国家自然科学基金(30700787C03030301)
- 作品数：9 被引量：45H指数：5
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- 右美托咪啶对异氟醚致新生鼠海马神经细胞凋亡的影响被引量：1
- 2013年
- 目的比较右美托咪啶(Dex)预处理给药和分次给药两种方法对异氟醚(Iso)致新生大鼠海马细胞凋亡的影响。方法将出生后7天(postnatal day7,P7)的SD大鼠随机分成6组:空气+盐水组(Air+NS组)、空气+Dex25μg·kg-1分次给药组(Air+Dex25×3组)、空气+Dex75μg·kg-1预处理组(Air+Dex75组)、异氟醚+盐水组(Iso+NS组)、异氟醚+Dex25μg·kg-1分次给药组(Iso+Dex25×3组)以及异氟醚+Dex75μg·kg-1预处理组(Iso+Dex75组)。前3组吸入空气,后3组吸入0.75%异氟醚6h。Air+NS组、Iso+NS组、Air+Dex75组和Iso+Dex75组在麻醉前20min腹腔内注射生理盐水或75μg·kg-1剂量的Dex;Air+Dex25×3组和Iso+Dex25×3组分别在麻醉前20min,麻醉开始后2h和4h腹腔内重复注射25μg·kg-1剂量的Dex。麻醉结束后用原位末端标记(TUNEL)法检测海马神经细胞凋亡(n=4);用Westernblot检测海马激活型caspase-3蛋白表达变化(n=4)。结果异氟醚能诱导海马CA1区TUNEL阳性细胞数增加391.0%(P<0.001);激活型caspase-3表达增加122.0%(P<0.001)。Iso+Dex25×3组和Iso+Dex75分别减少异氟醚诱导的TUNEL阳性细胞的增加为80.7%(P<0.001)和73.2%(P<0.001);两组均能完全抑制激活型caspase-3表达的增加(P<0.001);两组间无统计学差异(P>0.05)。结论右美托咪啶预处理给药和分次给药都能通过抑制海马细胞凋亡来减轻异氟醚对新生大鼠的脑毒性作用,且两者的抗凋亡效果相似。
- 曾敏婷李玉娟韩雪廖朝霞
- 关键词：异氟醚右美托咪啶海马细胞凋亡
- 异氟醚和七氟醚对新生大鼠脑皮质Caspase-3及微管相关蛋白1B表达的影响被引量：6
- 2011年
- 目的研究同等剂量的异氟醚和七氟醚对新生SD大鼠第一躯体感觉皮质（Primary Somatosensory cortex，SI）Caspase-3表达以及皮质微管相关蛋白1B（microtubule associated protein 1B，MAP1B）表达的不同影响。方法出生后7d（P7）的新生SD大鼠5窝，每窝取11只，随机均分为异氟醚组（Ⅰ组），七氟醚组（S组）和对照组（C组）。各组分别吸人1．1％异氟醚或1．8％七氟醚或空气4h，在麻醉结束后2h每窝各取1只幼鼠灌注取脑，免疫组织化学法检测皮质SI区Caspase-3表达；另外，C组在麻醉处理0h，Ⅰ组和S组分别在麻醉2h，4h每窝各取1只幼鼠取新鲜脑皮质，Western Blot检测MAP1B表达量的变化。结果Ⅰ组和SI区Caspase-3表达分别较对照组增加561．23％（t=4．45，P〈0．01）和194．46％（t=5．17，P〈0．001），Ⅰ组比S组增加124．45％（P〈0．05）；Ⅰ组皮质MAP1B在麻醉2h和4h分别较对照组增加了557．15％（t=16．54P〈0．01）和475．21％（t=32．97，P〈0．01），MAP1B表达量2h与4h相比无统计学差异（P〉0．05）；S组皮质MAP1B在麻醉2h和4h分别较对照组增加了693．11％（t=9．45，P〈0．01）和268．15％（t=2．79，P=0．049），4h组表达量较2h降低了53．65％（P〈0．01）。结论0．5MAC异氟醚比七氟醚诱导更多新生大鼠大脑皮质神经细胞表达Caspase-3，两者均可诱导幼鼠上调大脑皮质MAP1B的表达来启动机体自我修复功能。
