转基因生物新品种培育专项(2008ZX08003-001)
- 作品数：5 被引量：30H指数：3
- 相关作者：郎志宏黄大昉朱莉张晓东张立全更多>>
- 相关机构：中国农业科学院生物技术研究所东北农业大学中国农业科学院植物保护研究所更多>>
- 发文基金：转基因生物新品种培育专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 转基因植物外源基因的整合分析被引量：6
- 2009年
- 外源基因表达的不稳定性和多样性是制约转基因作物育种研发进度的关键因素,外源基因的整合情况与外源基因的表达直接相关,充分了解外源基因的整合情况可为构建高效表达载体、获得外源基因稳定一致表达转基因材料提供参考,同时为转基因作物的安全利用提供保障。就外源基因整合情况的分析方法、不同转化方法外源基因的整合特点及利用定点整合技术提高外源基因表达稳定一致性的研究进展作一概述。
- 岳同卿郎志宏黄大昉
- 关键词：转基因植物
- 分子标记技术在玉米种质类群划分中的应用被引量：1
- 2015年
- 玉米种质资源是玉米产业发展的前提和基础,但优质资源匮乏已成为当前玉米育种工作的瓶颈。综述了玉米种质资源类群划分在表型水平和分子水平上的4种方法,指出分子标记技术在玉米种质类群划分中的优势及其进一步改良的措施,并对该技术在未来玉米种质资源划分中的广泛应用提出建议和展望。
- 李向龙吴忠义张晓东张中宝张立全
- 关键词：玉米种质资源表型鉴定生化指标分子标记
- 抗虫/耐草甘膦双价融合基因表达载体的构建及烟草转化被引量：3
- 2011年
- 随着植物基因工程的发展,将多个基因转化植株已成为研究的热点之一,利用连接肽进行多个基因融合的策略已引起广泛关注。利用连接多肽2A和LP4/2A分别将抗虫基因Bt(Bacillus thuringiensis,Bt)cry1Ah和耐草甘膦基因mG2-epsps连接起来,构建了4个融合基因表达载体pHAG、pHLAG、pGAH、pGLAH和两个单基因载体pSAh、pSmG2,其中pHAG、pHLAG是Bt cry1Ah基因在前,mG2-epsps基因在后,pGAH、pGLAH是mG2-epsps基因在前,Bt cry1Ah基因在后,分别用2A和LP4/2A作为连接肽,由CaMV35S启动子驱动。利用农杆菌介导法将6个植物表达载体转入烟草,得到再生植株529株。经PCR检测,有261株再生苗为阳性植株,转化率达到49.3%。获得的转基因烟草可用于分析连接肽2A和LP4/2A的剪切效率以及不同基因与连接肽连接位置差异对基因表达的影响。
- 祁伟彦孙鹤周妮朱莉郎志宏黄大昉
- 关键词：转基因烟草
- 利用密码子优化提高Bt cry1Ah基因在转基因玉米(Zea mays L.)中的表达被引量：14
- 2011年
- Bt cry1Ah基因是本实验室从苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)菌株BT8中克隆的一种新型杀虫蛋白基因。在前期工作中已根据植物密码子偏好性对cry1Ah基因进行过一次优化。根据玉米密码子偏好性对cry1Ah基因进行第二次优化,并将两次优化的cry1Ah基因分别构建了pAhmG和pmAhb植物表达载体,利用农杆菌介导法转化玉米自交系综31,分别得到10株和9株阳性转基因玉米植株。通过ELISA、Westernblot检测及生物活性检测,比较不同优化的基因在玉米中的蛋白表达量及抗虫情况。初步结果表明外源基因在玉米植株中可以稳定表达并可以遗传。二次优化基因比一次优化基因在玉米中的蛋白表达量更高,抗虫性更好。表明密码子优化有利于提高外源基因的表达。
- 李圣彦郎志宏朱莉李秀影张杰何康来黄大昉
- 关键词：密码子优化抗虫玉米
- 利用花青素可视化跟踪表达系统快速筛选表达Cry1Ab/c基因的转基因玉米被引量：6
- 2013年
- 以草甘膦抗性基因Epsps为标记基因,在原核Kanr基因两侧引入Cre(环化重组酶)基因识别的Lox-P位点,同时以编码花青素合成转录因子的Bi和Cl基因为可视化选择报告基因,构建了Bt杀虫蛋白基因Cry1Ab/c的可视化跟踪表达载体pBAC9017。用PDS1000/He基因枪转化玉米(Zea mays)自交系501的幼胚和胚性愈伤组织,获得147个草甘膦抗性的玉米再生植株。其中106棵植株获得了结实种子,16棵植株的结实种子有紫红色花青素基因的表达。经PCR检测表明,外源Cry1Ab/c基因已经整合到玉米的基因组中。转基因植株种子蛋白粗提物用BT-Cry1Ab/1Ac金标免疫检测试纸条和ELISA检测,结果表明,Cry1Ab/c在部分转基因植株后代中表达。
- 巴超杰薛静陈绪清杨凤萍张立全李向龙张晓东
- 关键词：花青素BT玉米转基因
