黑龙江省研究生创新科研项目(YJSCX2011-377HLJ)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：张涛陈英利李翀苏晓杰朴金花更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学佳木斯大学石嘴山市第二人民医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省研究生创新科研项目黑龙江省卫生厅科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 携带Survivin-△3(T34A)的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗与抗肿瘤效果初探被引量：2
- 2012年
- 目的探讨携带Survivin-△3(T34A)基因的减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗对乳腺瘤MCF-7注射细胞小鼠的保护作用及其效果。方法人工合成Survivin-△3(T34A)基因,先后将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1和pVAX1载体,获得pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP真核表达载体,电转化至减毒鼠伤寒沙门菌;小鼠分别口服pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP转染沙门菌(实验组)、pVAX1-EGFP转染沙门菌(空质粒组)、沙门菌(对照组)和PBS(空白对照组)后,再皮下注射MCF-7乳腺癌细胞,采用Western-blotting检测Survivin-△3(T34A)蛋白水平,以及测定注射部位瘤块的体积大小。结果成功构建了真核表达载体pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP并转化到减毒鼠伤寒沙门菌得到表达;在空质粒组、细菌组、空白对照组和实验组小鼠中,肿瘤瘤块平均直径分别为(25.813±0.108)mm、(25.627±0.117)mm、(26.257±0.213)mm、(9.124±0.086)mm;实验组与其他组相比,差异有统计学意义(P<0.05),且能在血清中检测到Survivin-△3(T34A)-EGFP融合蛋白的存在。结论小鼠口服携带Survivin-△3(T34A)真核质粒的沙门菌后,能够抑制MCF-7乳腺瘤细胞的增殖和扩散。
- 陈英利祁冬冬李翀朴金花张霞苏晓杰林雪松张涛
- 关键词：存活素减毒鼠伤寒沙门菌PVAX1
- pH值对两种胶体金试剂条检测胃液潜血的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:研究在胃液潜血实验中不同pH值对结果的影响。方法:在中性环境下逐渐增加血红蛋白浓度,测定两种潜血试纸条的最低检测限;用5 mol/L NaOH调节新鲜胃液的pH值,确定能检测出血红蛋白的临界pH值;在临界pH的环境里,改变血红蛋白浓度和测定时间,检测时间与浓度对检出率的影响。结果:两种试纸条的最低检测限为0.2μg/ml和0.4μg/ml;pH值3.7时不能检测出血红蛋白;在pH<3.7的酸性环境里,血红蛋白浓度升高会暂时延长潜血实验结果阳性的时间。结论:胃液潜血实验在pH<3.7酸环境中检测,使结果出现假阴性,可以通过调节pH值和镜下观察得出正确结论。
- 祁冬冬陈英利李翀张涛
- 关键词：胃液潜血血红蛋白PH值
- 4T42肽腺病毒载体的构建包装及抗SKBR3乳腺癌细胞的效果
- 2012年
- 目的构建携带有肿瘤抑素相关T42肽(以下简称T42肽)基因的重组腺病毒载体,并转染HEK293细胞中进行病毒包装,最终感染SKBR3乳腺癌细胞,体外四倍体T42肽(4T42)抗SKBR3乳腺癌细胞的效果。方法利用同尾酶连接技术将T42肽进行两次克隆形成4T42,并将其亚克隆至穿梭质粒pEC3.1(+)-EGFP中,获得重组质粒pEC3.1(+)-EGFP-4T42。体外重组至骨架载体pAd/BLOCK-iTTM-Dest(pAd-BL-Dest),获得重组质粒pAd-EGFP-4T42。将该重组骨架质粒转染HEK293细胞,利用RT-PCR方法和荧光显微镜观察标志蛋白-绿色荧光蛋白的表达情况以判断T42转染成功与否。利用病毒倍比稀释法利用荧光显微镜检测病毒滴度,用重组腺病毒感染SKBR3乳腺癌细胞。采用流式细胞仪检测感染重组腺病毒的SKBR3胞凋亡率,MTT实验检测感染重组腺病毒的MCF细胞的生长情况。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确,重组腺病毒获得成功包装,纯化的病毒滴度为4*108 DRP/ml。重组腺病毒rAd-EGFP-4T42感染MCF细胞后较对照组未转染空白组细胞凋亡率高(P<0.05);Ad-EGFP-4T42质粒转染组与对照组相比,明显抑制MCF细胞生长(P<0.05)。结论体外4T42肽具有显著促进SKBR3乳腺癌细胞凋亡和抑制SKBR3乳腺癌细胞生长的作用。
- 祁冬冬陈英利郭建壮朱贵明张涛姜爽王宇卓
- 关键词：肿瘤抑素腺病毒载体绿色荧光蛋白