- 张静李玉娟付艳妮曾敏婷陈伟强
- 关键词：异氟醚七氟醚CASPASE-3
- 异氟醚和七氟醚对新生大鼠海马细胞增殖及细胞外信号调节激酶1／2表达的影响被引量：9
- 2013年
- 目的研究亚麻醉深度（0．3MAC）的异氟醚和七氟醚对新生大鼠海马齿状回神经细胞增殖以及ERKl／2蛋白磷酸化表达的不同影响。方法72只P7新生鼠按照随机数字表随机分对照组（Con）、异氟醚组（Iso）和七氟醚组（Sev），各组分别吸入空气、0．75％异氟醚或1．2％七氟醚6h。各组动物分别在处理后即刻（DO）（n=6）和处理后3d（D3）（n=6）腹腔注射BrdUl00mg／kg，24h后用免疫组织化学法检测BrdU阳性细胞的数目。另外一些动物在D0天取新鲜海马组织，Westernblot检测激活型Caspase-3和磷酸化ERKl／2蛋白表达的变化（／7,：6）。剩下的动物用来检测血气和血糖的变化（n=6）。组间资料的比较采用单因素方差分析。结果在D0天，IsoD0组[（1332．43±192．70）个／mm2]，SevDO组[（1207．33±139．50）个／mm2]和ConDO组[（1362．40±227．90）个／mm2]3组BrdU阳性细胞数目差异无统计学意义；在D3天，IsoD3组[（604．56±65．77）爪／mm2]比ConD3组[（896．90±78．77）个／mm2]明显减少32．6％（P〈0．05）．而sevD3组『（808．73±41．27）个／mm2]与ConD3组比较差异无统计学意义。在Do天，Iso组Caspase-3表达比Con组增加195％（尸〈0．01），而Sev组只增加74％（尸〈0．05）。Iso组海马磷酸化ERKl／2P44和P42分别较Con组降低了53％（P〈0．01）和47％（P〈0．01）；Sev组磷酸化ERKl／2与Con组比较差异无统计学意义。结论亚麻醉深度异氟醚而非七氟醚通过抑制海马前体细咆增殖而干扰大鼠脑发育，降低海马磷酸化ERKl／2表达可能参与了异氟醚抑制神经细胞增殖的作用。
- 夏淑轩李玉娟张静曾敏婷柳垂亮
- 关键词：异氟醚七氟醚海马神经细胞增殖
- 异氟醚对胎鼠脑原癌基因蛋白Bcl-2／Bax表达及幼鼠空间学习记忆的影响被引量：2
- 2010年
- 目的 研究异氟醚麻醉对胎鼠出生后的学习记忆能力，以及对胎鼠大脑海马CA1区和皮质压部后区（Retrosplenial RS）Bcl-2／Bax表达变化的影响。方法28只孕21d的大鼠以随机数字表法随机分为异氟醚处理组和对照组，每组n=14。异氟醚组使用1．3％的异氟醚处理6h，对照组只使用30％的氧气和70％氮气混合气。使用水迷宫检测出生后28d的幼鼠空间学习记忆能力。免疫组化研究中，处理后2h检测胎鼠大脑皮质RS区和海马CAl区Bcl-2和Bax表达的变化。结果水迷宫实验中，2组隐藏平台试验的逃避潜伏期差异没有统计学意义，但是空间探索试验中异氟醚组在平台所在象限停留的时间明显多于对照组[（42．33±2．31）S，（33．2±2．15）S，t=2．21，P〈0．