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国家自然科学基金(30801021)
作品数:
2
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栗占国
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2010
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微小RNA-146a对类风湿关节炎患者滑膜成纤维细胞抑制作用的研究
被引量:11
2010年
目的研究微小RNA-146a(miR-146a)对类风湿关节炎(RA)患者滑膜成纤维细胞增殖及细胞因子分泌的影响。方法体外分离培养RA患者滑膜成纤维细胞,脂质体转染化学合成的miR-146a,^3H掺入法检测滑膜成纤维细胞增殖,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清白细胞介素(IL)-8及IL-6水平。实时定量聚合酶链反应(PCR)检测滑膜成纤维细胞中miR-146a靶分子肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IL-受体相关激酶(IRAK1)的mRNA水平。应用独立样本t检验进行统计学分析。结果与阴性对照小RNA相比,miR-146a转染后的滑膜成纤维细胞增殖能力明显下降(2015±545与8799±1922,P〈0.01),IL-8及IL-6分泌受到明显抑制[(153±49)pg/ml与(311±123)pg/ml,P〈0.01和(295±95)pg/ml与(459±126)pg/ml,P〈0.05]。定量PCR检测IRAK1的mRNA水平显示,miR-146a转染可明显下调滑膜成纤维细胞IRAK1的表达(0.28±0.07与1,P〈0.01)。结论miR-146a可能通过下调IRAK1表达,进而抑制滑膜成纤维细胞增殖及IL-8、IL-6等炎性细胞因子分泌,从而发挥抑制RA滑膜炎症的作用。
张晓苹
李茹
王世瑶
穆荣
刘燕鹰
慈春增
栗占国
关键词:
关节炎
类风湿
滑膜
成纤维细胞
微小RNA
MiR-155在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中的表达及功能研究
被引量:9
2010年
目的检测miR-155在类风湿关节炎(RA)患者滑膜成纤维细胞(SFs)中的表达,探讨miR-155对RASFs细胞因子分泌、细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制。方法留取RA患者及骨关节炎(0A)患者各9份膝关节置换术后滑膜组织,分离培养滑膜成纤维细胞,取第3N5代细胞用于实验。①提取总RNA,利用实时定量聚合酶链反应(RT—PCR)方法测定miR-155在RASFs和OASFs中固有性表达水平。②Lipo2000脂质体分别转染化学合成的miR-155类似物,miR-155抑制剂及无关序列小RNA对照。③转染48h后通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清基质金属蛋白酶(MMP)-3的分泌;通过,H掺入法检测细胞增殖;通过细胞侵袭试验(transwell)法检测细胞侵袭能力;通过RT—PCR法检测miR-155下游靶标IKBKE的mRNA表达水平。2组比较采用独立样本t检验,多组比较采用方差分析。结果①RA患者SFs中miR-155的表达明显高于OA组[分别为(1.79±1.94)和(0.11±0.17),P〈0.05];②miR-155可抑制RASFs分泌MMP-3、细胞增殖和侵袭能力;③RASFs过表达miR-155后IKBKE的mRNA水平明显下调(P〈0,05)。结论RASFsmiR-155的表达上调,可能与滑膜局部的炎症环境相关;miR-155抑制RASFs增殖和降低侵袭能力可能是RASFs分泌MMP-3减少的原因之一,miR-155抑制RASFs分泌MMP-3可能与miR-155下调靶标IKBKEmRNA表达水平相关。
于萍
龙丽
王世瑶
李茹
张晓萍
刘燕鹰
崔刘福
栗占国
关键词:
微小RNAS
滑膜
成纤维细胞
MIR-155
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