山东省自然科学基金(Y2008C48)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘世海王海波刘相萍隋爱华李传智更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 慢病毒介导LIGHT基因在结直肠癌细胞HCT116中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的观察慢病毒介导的LIGHT基因对结直肠癌细胞HCTll6的作用。方法将LIGHT基因克隆至慢病毒表达载体中，在293T细胞中进行病毒的包装。慢病毒以不同的感染复数（MOI）感染HCT116细胞，通过绿色荧光蛋白的表达和细胞活性筛选最适MOI。重组慢病毒感染HCT116细胞，实时荧光定量聚合酶链反应（Real—timePCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测细胞中LIGHT基因和蛋白的表达。噻唑蓝（MTT）实验检测细胞的生长活性。结果经酶切和测序鉴定证实重组慢病毒载体构建成功。重组慢病毒的滴度为1．96x10^8TU／ml。慢病毒MOI为2感染HCT116，转染效率可达92％。慢病毒感染24、48、72、120h后，细胞中LIGHTmRNA的表达量分别是空白对照组的19．03、68．59、94．35和q1．71倍，明显高于空白对照组和慢病毒对照组（P〈0．05）；并且重组慢病毒组细胞中LIGHT蛋白含量从12h的0增加到72h的11.36μg／L，其相对生长增殖率也显著低于慢病毒对照组和空白对照组（P〈0．05）。结论成功构建LIGHT基因过表达慢病毒载体；重组慢病毒可有效转染结直肠癌细胞HCT116，高效表达LIGHT蛋白，并对HCT116细胞有明显抑制作用。
- 王海波隋爱华刘世海骆铮李传智刘相萍
- 关键词：结直肠癌慢病毒基因转染
- 大气压冷等离子体射流诱导乳癌细胞凋亡研究被引量：1
- 2013年
- 目的研究大气压冷等离子体射流对乳癌细胞系MDA-MB-468细胞的凋亡诱导作用。方法采用自行研制的大气压冷等离子体射流发生装置,处理MDA-MB-468细胞。大气压冷等离子体射流处理时间分别为10、30、60和90s,以不处理者为空白对照组,以单纯气流处理90s者为实验对照组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率,二脒基苯基吲哚(DAPI)染色检测各组细胞的核形态变化,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)测定各组细胞Bax和Bcl-2mRNA的表达变化。结果大气压冷等离子体射流可明显抑制细胞的增殖,且有明显的剂量依赖性(F=22.4、42.3,P<0.01),而单纯气流对MDA-MB-468细胞无明显影响。经大气压冷等离子体射流处理后细胞出现核固缩及核碎裂。大气压冷等离子体射流作用后细胞Bax的表达上调,Bcl-2的表达下调(F=32.3、12.4,P<0.05)。结论大气压冷等离子体射流对MDA-MB-468细胞有增殖抑制作用,可能与Bax表达上调及Bcl-2表达下调诱导细胞凋亡有关。
- 丁威利隋爱华刘世海刘相萍王静王海波
- 关键词：乳腺肿瘤细胞凋亡基因,BCL-2BCL-2相关X蛋白质