05]，差异有统计学意义。异氟醚组海马CAl区和皮质RS区Bcl．2的表达高于对照组，Bax的表达低于对照组，Bcl-2／Bax比值高于对照组[海马CA1区（4．40±0．86），（1．31±0．32），t=3．378，P〈0．01；皮质RS区（5．07±1．27），（1．47±0．48），t=2．656，P〈0．05]，差异具有统计学意义。结论1．3％异氟醚处理孕21d的大鼠能改善出生后幼鼠的空间记忆保持能力，并能增加胎鼠大脑皮质RS区和海马CA1区Bcl-2／Bax的比值。
- 李玉娟柳垂亮曾静贤赵一凡
- 关键词：异氟醚
- 异氟醚和七氟醚对新生大鼠皮质凋亡以及Akt和Bcl-xl/Bad表达的不同影响被引量：16
- 2011年
- 【目的】研究相同麻醉深度的异氟醚和七氟醚对新生大鼠皮质神经细胞凋亡以及Akt和Bcl-xl/Bad蛋白表达的影响。【方法】5窝出生后7d(P7)的新生大鼠,每窝取11只(总共55只),每窝随机分为异氟醚组(I组)4只,七氟醚组(S组)4只和对照组(C组)3只。各组分别吸入1.1%异氟醚或1.8%七氟醚或空气4h,在麻醉结束时每窝每组各取一只幼鼠经心脏穿刺抽血检测血气和血糖的变化(n=5);在麻醉结束后2h每窝每组各取1只幼鼠灌注取脑,免疫组织化学法检测顶叶皮质区(PC)Caspase-3表达(n=5);另外,C组在麻醉处理0h,I组和S组分别在麻醉2h,4h每窝各取一只幼鼠取新鲜脑皮质,Westernblot检测磷酸化Akt,以及Akt,Bcl-xl和Bad表达的变化(n=5)。组间资料的比较采用单因素方差分析。【结果】I组Caspase-3阳性细胞数为(27.12±5.22)个/mm2,较对照组[(3.15±0.59)个/mm2]增加751.11%(P<0.001),比S组[(9.05±1.76)个/mm2]增加199.67%(P<0.01);S组Caspase-3表达与对照组比较差异无统计学意义。I组磷酸化Akt表达在麻醉2h较对照组降低66.31%(P<0.01),4h呈回升趋势;S组在2h和4h与对照组无统计学差异。I组Bad表达在麻醉2h较对照组增加162.2%(P<0.05),S组Bad表达在2h和4h与对照组差异均无统计学意义。I组和S组在2h和4hBcl-xl表达与对照组差异均无统计学意义。I组Bcl-xl/Bad比值在麻醉2h较对照组降低42.85%(P<0.01),S组在2h和4h与对照组无统计学差异。【结论】0.5MAC异氟醚比七氟醚诱导更多新生大鼠大脑皮质神经细胞凋亡,异氟醚抑制Akt磷酸化并降低Bad表达,下调Bcl-xl/Bad比值可能是其诱导神经细胞凋亡的机制之一;七氟醚不会影响Akt磷酸化和Bcl-xl/Bad比值。
- 李玉娟柳垂亮王飞陈伟强张静彭书崚
- 关键词：异氟醚七氟醚
- 短时间周期性母婴分离与慢性疼痛对幼鼠空间学习记忆的影响
- 2008年
- 【目的】研究短时间周期性母婴分离、弗氏完全佐剂(CFA)引起的慢性疼痛以及两者合并对幼鼠空间学习记忆行为影响。【方法】20窝新生SD大鼠,10窝无母婴分离,每窝随机取两只分别作为空白对照组(C组)和疼痛组(P组),另外10窝进行母婴分离,每窝随机取2只分别作为母婴分离组(MS组)和母婴分离合并疼痛组(MS+P组)(n=10)。在幼鼠出生后第2天(D2),P组左足底皮下注射CFA20μL;C组注射0.9%生理盐水20μL;MS组左足底皮下注射0.9%生理盐水20μL后每天将幼鼠与母鼠分离10min,从D2持续至D21;MS+P组左足底皮下注射20μLCFA,随后处理同MS组。