS最佳含量约为5.6%.所研发的共培养体系可为临床应用提供扩增的UCB-HSCs和UCB-MSCs.
宋克东
刘天庆
殷轶群
郭文华
方美云
石芳鑫
朱丽丽
吴筱婷
马学虎
崔占峰
关键词:
脐带血
共培养
脐血造血干/祖细胞与脂肪干细胞共培养的作用距离研究
被引量:1
2011年
设计了一种细胞间距可调的trans well共培养方法,以研究脐带血来源的造血干/祖细胞(HS/PCs)和人脂肪干细胞(human-adipose derived stem cells,h-ADSCs)体外共培养时细胞间作用距离对造血干细胞扩增能力和脂肪干细胞在共培养后干细胞特性的影响。采用不同规格的砂纸打磨孔板的上壁面,经高精度游标卡尺测量,使两种细胞之间的有效接触间距为10--450μm不等。然后以h-ADSCs为基质细胞,分别考察HS/PCs和h-ADSCs在不同的作用距离下的共培养情况。其间每24小时对细胞进行计数,观察细胞形态。培养7天后对MNCs表面抗原CD34+、CFU-GM集落扩增倍数进行了检测;同时也对h.ADSCs表面抗原(CD13、CD29、CD34、CD44、CIM5、CD73、CD105、CD166、HLA-DR)及其多向分化潜能(成骨、成软骨、成脂肪)进行分析以鉴定其干细胞性能。结果表明,通过transwell共培养,细胞之间在作用距离为350gm时HS/PCs的扩增效果最好,其中造血MNCs扩增了15.1±0.2倍,CD34+扩增了5.0±0.1倍:扩增的h-ADSCs表达CD29、CD44、CD166,而不表达CD34、CD45,且在适当诱导条件下可以向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞分化。
宋克东
刘天庆
武爽
郭文华
郝永杰
方美云
石芳鑫
朱丽丽
马学虎
崔占峰
关键词:
脂肪干细胞
造血干
祖细胞
TRANSWELL
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