国家自然科学基金(20176050)
- 作品数：6 被引量：104H指数：4
- 相关作者：梅乐和姚善泾胡升盛清林东强更多>>
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- SA/NaCS-CaCl_2/PMCG微胶囊固定化枯草杆菌HL-1发酵生产纳豆激酶被引量：5
- 2004年
- 制备了海藻酸钠 /纤维素硫酸钠 CaCl2 /聚亚基二胍氯化氢微胶囊 (SA/NaCS CaCl2 /PMCG微胶囊 ) ,并以该微胶囊固定化培养枯草杆菌HL 1用于发酵制备纳豆激酶 ,考察了PMCG对枯草杆菌生长的影响 ,比较了微囊化培养与游离培养过程中的菌体生长、耗糖速率以及纳豆激酶产物分泌能力 .最后经过连续 6批培养 ,酶活可达到 2 4 6 5IU·ml-1,是游离培养过程的
- 梅乐和章小忠艾碧英盛清林东强姚善泾朱自强
- 关键词：纳豆激酶
- 催化吲哚生成靛蓝的细胞色素P450BM-3定向进化研究被引量：17
- 2005年
- 以催化吲哚产生的靛蓝在630nm处具有特殊的吸收峰为高通量筛选指标,将来源于Bacillusmegaterium的细胞色素P450BM-3单加氧酶的基因序列用易错聚合酶链式反应进行定向进化,通过多轮突变,在原有的能产靛蓝的高活力突变酶的基础上成功获得了三个高于亲本酶的突变酶,突变酶的酶活分别是亲本酶的6.6倍(hml001),9.6倍(hml002)和5.3倍(hml003),并对突变酶的动力学参数进行了分析.突变酶DNA测序的结果表明,hml001含有一个有义氨基酸置换I39V,hml002含有三个有义氨基酸置换D168N,A225V,K440N,hml003含有一个有义氨基酸置换E435D,这些突变位点有些远离底物结合部位,有些位于底物结合部位.
- 李红梅梅乐和URLACHER VLADASCHMID ROLF D
- 关键词：定向进化靛蓝催化活性
- 10-对硝基苯氧基癸酸合成工艺的改进被引量：2
- 2006年
- 对10-对硝基苯氧基癸酸合成工艺进行了改进.以10-溴代癸酸为原料,与甲醇反应生成10-溴代癸酸甲酯,再与对硝基酚钠反应生成10-对硝基苯氧基癸酸甲酯,最后以固定化脂肪酶水解得到10-对硝基苯氧基癸酸.对中间体的折光率和紫外-可见光谱进行分析,并通过紫外-可见光谱1、H-NMR和13C-NMR以及酶分析应用对最终产物进行确证.结果表明,成功合成出目标化合物,总收率达到71.6%.
- 杨建丽梅乐和林东强姚善泾
- 不同碳源及通气条件下lpdA基因敲除对大肠杆菌代谢的影响被引量：3
- 2006年
- lpdA基因编码的lipoamidedehydrogenase是丙酮酸脱氢酶复合体、α酮戊二酸脱氢酶复合体和甘氨酸裂解多酶体系的组成亚基之一.比较了不同碳源及通气条件下,lpdA基因敲除突变E.coli与野生E.coli的发酵特性,并通过对一些主要的酶活和胞内代谢产物浓度的测量,考察了lpdA基因敲除对E.coli代谢的影响.结果表明:葡萄糖为碳源的有氧条件下,lpdA基因的敲除导致丙酮酸、D乳酸、L谷氨酸的积累,TCA循环的抑制,乙醛酸途径和磷酸戊糖途径中的磷酸葡萄糖脱氢酶的激活.乙酸或丙酮酸为碳源的有氧发酵及葡萄糖为碳源的微氧发酵实验补充了以上的结论.
- 李迈姚善泾清水和幸
- 关键词：LPDA丙酮酸D-乳酸L-谷氨酸
- 纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶发酵条件优化
- 纳豆激酶是由纳豆枯草杆菌产生的一种具有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶。针对目前常用菌株的产酶活力较低、不能完全满足要求的问题,采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略,从纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的菌株,该菌株在筛选培养基上...
- 梅乐和胡升许静姚善泾郑晓冬
- 关键词：纳豆激酶响应面法
- 文献传递
- 纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶发酵条件优化被引量：57
- 2004年
- 纳豆激酶是由纳豆枯草杆菌产生的一种具有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶。针对目前常用菌株的产酶活力较低、不能完全满足要求的问题,采用酪蛋白平板初筛—摇瓶复筛的筛选策略,从纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的菌株,该菌株在筛选培养基上进行摇瓶培养,发酵液中纳豆激酶的酶活达到970IU/mL.用Plackett Burman方法对影响液体发酵的各因素的效应进行了评价,并筛选出了有显著效应的四个主要因素:胰蛋白胨浓度、种龄、发酵温度和Na2HPO4浓度;在此基础上,用最陡爬坡路径逼近最大产酶条件区域;最后通过中心组合实验及响应面分析优化了纳豆枯草杆菌液体发酵的条件.通过在初始发酵条件和优化发酵条件下的对比研究,液体发酵液中纳豆激酶浓度从1005IU/mL提高到1314IU/mL,表明响应面法优化可成功地用于纳豆枯草杆菌液体发酵的条件优化.
- 梅乐和胡升许静姚善泾郑晓冬
- 关键词：纳豆激酶响应面法
- 纳豆中纳豆枯草杆菌的筛选和纳豆激酶的分离过程研究被引量：23
- 2005年
- 采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的筛选策略,从日本传统食品纳豆中筛选获得了一株高产纳豆激酶的纳豆枯草菌菌株,与国内公开报道的不同菌株相比,有更好的产酶能力。菌株经过液体发酵后获得含酶发酵液,采用硫酸铵盐析及SephadexG-75凝胶层析、SepharoseCMFastFlow离子交换层析对纳豆激酶进行了分离纯化,两步层析的纯化倍数和酶活回收率分别达到4.75、74.3%和1.32、77%,获得了纯度很高的纳豆激酶。
- 黄俊梅乐和胡升盛清许静吴晖姚善泾
- 关键词：纳豆纳豆激酶分离纯化