检测幼鼠在D2和D21的体质量变化;幼鼠从D22至D29进行Morris水迷宫实验(n=10)。【结果】4组幼鼠体重增加类似,差异无统计学意义。Morris水迷宫实验中,P组寻找隐蔽平台的潜伏期比C组延长25.38%[(32.75±2.71)svs(24.28±1.37)s,P<0.05],比MS组(22.92±1.83)s延长47.72%(P<0.01);MS+P组的潜伏期(25.34±3.23)s比P组减少22.61%(P<0.05);MS组、MS+P组与C组的潜伏期无统计学意义;空间探索实验中,各组幼鼠穿过平台所在象限的时间占总游泳时间的比例以及穿过平台所在象限的路径占总路径的比例的差异均有统计学意义(F=4.28,P<0.05;F=3.75,P<0.05)。P组的时间比例和路径比例比C组和MS组减少,而MS+P组比P组延长。【结论】CFA诱导的慢性疼痛损害了幼鼠的空间学习记忆能力,而短时间周期性的母婴分离可以逆转慢性疼痛对幼鼠空间学习记忆能力的损害。
- 李玉娟杨涛王志李艳萍
- 关键词：母爱剥夺疼痛弗氏完全佐剂
- JNK信号通路在异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡的作用被引量：5
- 2013年
- 目的 探讨c-Jun氨基末端激酶（the c-Jun N-terminal kinase,JNK）信号通路对异氟醚诱导新生大鼠海马神经细胞凋亡以及对磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响.方法 48只出生后7d（Py7）的新生大鼠按照随机数的方法随机均分为DMSO对照组（D组）、JNK抑制剂SP600125对照组（SP30组）、异氟醚＋DMSO组（Iso＋D组）和异氟醚＋SP600125组（Iso＋ SP30组）.对照组吸入空气,异氟醚组吸入1.1％异氟醚4h.麻醉前20 min,幼鼠根据分组分别侧脑室注射SP600125 30 μg或者12％ DMS0 5μl.麻醉结束后6h,部分幼鼠灌注取脑,TUNEL荧光染色检测脑海马CA1区神经细胞凋亡（n=6）；部分幼鼠取新鲜脑皮质,Western blotting法检测磷酸化JNK、Bcl-2和Bax蛋白表达的变化（n=6）.组间资料的比较采用单因素方差分析.结果 幼鼠海马CA1区的TUNEL阳性细胞数比较,Iso＋D组[（135.72±21.26）个/mm2]比D组[（24.07±1.35）个/mm2]增加5倍（P＜0.01）；与Iso＋D组相比,Iso＋ SP30组[（42.49±5.56）个/mm2] CA1区的TUNEL阳性细胞数降低了84％ （P＜0.05）.Iso＋D组磷酸化JNK P46表达比D组增加44.1％ （P＜0.01）,而Iso＋ SP30组显著降低了磷酸化JNK P54 （p＜ 0.05）和P46（P＜ 0.01）的表达.Iso＋D组Bax表达比D组增加1.5倍（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达比D组下降42.2％ （P＜0.05）；而Iso＋ SP30组Bax表达下降（P＜0.05）,Bcl-2蛋白表达上调（P＜0.01）.D组与SP30组TUNEL阳性细胞数,磷酸化JNK,Bcl-2和Bax蛋白表达差异均无统计学意义.结论 JNK信号通路激活促进了异氟醚诱导发育期大鼠海马神经细胞凋亡,SP600125通过维持Bcl-2,降低Bax表达产生抑制凋亡作用.
