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凡纳滨对虾3个sHSP成员的序列与表达特征分析: 2013年; 通过搜索凡纳滨对虾EST数据库,获得3个包含完整开放阅读框的sHSP cDNA序列。对3个sHSP cDNA和相应蛋白序列进行多序列比对发现,3个sHSP的cDNA序列同源性非常高,均达到95%以上,但在开放阅读框第376 bp之后,3个基因间有多个插入和缺失突变,使编码的蛋白序列在C端有较大差异,sHSP-1与sHSP-2、sHSP-3蛋白的同源性只有86.5%和78.7%。不同物种多个sHSP蛋白序列构建的系统进化树显示,3个sHSP与其他物种的HSP20.6、HSP21.4和HSP Beta亲缘关系都很近,推测不同物种sHSP起源相似,且同一物种的不同sHSP通过基因复制产生。运用荧光定量PCR分析了sHSP-1和sHSP-2基因在凡纳滨对虾不同组织及低温胁迫处理下的表达,结果显示,sHSP-1和sHSP-2均在肌肉组织中优势表达,并在低温诱导对虾肌肉组织中呈上调表达,暗示sHSP基因可能在对虾应对低温时发挥功能。; 彭金霞赵永贞韦嫔媛蒋伟明李咏梅陈秀荔殷勤陈晓汉; 关键词：凡纳滨对虾低温胁迫

不同来源饵料对凡纳滨对虾不同成熟期激素水平和性腺组织的影响: 不同饵料对对虾性腺成熟度和繁殖的影响不同,本研究将每天给试验亲虾分别投喂的5种试验饵料为"亲虾饲料"、"鲢鱼肉"、"鲢鱼肉+水丝蚓+鲢鱼卵"、"水丝蚓...; 蒋伟明陈秀荔吴信李咏梅陈晓汉印遇龙; 关键词：凡纳滨对虾饵料性腺激素

基于卵黄蛋白原基因表达的水丝蚓促熟南美白对虾研究被引量：1: 2014年; 针对传统海产亲虾饵料易感染或携带与对虾共患病毒,给育种和苗种繁育工作带来巨大生物安全隐患的问题,以淡水品种水丝蚓作为替代饵料进行南美白对虾亲虾催熟试验,并以卵黄蛋白原基因的表达水平变化验证饵料的催熟效果。设水丝蚓、水丝蚓组合饵料、商业亲虾饲料及传统沙蚕组合饵料等4个饵料组合,分别投喂南美白对虾后备亲虾,测定繁殖性能相关参数,并通过荧光定量PCR技术对各亲虾肝胰腺和卵巢中VTG的表达水平的变化进行了追踪研究。结果显示,水丝蚓组的性腺增重最高,达1 475%,连续产卵率最大,平均为72.08%,与传统沙蚕组合饵料组无显著差异性(P>0.05)。南美白对虾肝胰腺和卵巢组织中均存在VTG mRNA,在肝胰腺和卵巢中均呈先上升后下降的表达模式;VTG mRNA的表达量能够一定程度上反映对虾的繁殖性能,有希望发展成为亲虾繁殖性能选育指标;水丝蚓在促进亲虾性腺发育方面效果较传统沙蚕饵料组合好,在改善亲虾产卵效果方面基本与沙蚕组合相当,可作为沙蚕替代饵料用于南美白对虾的亲虾强化培育和催熟。; 彭金霞胡睿宇陈晓汉蒋小珍韦嫔媛李咏梅陈秀荔蒋伟明; 关键词：卵黄蛋白原基因表达南美白对虾水丝蚓

凡纳滨对虾钙蛋白酶M、D和B型基因的克隆及序列比较分析: 2016年; 通过克隆凡纳滨对虾钙蛋白酶B(Calpains,Calp-B)、钙蛋白酶D(Calpains,Calp-D)、钙蛋白酶M(Calpains,Calp-M)基因序列,并对其进行生物性息学预测和分析。根据同源比对设计引物,以凡纳滨对虾肌肉组织的c DNA为模板PCR扩增目的基因,克隆测序和拼接。结果:首次获得凡纳滨对虾的Calp-M和Calp-D基因序列,Calp-M、Calp-B和Calp-D3个基因的部分c DNA序列长度分别为597、1739、623 bp,分别含有507、924、232 bp的开放阅读框(ORF),分别编码169、307和77个氨基酸的蛋白前体,分子量为19.350、35.732、9.082 KDa,等电点分别为4.656、6.502、5.522。成功克隆了凡纳滨对虾Calp-M、Calp-B和Calp-D3个基因的部分序列并对其进行了部分生物信息学预测分析,为该基因家族功能的研究提供一定的研究基础。; 朱威霖吕丽红陈秀荔彭敏赵永贞杨春玲蒋伟明邵鹏威陈晓汉; 关键词：凡纳滨对虾钙蛋白酶克隆生物信息学分析

低温处理与常温凡纳滨对虾基因差异表达文库的构建及分析被引量：1: 2014年; 【目的】筛选出对虾耐寒相关基因,为今后进一步研究对虾耐寒分子机理提供科学依据。【方法】利用SSH技术构建低温处理与常温凡纳滨对虾的基因差异表达文库,并通过斑点杂交、克隆测序分析及候选基因RT-PCR扩增等对差减获得的耐寒相关功能基因进行验证。【结果】在构建的正、负文库768个克隆中有152个为低温高表达克隆、331个为常温高表达克隆;将正文库100个克隆拼接可获得ESTs同源群39个,其中已知基因29个,主要涉及能量代谢、表达调控、信号传导、细胞免疫、抗细胞凋零、蛋白质加工及其他基因等;将负文库50个克隆拼接可获得ESTs同源群18个,其中已知基因17个,主要涉及细胞免疫、维持细胞代谢、物质转运、信号传导及其他基因等。经RT-PCR验证,从正文库中筛选出的HSPB1、NGT4和NGT7基因在低温条件下的表达量显著高于常温。【结论】综合运用SSH、斑点杂交、克隆测序和RT-PCR可有效筛选并验证凡纳滨对虾耐寒相关基因,为揭示对虾耐寒分子调控机制奠定基础。; 蒋小珍彭金霞韦嫔媛陈晓汉; 关键词：凡纳滨对虾文库斑点杂交

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广西壮族自治区自然科学基金(2011GXNSFD018020)