- 沈智文韩雪李玉娟胡楚文廖朝霞柳垂亮
- 关键词：细胞凋亡异氟醚海马
- 右美托咪啶通过抑制p38和JNK活化减少异氟醚诱导的新生大鼠海马神经元凋亡被引量：10
- 2013年
- 目的:探讨右美托咪啶(dexmedetomidine,Dex)对异氟醚(isoflurane,Iso)诱导的新生大鼠海马神经元凋亡的影响及其与p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38)和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)蛋白活化的关系。方法:48只出生后7 d的SD大鼠随机分为对照组(Con组)、Dex组、Iso组和Iso+Dex组。前2组吸入空气,后2组吸入0.75%Iso 6 h。Dex组和Iso+Dex组在麻醉前20 min和麻醉开始后2 h、4 h经腹腔注射25μg·kg-1Dex;Con组和Iso组则在相同的时点注射150μL生理盐水。麻醉结束后使用TUNEL法检测海马神经元凋亡;Western blotting检测海马组织激活型caspase-3、p38、磷酸化p38(p-p38)、JNK和磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达的变化。结果:(1)Iso组海马CA1区TUNEL阳性细胞数较Con组增加447.57%(P<0.01),Dex抑制Iso诱导的TUNEL阳性细胞增加达75.18%(P<0.01)。(2)Iso组海马组织激活型caspase-3的表达比Con组增加126.29%(P<0.01);Dex显著抑制了Iso诱导的caspase-3活化(P<0.01)。(3)Iso组海马p-p38/p38和p-JNK/JNK比值均较Con组明显增加(P<0.01);Dex显著抑制了Iso诱导的p-p38和pJNK表达增加(P<0.01)。结论:Dex能通过减少海马神经元凋亡来减轻Iso对新生大鼠的脑毒性。抑制p38和JNK的磷酸化可能是Dex发挥保护作用的机制之一。
- 王飞李玉娟曾敏婷韩雪戴婕
- 关键词：异氟醚右美托咪啶海马C-JUN氨基末端激酶P38丝裂原活化蛋白激酶
- 右美托咪定对异氟醚引起新生大鼠海马细胞凋亡及CRMP2表达的影响被引量：8
- 2013年
- 目的探讨右美托咪定预处理对异氟醚引起新生大鼠脑发育毒性的保护作用及与坍塌反应调节蛋白-2的关系。方法 60只出生后7 d的SD大鼠,随机分为对照组,右美托咪定预处理对照组,异氟醚组以及异氟醚复合不同剂量右美托咪定(25,50和75μg·kg-1)预处理组。对照组吸入空气,异氟醚组吸入0.75%异氟醚6 h。在麻醉前20 min右美托咪定预处理组腹腔内注射不同剂量的右美托咪定,其他组注射150μL生理盐水。麻醉结束后即刻蛋白质印迹法检测海马激活型caspase-3、磷酸化坍塌反应调节蛋白-2(p-CRMP2)以及坍塌反应调节蛋白-2蛋白表达变化(n=6)。麻醉结束后2 h,TUNEL荧光染色检测海马CA1区神经细胞凋亡(n=4)。结果异氟醚组海马CA1区TUNEL阳性细胞数[(95.20±11.74)个·mm-2]较对照组[(17.80±5.09)个·mm-2]增加了434.99%(P<0.001),右美托咪定75μg·kg-1预处理[(39.57±15.49)个·mm-2]降低了异氟醚诱导的TUNEL阳性细胞数71.87%(P<0.001)。异氟醚组激活型caspase-3表达比对照组增加90.20%(P<0.001),右美托咪定25,50和75μg·kg-1预处理减少caspase-3的表达分别是30.54%,53.71%(P<0.05)和96.71%(P<0.001)。异氟醚增加了新生大鼠海马p-坍塌反应调节蛋白-2/坍塌反应调节蛋白-2比值119.41%(P<0.001),没有改变总坍塌反应调节蛋白-2的表达;右美托咪定50和75μg·kg-1预处理降低异氟醚诱导的p-坍塌反应调节蛋白-2/坍塌反应调节蛋白-2比值增加分别为63.75%(P<0.01)和77.70%(P<0.01),同时分别增加了坍塌反应调节蛋白-2的表达44.30%(P<0.05)和62.13%(P<0.01)。结论右美托咪定预处理能通过减少海马细胞凋亡来减轻异氟醚对新生大鼠的脑毒性作用,抑制坍塌反应调节蛋白-2磷酸化和增加坍塌反应调节蛋白-2的表达可能是保护作用的机制之一,为婴幼儿临床麻醉用药的选择提供参考。
- 曾敏婷李玉娟王飞韩雪柳垂亮
- 关键词：异氟醚右美托咪啶海马
